本发明公开了一种双鸟苷酸环化酶改造基因、编码蛋白、工程菌及其构建方法和应用;该双鸟苷酸环化酶改造基因,其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示;该双鸟苷酸环化酶改造基因编码蛋白氨基酸序列如SEQ IDNO.2所示;其工程菌由克隆有SEQ ID NO.1所示基因的重组质粒转入大肠杆菌中获得,还公开了上述工程菌的构建方法及应用该工程菌生产双鸟苷酸环化酶,所得的双鸟苷酸环化酶进一步应用于转化三磷酸鸟苷生成环鸟苷二磷酸的方法该双鸟苷酸环化酶改造基因在大肠杆菌中的表达量高,根据双鸟苷酸环化酶改造基因编码的双鸟苷酸环化酶耐热性极强,最适反应温度为90℃,在70℃下保存6h保留70%的活性,该酶的比活力高、不容易出现产物抑制作用