[发明专利]中国黄牛成熟叠朊蛋白及其多克隆抗体的制备方法

权利要求书

1、一种中国黄牛成熟叠朊蛋白的制备方法，其特征在于用中国黄牛外周血的DNA为模板，根据中国黄牛叠朊蛋白编码基因Prnd的开放阅读框序列，设计一对引物进行聚合酶链式反应，得到中国黄牛成熟的叠朊蛋白编码基因，再将所得到的叠朊蛋白编码基因与原核表达载体连接，将中国黄牛的叠朊蛋白编码基因插在表达载体多克隆位点NdeI和XhoI之间，构建出重组表达质粒，将重组表达质粒转入原核宿主细胞得到表达菌株，再对表达载产物进行分离和纯化得到目的蛋白。

2、根据权利要求1所述的中国黄牛成熟叠朊蛋白的制备方法，其特征在于所用原核表达载体为pET-30a(+)，所用的原核宿主细胞为大肠杆菌BL21(DE3)，并在异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导下进行。

3、一种中国黄牛成熟叠朊蛋白，其特征是用权利要求1或2所述的方法制备。

4、权利要求3所述的中国黄牛成熟叠朊蛋白的用途，其特征在于用于制备检测叠朊蛋白存在或/和研究中国黄牛叠朊蛋白的试剂。

5、中国黄牛成熟叠朊蛋白的多克隆抗体的制备方法，用权利要求1或2所述的方法制备的叠朊蛋白在哺乳动物的皮下注射进行多次免疫，收集被免疫动物的血液并制备血清，所得血清即为所需要的抗体。

6、根据权利要求5所述的中国黄牛成熟叠朊蛋白的多克隆抗体的制备方法，其特征在于所用的免疫动物为兔。

7、中国黄牛成熟叠朊蛋白的多克隆抗体，其特征是用权利要求6所述的方法制备。    

8、权利要求7所述的中国黄牛成熟叠朊蛋白的多克隆抗体的用途，其特征是用于检测叠朊蛋白存在或/和研究中国黄牛叠朊蛋白的试剂。