[发明专利]一种用于分子标记辅助育种检测棉花植株对黄萎病抗性的方法

权利要求书

1.一种检测棉花植株对黄萎病抗性的方法，其特征在于，该方法包括：

（1）将待测棉花植株的种子用浸种液浸泡；所述浸种液是将死于黄萎病的棉花植株的组织粉碎，用水浸泡，过滤得到的菌悬液；

（2）将浸泡后的种子种植于病圃中；所述病圃是将死于黄萎病的棉花植株的组织粉碎掺入土壤之后构建的；

（3）选择能够在病圃中存活的棉花植株作为初筛棉花植株；

（4）分别使用第一引物对和第二引物对初筛棉花植株的基因组DNA进行PCR扩增，得到第一扩增产物和第二扩增产物；第一引物对如SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2所示，第二引物对如SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:4所示；

如果第一扩增产物中具有SEQ ID NO:5所示的核酸且第二扩增产物中具有SEQ ID NO:6所示的核酸，则指示待测棉花植株为抗黄萎病植株。

2.根据权利要求1所述的方法，其中，所述PCR扩增的条件包括：变性温度为93.5-94.5℃；退火温度为54.5-55.5℃。

3.根据权利要求2所述的方法，其中，所述PCR扩增的条件还包括：PCR循环数为28-32轮。

4.根据权利要求1所述的方法，其中，制备浸种液时，相对于每重量份的死于黄萎病的棉花植株的组织，水的用量为5重量份。

5.根据权利要求1或4所述的方法，其中，用浸种液浸泡种子时，相对于每重量份的种子，浸种液的用量为2重量份。

6.根据权利要求5所述的方法，其中，用浸种液浸泡种子的时间为6小时。

7.根据权利要求1所述的方法，其中，构建病圃时，相对于每平方米的土壤，死于黄萎病的棉花植株的组织的掺入量为3kg。