[发明专利]一种海洋低温蛋白酶MP水解发制品脱鳞的方法

说明书

技术领域

本发明涉及发制品加工领域，具体的说是涉及一种海洋低温蛋白酶MP水解发制品脱鳞的方法。

背景技术

我国人发制品业发展历史渊源于二十世纪50年代，现已成为中国较为特色的传统出口创汇项目，作为劳动密集型产业，对提高城乡劳动就业率有积极贡献。据海关统计，2010年我国发制品进出口总额为21.16亿美元，与2009年同期相比增长21.9％。众所周知，以东方人发为材料生产供欧美市场使用的发制品，需首先限制性破坏表面鳞质层，使其达到所需求的柔软程度，再以氧化手段脱除黑色素，进而生产出色发成品。然而人发鳞质层的基础成分是各种天然氨基酸组成的硬性角蛋白质，这些天然的角蛋白属不溶性蛋白质，具有特殊的结构，呈纤维状，稳定性高、弹性好、膨胀性小，是保持人发正常状态的主要屏障。一般情况下，它既不溶于水、稀的酸和碱，也不为普通动物的胃蛋白酶所消化。故多年来发制品制造业均采用浓酸法进行发制品的脱鳞，但酸法水解存在诸多缺点，如：水解度难以控制，胱氨酸、色氨酸等被破坏后形成黑色不溶物沉积头发表面，并伴有恶臭产生而严重污染环境，色发成品抗拉强度、保湿性及抗紫外线氧化性能大为降低等，严重影响色发成品的产品质量和档次，产品质量合格率＜50％。椐了解对人发角蛋白质最有效的商品水解酶是角蛋白酶，但试验结果，角蛋白酶对人发表面鳞质层缺乏满意的作用专一性，易将其彻底水解成低聚肽和芳香族游离氨基酸，而无法实际应用。

发明内容

本发明的目的在于克服上述现有技术中存在不足，在开发海洋微生物-海洋细菌YS-80低温碱性蛋白酶基础上，进一步开发提供一种海洋低温蛋白酶MP水解发制品脱鳞的方法。

本发明提供的海洋低温蛋白酶MP水解发制品脱鳞的方法，其特征在于包括下列步骤：

(1)、处理液的制备

处理液为氯化钙0.1-0.3质量％，pH 8-10的硼砂缓冲液，海洋低温蛋白酶MP/发制品质量百分比为2-5质量％，优选为3-3.5质量％，渗透剂脂肪醇聚氧乙烯醚市售添加量为0.2-1.5质量％；优选为0.5-1.0质量％；

(2)、水解脱鳞

发制品/处理液比例为8-15g/L，优选为10-12g/L，反应温度为20-35℃，优选为25-28℃，pH为7-10，优选为8-9，水解脱鳞时间为7-9小时，优选为7.5-8.5小时。

抗拉力强度测定

经处理过的头发，去掉发梢和发根后，将其剪成等长的两段，对应地分为两组晾干，用DIANS-A头发强度测定仪直接测定。

头发防晒系数的测定

头发用抗张强度试验机拉伸，在屈服区内应力应变曲线斜度的改变与紫外线照射量有关。以屈服斜度对数的负倒数(-1/ln)作为暴露时间的函数作图时，在0～3h之间获得一条直线。并模拟SPF，人为的划分为15个标度，即″O″指定为3小时这个点，代表最大的损伤，“15”指定为没有紫外线损伤的未暴露值。

本发明提供的海洋低温蛋白酶MP水解发制品脱鳞的方法中，所述海洋低温蛋白酶MP(或称海洋低温碱性蛋白酶MP)由海洋细菌YS-80发酵制备(由黄海所提供或可市售海洋所产品而得)。将海洋细菌YS-80(分离自深海海泥海洋细菌(YS-80)，保藏在中国武汉CCTCC，保藏号为CCTCC NO：M209177，保藏证明已记载在专利申请号200910177301.0)。在最适温度(30℃)培养48h，海洋低温蛋白酶MP分泌到培养基中，离心(如5000rpm，30分)发酵液弃去菌体。上清液在4℃用65wt％硫酸铵沉淀30分钟，沉淀复溶于去离子水中，通过截留分子量为10kD的超滤膜浓缩上清液，冻干浓缩液，再在Tris缓冲液(10Mm Tris，100Mm NaCl，pH8.0)复溶冻干粉并用Superdex200(GE公司)分子筛凝胶柱层析纯化得到纯化的海洋低温蛋白酶MP。随着处理条件的变化其水解脱鳞效果有一定变化，但都能够实现本发明目的达到良好的脱鳞的效果，其中效果最优的发制品脱鳞效果优选为海洋低温蛋白酶MP 3-3.5％(酶/发制品质量百分比)、渗透剂脂肪醇聚氧乙烯醚0.5-1.0质量％、25-28℃、pH 8-9条件下，发制品/处理液比例为10-12g/L时，处理7.5-8.5小时。人发经海洋低温蛋白酶MP酶法脱鳞处理后平均抗拉力强度达到140.8g，头发防晒系数达到10.7以上，该方法工艺简单，效果好，使得人发鳞片层水解脱落，提高色发成品的质量和档次，是一种比酸法脱鳞更有效的新颖发制品脱鳞酶法处理技术。

具体实施方式