[发明专利]一种预防与治疗肿瘤的肽聚糖-锌螯合物及其制备方法

说明书

一、技术领域

本发明是一种新物质的合成，此物质涉及医药、食品及饲料添加、生物化学等领域，特别涉及医药领 域。

二、背景技术

现在只有对肽聚糖的制备及其方法，但并未有人进行肽聚糖-锌螯合物的制备。

肽聚糖对肿瘤的抑制和预防效果有限。肽聚糖的提取工艺耗费时间长，操作繁琐，提取率低，且提取 试剂具有危险性。

现在只有用多肽或者有机酸来改变锌的形态，使无机锌离子转变成有机锌化合物。而本发明首次使用 多肽与糖的聚合物来改变锌的形态，在不改变肽聚糖活性的情况下，使功效叠加。

三、发明内容

本发明合成了一种新的物质，可从各种细菌中提取，由肽聚糖和锌离子螯合而成。此物质对食道癌、 结肠癌、膀胱癌、肝癌、肺癌和乳腺癌等具有抑制作用，对头颈部癌症、食道癌及结肠癌等癌症的具有预 防作用，能提高身体免疫力。同时，还具有高效补锌的效果。可作为药品、保健品、食品及饲料补锌剂。

本发明在肽聚糖制备方法的基础上，对制备方法进行了改进制备出一种新型物质(肽聚糖-锌螯合物)。 本物质可以从各类细菌细胞壁中提取合成，且对肽聚糖提取工艺进行了改进，缩短了提取时间，增加了操 作的简便性、有效性和安全性，增加了防治癌症的疗效。

本发明首次利用多肽和糖的聚合物来改变锌的形态，将无机锌离子转变成了有机锌化合物，增加了人 体吸收的高效性，使肽聚糖与锌的功效得到叠加。

四、具体实施方式

制备方法：

1、收集菌种：将乳酸菌(双歧杆菌、嗜热链球菌、保加利亚菌等皆可)经扩大培养后，4000r/min，30min 离心后，取沉淀温箱65℃，2-3h烘干，以恒重为准。

2、去除磷壁酸：取乳酸菌样品，按照固体液体比为1∶5加入预热至65℃、10％TCA(三氯乙酸)，65℃ 抽提1h。离心4000r/min，30min，去上清液，取沉淀用双蒸水彻底洗涤。蒸馏水和乙醇(1∶2)清洗5次， 每次五分钟，4000r/min离心。

3、去脂：取沉淀，按固液(1∶3)加入甲醇，4000r/min，30min离心。同法甲醇∶氯仿(1∶1)及氯仿 各清洗一次，脱脂后离心，控干氯仿。

4、水解多余蛋白质并进行螯合：将固体物质转入平皿中，加入100ml提前过滤除菌并预热至37℃的含 有胰蛋白酶(1mg/ml)及碱性蛋白酶(0.5mg/ml)、PH7.2的Tris-HCl缓冲液、400μg/mLZnCl。将平皿置 于空气摇床，37℃振荡孵育24h。孵育结束后，三角瓶中的样品离心(4000r/min，15min)获得沉淀，将沉淀用 PH7.2的Tris-HCl的缓冲液振荡摇匀后，离心(4000r/min，30min)，弃上清，如此离心清洗两次。

5、乳酸菌壁肽聚糖-锌螯合物的分离纯化：向沉淀加入400μg/mLZnCl溶液，将螯合液连续进行透 析，透析后45℃温箱烘干，得到肽聚糖-锌螯合物。

产品为淡黄色，提取合成率可达12％。

产品说明：肽聚糖锌螯合物包括完整肽聚糖与锌的螯合物、非完整肽聚糖(即肽聚糖片段)与锌的螯合物。 以上提取的大部分是完整肽聚糖与锌的螯合物。细菌中一般都可以提取合成肽聚糖-锌螯合物。

效果：1、单一的肽聚糖只能做到对结肠癌等肿瘤细胞进行抑制，且防治效果有限。单一的锌以离子形态 不易让人体吸收，且有副作用。

2、肽聚糖-锌螯合物的效果比肽聚糖预防和治疗更加有效，尤其对消化系统癌症，且改变了锌的 形态，使人体对锌的吸收更加高效，提高人体免疫力，辅助肽聚糖更加防治癌症。

3、肽聚糖-锌螯合物的提取合成工艺更比单一肽聚糖的提取更加简便、安全，缩短了提取时间， 提高了提取效率。