本发明公开了阿拉伯半乳糖苷酶编码基因00578在制备重组桃胶多糖水解酶中的应用,本发明通过将SEQ ID NO:1所示阿拉伯半乳糖苷酶编码基因连接至带6×His标签的表达载体pET22b(+)中,转化至大肠杆菌,得重组表达菌;再将重组表达菌进行IPTG诱导表达重组蛋白,经镍亲和层析纯化后,得到重组桃胶多糖水解酶,得到单一种类的酶,所述重组桃胶多糖水解酶具有良好的桃胶裂解、阿拉伯半乳聚糖、半乳聚糖水解活性,可用于制备桃胶多糖水解酶和含有阿拉伯半乳聚糖、半乳聚糖的多糖水解酶,具有较大的应用前景。
一种源于嗜热古菌的多糖水解酶基因及应用属生物工程和酶工程技术领域,本发明公开的多糖水解酶基因Tk1765的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示;多糖水解酶基因Tk1765的编码序列如SEQ ID NO:2所示;该多糖水解酶具有高效率的水解羧甲基纤维素和甲壳糖的双酶切特性;该多糖水解酶水解羧甲基纤维素最适pH值为10.0,最适酶反应温度为65℃;水解甲壳糖最适pH值为11.0,最适酶反应温度为80℃;通过构建该酶的重组载体并在毕赤酵母中超量表达,其产物具有水解玉米秸秆的功能,本发明的多糖水解酶酶及其编码基因可广泛应用于纤维素和几丁质降解。
本发明提供一种多糖水解酶及其突变体在浒苔水解中的应用,所述的多糖水解酶的氨基酸序列为SEQ ID NO:1。本发明还提供一种优化后的多糖水解酶,其氨基酸序列为SEQ ID NO:3,其编码基因的核苷酸序列为SEQID NO:4。本发明所提供的多糖水解酶可以用于降解浒苔产生还原性寡糖,而其突变体与最初的酶相比,具有更高的催化效率,有更好应用前景。
本发明公开了多糖裂解酶编码基因04147在制备重组桃胶多糖水解酶中的应用,本发明通过将SEQ ID NO:3所示优化后的多糖裂解酶编码基因连接至带6×His标签的表达载体pET28a中,转化至大肠杆菌,得重组表达菌;再将重组表达菌进行IPTG诱导表达重组蛋白,经镍亲和层析纯化后,得到重组桃胶多糖水解酶,得到单一种类的酶,所述重组桃胶多糖水解酶具有良好的桃胶裂解活性,可用于制备低分子量和小分子桃胶的水解酶
本发明涉及一种编码岩藻多糖糖苷水解酶的核苷酸序列及其应用,所述核苷酸序列为SEQ ID NO.1,其编码的蛋白含有529个氨基酸,氨基酸序列为SEQ ID NO.2,预测蛋白分子量为58.8kDa。本发明通过对编码岩藻多糖水解酶的基因GenBank No:AJ877239进行密码子优化,优化后共有1599bp个碱基,载入克隆载体为pET28a中,使优化的岩藻多糖水解酶的基因可以在大肠杆菌BL21中表达,获得了一种能够高效,专一水解岩藻多糖的糖苷水解酶,为岩藻多糖水解提供了一种生物降解酶。