[发明专利]一种提高传代细胞系冻存细胞复苏率的复苏方法无效
| 申请号： | 201210004302.7 | 申请日： | 2012-01-09 |
| 公开（公告）号： | CN102559573A | 公开（公告）日： | 2012-07-11 |
| 发明（设计）人： | 刘长辉;王敏;边程 | 申请（专利权）人： | 北京大北农科技集团股份有限公司;福州大北农生物技术有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/00 | 分类号： | C12N5/00 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 100080 北京市海淀区中*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 提高 传代 细胞系 细胞 复苏 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种提高传代细胞系冻存细胞复苏率的复苏方法，其特征在于步骤如下：
(1)从液氮中取出细胞冻存管，置46-67℃水浴复苏，融化30-70秒，加入适配营养液，800转/分，离心5分，弃上清，得离心后的细胞；
(2)离心后的细胞用适配营养液稀释，无菌取样，用1％台盼蓝染色，计数活细胞数和细胞总数，计算复苏率为95-98％；
(3)其余细胞加入适配生长液，静止37℃培养5-7小时，至90-95％的细胞贴壁；
(4)更换细胞适配生长液继续培养48-72小时，至细胞完全融合生长成单层；按比例传代培养；完成细胞复苏生长繁殖周期。
2.权1所述的复苏方法，其特征在于所述的复苏温度为55-60℃。
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