本发明公开了一种融合碳端的重组蛛丝蛋白及其制备方法与基于重组蛛丝蛋白的载药微球,属于蛋白制备领域。融合碳端的重组蛛丝蛋白由8个重复核心序列和碳端序列组成,重组蛛丝蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示。为了实现重组蛛丝蛋白的简易表达,本发明将该重组蛛丝蛋白MaSp2(8R)+CT克隆在载体pCold I上,实现了无需克隆甘氨酸‑tRNA的编码序列就能成功诱导表达了重组蛛丝蛋白,并提供了纯化载体pCold I上重组蛛丝蛋白的方法。本发明提供的基于重组蛛丝蛋白的载药微球,相比于现有的载药微球,毒性更小,载药率和释放率更高,具有很好的应用前景。
本发明涉及包含主要蛋白质和一个或多个延伸肽的融合蛋白,其中主要蛋白质的氨基酸序列与哺乳动物蛋白质或其片段的氨基酸序列相同或相似,并且所述延伸肽包含O‑糖基化氨基酸簇。延伸肽与哺乳动物蛋白的非重复序列相同和/或与SEQ ID NO:1相同或相似。主要蛋白质优选地为VWF。与主要蛋白质相比,融合蛋白具有增加的半衰期,并且可以用于增加例如FVIII的结合配偶体的半衰期。本发明进一步涉及由融合蛋白,编码融合蛋白的多核苷酸以及包含该多核苷酸的载体和宿主细胞形成的复合物。