[发明专利]检测肝豆状核变性ATP7B基因突变的试剂盒无效
| 申请号： | 201210179423.5 | 申请日： | 2012-05-30 |
| 公开（公告）号： | CN102719536A | 公开（公告）日： | 2012-10-10 |
| 发明（设计）人： | 方国伟;王淑一;陈亦磊;徐建成;孙翠莲 | 申请（专利权）人： | 杭州艾迪康医学检验中心有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 浙江杭州金通专利事务所有限公司 33100 | 代理人： | 黎双华;徐关寿 |
| 地址： | 310023 浙江省杭州市*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 检测 肝豆状核 变性 atp7b 基因突变 试剂盒 | ||
【权利要求书】：
1.检测肝豆状核变性ATP7B基因突变的试剂盒，其特征在于，包括：
(i) PCR扩增反应试剂；
(ii) 用于扩增样本DNA中ATP7B基因的PCR引物：
exon 8： Forward: 5’ AAACCCTTCACGTTCCTTGTCA 3’
Reverse: 5’ AAGGCAGCTCTT TTCTGAAA 3’
exon 12： Forward: 5’ ACTT GTGGTGT TTTATTT CT TCA 3’
Reverse: 5’ AACCACCAT ATAGCCCAAGA 3’。
2.如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒的使用方法包括如下步骤：
(i) 采集待测血液样本，提取DNA；
(ii) 以该DNA为模板，用所述用于扩增样本DNA中ATP7B基因的PCR引物进行PCR扩增，得到PCR反应产物，进行HRM实验；
(ⅲ) HRM分析：确定是否存在第778个碱基G→T突变位点或第952个碱基G→A突变位点。
3.如权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，步骤(ii)的PCR反应按以下条件进行扩增：94℃ 2min；98℃ 10s、 57℃ 30s、68℃ 25s， 20个循环；最后68℃ 5min。
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