本发明提供了昆虫杆状病毒表达载体、构建方法及其应用，所述昆虫杆状病毒表达载体包括含人抗体轻链Kappa保守区序列的昆虫杆状病毒表达载体I以及含人抗体重链IgG1保守区的昆虫杆状病毒表达载体II，所述表达载体I的序列如序列表SEQ ID 1所示，所述表达载体II的序列如序列表SEQ ID 2所示；还包括含α‑2，3‑唾液酸糖基转移酶ST3的昆虫杆状病毒表达载体III，所述表达载体III的序列如序列表SEQ所述昆虫杆状病毒表达载体可高效表达含重链和轻链的人源化抗体。
本发明公开了一种昆虫细胞表达载体、表达系统及其应用，所述昆虫细胞表达载体中含有增强子、信号肽和3’UTR非编码区；其中，增强子位于启动子前且序列如SEQ ID NO.1所示，信号肽位于启动子和多克隆位点之间且其碱基序列如本发明通过增强子、信号肽和3’UTR非编码序列联用的改造杆状病毒表达载体，进而有效改善昆虫细胞表达系统分泌外源蛋白的能力，获得可溶性、高纯度和高产量的重组蛋白；本发明提供的表达载体和表达系统广泛适用于制备真核生物的所有蛋白在昆虫杆细胞中高效分泌表达
