[发明专利]一组岩藻糖基转移酶突变体及其筛选方法和应用有效
| 申请号： | 201611051529.1 | 申请日： | 2016-11-25 |
| 公开（公告）号： | CN108103039B | 公开（公告）日： | 2021-10-22 |
| 发明（设计）人： | 杨广宇;谭玉萌;冯雁;韩云宾;刘新平 | 申请（专利权）人： | 上海交通大学 |
| 主分类号： | C12N9/10 | 分类号： | C12N9/10;C12N15/54;C12P19/18 |
| 代理公司： | 上海一平知识产权代理有限公司 31266 | 代理人： | 徐迅;马莉华 |
| 地址： | 200240 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一组 糖基转移酶 突变体 及其 筛选 方法 应用 | ||
1.一种岩藻糖基转移酶，其特征在于，所述糖基转移酶在SEQ ID NO:2的基础上发生如下突变：
第127位天冬氨酸被天冬酰胺取代；或
第128位的精氨酸被谷氨酸或酪氨酸取代；或
第131位的组氨酸被异亮氨酸或亮氨酸或甲硫氨酸取代；或
第146位的赖氨酸被天冬酰胺取代；或
第199位的酪氨酸被天冬酰胺取代；或
第223位的赖氨酸被谷氨酸取代；或
第340位的谷氨酸被天冬氨酸取代；或
第368位的缬氨酸被丙氨酸取代；或
第383位的天冬酰胺被赖氨酸取代；或
第407位的天冬氨酸被天冬酰胺取代；或
第127位天冬氨酸被天冬酰胺取代和第131位组氨酸被甲硫氨酸取代；或
第128位精氨酸被酪氨酸取代和第131位组氨酸被亮氨酸取代；或
第340位谷氨酸被天冬氨酸取代和第368位缬氨酸被丙氨酸取代；或
第199位的酪氨酸被天冬酰胺取代和第368位的缬氨酸被丙氨酸取代；或
第199位的酪氨酸被天冬酰胺取代、第368位的缬氨酸被丙氨酸取代和第340位的谷氨酸被天冬氨酸取代；或
第45位的丝氨酸被苯丙氨酸取代、第199位的酪氨酸被天冬酰胺取代和第223位的赖氨酸被谷氨酸取代；或
第127位天冬氨酸被天冬酰胺取代、第128位的精氨酸被谷氨酸取代和第131位的组氨酸被异亮氨酸取代；或
第45位的丝氨酸被苯丙氨酸取代、第199位的酪氨酸被天冬酰胺取代、第368位的缬氨酸被丙氨酸取代和第340位的谷氨酸被天冬氨酸取代；或
第45位的丝氨酸被苯丙氨酸取代、第127位天冬氨酸被天冬酰胺取代、第128位的精氨酸被谷氨酸取代、第131位的组氨酸被异亮氨酸取代、第199位的酪氨酸被天冬酰胺取代、第368位的缬氨酸被丙氨酸取代和第340位的谷氨酸被天冬氨酸取代；或
第45位的丝氨酸被苯丙氨酸取代、第199位的酪氨酸被天冬酰胺取代、第127位天冬氨酸被天冬酰胺取代、第128位的精氨酸被谷氨酸取代、第131位的组氨酸被异亮氨酸取代和第223位的赖氨酸被谷氨酸取代。
2.一种多核苷酸，其特征在于，所述多核苷酸编码如权利要求1所述的岩藻糖基转移酶。
3.一种表达载体，其特征在于，所述表达载体包含有权利要求2所述的多核苷酸。
4.一种基因工程化的细胞，其特征在于，所述的细胞包括权利要求3所述的表达载体或其基因组中整合有权利要求2所述的多核苷酸。
5.一种提高岩藻糖基转移酶催化活性的方法，其特征在于，在生物酶法催化体系中，使用如权利要求1所述的岩藻糖基转移酶。
6.一种糖基转移酶在合成岩藻糖基化寡糖及其糖缀合物中的应用，其特征在于，使用了包含权利要求1所述的岩藻糖基转移酶。
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