[发明专利]诱导间充质干细胞向肾小球系膜细胞分化的培养液及方法

权利要求书

1.一种诱导间充质干细胞向肾小球系膜细胞分化的培养液，其特征在于，包括人血小板衍生生长因子-BB、全反式维甲酸、IV型胶原和基础培养基。

2.根据权利要求1 所述的诱导间充质干细胞向肾小球系膜细胞分化的培养液，其特征在于，人血小板衍生生长因子-BB 的浓度为200 ng/ml，全反式维甲酸的浓度为1 μmol/L。

3.根据权利要求1 所述的诱导间充质干细胞向肾小球系膜细胞分化的培养液，其特征在于，IV型胶原是以5μg/cm²的浓度包被于培养板表面。

4.根据权利要求1或2 所述的诱导间充质干细胞向肾小球系膜细胞分化的培养液，其特征在于，所述基础培养基为含有2%的马血清、5ng/ml的bFGF的低糖DMEM培养液。

5.一种诱导间充质干细胞向肾小球系膜细胞分化的方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1) 配制诱导培养液：以低糖DMEM 为基础培养基，添加2%的马血清、5ng/ml的bFGF和诱导剂人血小板衍生生长因子-BB、全反式维甲酸，混匀，4度保存；

(2) 制备人间充质干细胞；

(3) IV型胶原包被培养板：按照每平方厘米培养板表面积5μg的IV型胶原的浓度包被24孔培养板；

(4) 取间充质干细胞，以5×10³/cm²的细胞密度接种于IV型胶原包被的24孔培养板中，添加0.5ml诱导培养液进行诱导培养。

6.(5) 每3天换液，诱导培养9天去除培养液，收集细胞并置于-20度保存。