[发明专利]一种微小RNA在制备抗肿瘤的药物中的应用

说明书

技术领域

本发明涉及生物制药领域，尤其涉及一种以转录因子为靶标的miRNA的抗肿瘤的应用。

背景技术

EMT为上皮细胞-间质转化(epithelial- mesenchymal transition)的简称。上皮-间质转化是指上皮细胞通过特定程序转化为具有间质表型细胞的生物学过程。上皮-间质转型是上皮性肿瘤侵袭、转移过程中的重要步骤，在胚胎发育、慢性炎症、组织重建、癌症转移和多种纤维化疾病中发挥了重要作用，其主要的特征有细胞黏附分子(如E-钙黏蛋白，Ecadherin)表达的减少、细胞角蛋白细胞骨架转化为波形蛋白（Vimentin）为主的细胞骨架及形态上具有间充质细胞的特征等。通过EMT，上皮细胞失去了细胞极性，失去与基底膜的连接等上皮表型，获得了较高的迁移与侵袭、抗凋亡和降解细胞外基质的能力等间质表型。EMT是上皮细胞来源的恶性肿瘤细胞获得迁移和侵袭能力的重要生物学过程。阐明调控恶性肿瘤细胞发生EMT过程的分子机制，明确其在恶性肿瘤的发生、发展、转移中的病理意义，并探索基于EMT关键分子的诊断方法及靶向EMT关键分子的治疗手段是肿瘤转移中EMT机制研究的关键科学问题。上皮细胞特征蛋白E-钙粘蛋白的表达下降及间质细胞特征蛋白波形蛋白的表达增加可以作为细胞发生上皮-间质转型的标志。

上皮-间质转型相关调控因子包括ZEB1（E盒结合锌指蛋白，zinc finger E-box-binding pro tein，ZEB），ZEB2， SNAI1（锌指转录因子），SNAI2等，这些调控因子通过抑制E-钙粘蛋白的表达，促进了上皮-间质转型过程的发生，进而增加了肿瘤细胞的侵袭和转移能力。转化生长因子-β是上皮-间质转型的重要诱导因子，采用转化生长因子-β处理上皮性肿瘤细胞在多种类型肿瘤中可以成功诱导细胞发生上皮-间质转型。在各种调控上皮-间质转型过程的分子中，微小RNA（microRNA，miRNA）对于其的调控作用越来越被重视。已有报道证实，微小RNA-200家族（miRNA-200）可以通过抑制ZEB1和ZEB2基因的表达，抑制EMT过程。

发明内容

鉴于上述的现有技术中的问题，本发明采用miRNA芯片的方法，得出一种miRNA的抗肿瘤的用途。

本发明提供的一种微小RNA（miRNA）在制备抗肿瘤的药物中的应用，所述微小RNA（本发明称为miR-153）有下列核苷酸序列的正义链和反义链组成：

正义链：5’-UUGCAUAGUCACAAAAGUGAUC-3’，

反义链：5’-GAUCACUUUUGUGACUAUGCAA-3’。

其中，U可以是胸腺嘧啶或尿嘧啶，并优选为尿嘧啶（U）。

所述抗肿瘤，可以是指治疗肿瘤、预防肿瘤、以及抑制肿瘤生长和转移。

在本发明的一个较佳实施方式中，所述用途为在制备抑制细胞上皮-间质转型的药物中的应用。

在本发明的另一较佳实施方式中，所述为上皮性肿瘤，如肺癌、肝癌、白血病、胃癌、宫颈癌、口腔癌、结直肠癌、胰腺癌、前列腺癌、舌癌或乳腺癌。

在本发明的另一较佳实施方式中，所述肿瘤是舌癌、乳腺癌、口腔癌或肺癌。

其中，所述药物可以是注射制剂、冻干粉剂等。更优选地，所述药物还包括载体，将所述miRNA负载于载体中。

根据本发明的一种优选实施方式，所述微小RNA还可以与其它具有抗肿瘤作用的微小RNA一起使用，制备抗肿瘤药物。

在本发明所述的优选实施方式中，所述其它微小RNA优选为miRNA-200家族中的任意一种或几种，如miR-200c。

本发明的实施例通过采用miRNA芯片的方法，比较了发生EMT的肿瘤细胞和未发生EMT的肿瘤细胞之间miRNA的差异表达情况，并采用定量PCR方法予以验证后，发现miR-153是一种新发现的调控EMT过程的重要miRNA，该miRNA对于肿瘤细胞维持及获得EMT特性具有重要作用。对于该分子的进一步分析表明ZEB2和SNAI1是miR-153的作用靶点，miR-153通过抑制ZEB2和SNAI1的表达，抑制EMT的发生。同时，在体内实验和体外实验中，我们发现采用miR-153干预处理的手段，可以抑制上皮性肿瘤细胞侵袭和转移。并且，对于一组口腔癌患者的临床样本统计分析发现，miR-153的低表达与患者的转移率正相关，与患者的生存率负相关。

附图说明