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[发明专利]一种培养表达重组人表皮生长因子的工程菌的方法-CN201910897501.7在审
发明人：钱永常;张旭初;宋叶华 -专利权人：杭州纽龙生物科技有限公司
申请日： 2019-09-23 - 公布日： 2019-12-13 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明公开了一种培养表达重组人表皮生长因子的工程菌的方法，所述方法包括下述步骤：(1)一级种子培养，将甘油冻存的工程菌接种至包含卡那霉素的LB液体培养基中，培养，得到一级种子培养液；(2)二级种子培养，将步骤(1)中得到的所述一级种子培养液接种至包含卡那霉素的LB液体培养基中，培养，得到二级种子培养液；(3)将步骤(2)中得到的所述二级种子培养液接种至发酵罐中，培养，然后诱导，得到发酵罐上清液；和(4)从步骤(3)中得到的所述发酵罐上清液中分离和纯化重组人表皮生长因子。其中，所述一级种子培养液的OD
二级种子培养液一级种子培养液工程菌重组人表皮生长因子接种卡那霉素发酵罐上清液发酵二级种子培养一级种子培养分离和纯化甘油冻存诱导

[发明专利]一种核桃酵素饮品的制作方法-CN201610153702.2在审
发明人：刘博;程晓明;曹永宁 -专利权人：陕西天玉实业有限公司
申请日： 2016-03-17 - 公布日： 2016-06-01 - 主分类号： A23L2/38 文献下载
摘要：本发明公开了一种核桃酵素饮品的制作方法，该方法为：一、去核桃红衣；二、压榨得核桃粕；三、粉碎后和水置于夹层锅中加热搅拌，软化；四、核桃粉磨浆处理，均质处理后超高温瞬时灭菌；五、加入嗜酸乳杆菌，得到一级种子培养液；六、向一级种子培养液中接种瑞士乳杆菌发酵培养，接种保加利亚乳杆菌发酵培养得到一级种子液；七、一级种子液接种至二级种子培养液中发酵培养，得到二级种子液；八、二级种子液接种至发酵培养液中发酵培养；九、对发酵液进行细磨处理
一种核桃酵素饮品制作方法

[发明专利]混合型己酸菌培养液的生产方法-CN201510877329.0在审
发明人：杜新勇;范志勇;左国营;陈兴芬;董蕊;王朝青;王钊 -专利权人：古贝春集团有限公司
申请日： 2015-12-03 - 公布日： 2016-01-27 - 主分类号： C12N1/20 文献下载
摘要：本发明公开了混合型己酸菌培养液的生产方法，包括如下步骤，配制培养基，121℃度下，灭菌20分钟；将己酸菌（CK-j1）接种于培养基中，在33～35℃条件下活化培养5～7天，制得一级种子液；按体积5%～8%的比例提取一级种子液，接种于二级己酸菌菌种培养基中，33～35℃的条件下培养10～12天，得到二级种子液；采用1000L酒缸作为培养容器，按体积3%～5%的比例提取二级种子液，接种于生产培养基中，加入二级种子液，温度控制在30～35℃，培养20～30天时，制作成混合型己酸菌培养液。本发明符合科学规律、生产成本低、操作简单，适合己酸菌培养液生产中推广应用。
混合己酸培养液生产方法

[发明专利]提高细胞中灵芝酸含量的灵芝细胞培养方法-CN200910308615.X有效
发明人：钟建江;梁翠霞;李英波;王家乐 -专利权人：上海交通大学
申请日： 2009-10-22 - 公布日： 2010-04-14 - 主分类号： A01G1/04 文献下载
摘要：一种生物技术领域的提高细胞中灵芝酸含量的灵芝细胞培养方法，包括如下步骤：配制种子培养基和发酵培养基；将灵芝菌丝体接入种子培养基中，培养，得一级种子培养液；取一级种子培养液，接入种子培养基中，培养，得二级种子培养液；取二级种子培养液，接入发酵培养基中，培养，得发酵细胞；将发酵细胞置于静止培养器皿中，静止培养，在细胞生长对数期加入苯巴比妥或咪康唑，继续静止培养至收获期，收取上层细胞。
提高细胞灵芝含量细胞培养方法

[发明专利]土壤溶磷真菌接种剂、制备方法及应用-CN201310472690.6有效
发明人：宋丹丹;崔俊涛 -专利权人：宋丹丹
申请日： 2013-10-12 - 公布日： 2014-02-12 - 主分类号： C12N1/14 文献下载
摘要：取斜面菌种一支，在25℃条件下培养1-2天；用15mL无菌水洗脱孢子，制备孢子悬浊液，吸取10mL孢子悬浊液接种到100mLPD培养液的三角瓶中，在26℃条件下，震荡培养3-5天，获得液体菌种；将液体菌种按15-20％接种到一级种子PD培养液中，在27℃条件下℃，培养1-2天；将一级种子PD培养液按15-20％接种到二级种子PD培养液获得二级液体菌种；将二级液体菌种与灭菌草碳1∶4吸附然后粉碎得到孢子粉。
土壤真菌接种制备方法应用

[发明专利]土壤磷素生物活化真菌接种剂及其制备方法-CN201210085390.8无效
发明人：崔振 -专利权人：宋丹丹;崔振
申请日： 2012-03-28 - 公布日： 2012-07-25 - 主分类号： C12N11/14 文献下载
摘要：取斜面菌种一支，在25℃条件下培养1-2天；用15mL无菌水洗脱孢子，制备孢子悬浊液，吸取10mL孢子悬浊液接种到100mL PD培养液的三角瓶中，在26℃条件下，震荡培养3-5天，获得液体菌种；将液体菌种按15-20％接种到一级种子PD培养液中，在27℃条件下℃，培养1-2天；将一级种子PD培养液按15-20％接种到二级种子PD培养液获得二级液体菌种；将二级液体菌种与灭菌草碳1∶4吸附然后粉碎得到孢子粉。
土壤生物活化真菌接种及其制备方法

[发明专利]一种出芽短梗霉发酵生产普鲁兰多糖的生产工艺-CN201711063090.9在审
发明人：晋玉宽;王亚飞 -专利权人：北京艾普希隆生物科技有限公司
申请日： 2017-11-02 - 公布日： 2018-01-30 - 主分类号： C12P19/10 文献下载
摘要：本发明公开了一种出芽短梗霉发酵生产普鲁兰多糖的生产工艺，包括以下步骤种子培养；制备种子培养基，分别制备马铃薯葡萄糖琼脂培养基、一级种子培养基、二级种子培养基、三级种子培养基；种子活化培养，将出芽短梗霉菌种斜面单菌落接于一级种子摇瓶中进行摇瓶活化；将活化后的种子培养液以体积百分比浓度1％‑20％的量接于新的二级种子摇瓶中进行扩大培养；将扩大培养后所得的种子培养液以体积百分比浓度1％‑20％的量接于三级种子摇瓶中进行培养，获得待发酵种子培养液；将待发酵种子培养液接种至装有发酵培养基的发酵罐中，进行发酵培养，即可。
一种出芽短梗霉发酵生产普鲁兰多糖生产工艺

[发明专利]一种利用白酒糟生产屎肠球菌的技术方法-CN202010847873.1有效
发明人：彭楠;常章兵;田建平;梁运祥 -专利权人：四川润格生物科技有限公司
申请日： 2020-08-21 - 公布日： 2023-06-06 - 主分类号： C12N1/20 文献下载
摘要：本发明公开一种利用白酒糟生产屎肠球菌的技术方法，包括将屎肠球菌冻干菌粉进行纯化复壮后接种于一级种子培养液中，摇床培养得一级种子液；然后进一步接种到二级种子培养液中培养获得二级种子液；将制备好的二级种子液接种到含有经预处理的白酒糟的固态发酵培养基中，发酵培养；发酵结束后，将发酵产物烘干粉碎得屎肠球菌固态发酵产品。
一种利用白酒生产球菌技术方法

[发明专利]一种高纯度、耐常温贮存屎肠球菌固态发酵培养工艺-CN201710235678.1在审
发明人：林振雁;邹柳;戴爱玲;张浩超 -专利权人：福建奥姆龙生物工程有限公司
申请日： 2017-04-12 - 公布日： 2017-07-25 - 主分类号： C12N1/20 文献下载
摘要：本发明公开了这样一种高纯度、耐常温贮存屎肠球菌固态发酵培养工艺，包括下述步骤：(1)菌株的筛选驯化：取少量屎肠球菌冻干菌粉置于改良MRS培养基中，连续纯化传代复壮3次，最后挑取复壮后屎肠球菌，作为种子菌株，做一级种子液菌种；(2)一级种子液培养：无菌操作挑取筛选驯化后屎肠球菌单菌落接种于一级种子培养液中；(3)二级种子液培养：以5%‑10%v/v接种量将制备好的一级种子液接种到二级种子培养液中；(4)固态发酵：以5%‑20%v/v接种量将制备好的二级种子液均匀接种到固态发酵培养基中；(5)烘干粉碎：将发酵产物置于30‑50℃下烘干，再粉碎至50目即为屎肠球菌固态发酵成品；(6)屎肠球菌检测计数。
一种纯度常温贮存球菌固态发酵培养工艺

[发明专利]一种抗氧化蝉花菌丝体的发酵方法-CN201911030330.4在审
发明人：凡军民;杨雨靖;曹正;黄小忠;郁宝锋;宋小玉 -专利权人：江苏农林职业技术学院
申请日： 2019-10-28 - 公布日： 2020-01-14 - 主分类号： C12N1/14 文献下载
摘要：本发明提供一种抗氧化蝉花菌丝体的发酵方法，包括如下步骤：分别制备PDA斜面培养基、种子培养液与发酵培养基；将蝉拟青霉母种无菌操作分割，接种至PDA斜面培养基上活化培养得到活化菌种；将活化菌种接种到种子培养液中，得到一级种；将所述一级种接种到种子培养液中，按照培养所述活化菌种的方法培养所述一级种，得到二级种；将一级种或二级种接种到种子培养液中进行培养，得发酵罐种子液；将发酵罐种子液接种于发酵培养基中，进行发酵培养，得蝉花发酵液；将蝉花发酵液放出，进行半固体发酵培养，即得到抗氧化蝉花菌丝体的发酵物。
种子培养液蝉花菌丝体接种活化菌种发酵发酵培养基发酵培养二级种发酵罐发酵液抗氧化蝉花保健食品原料菌丝体生物量抗氧化活性种子液接种蝉拟青霉方法适合活化培养活性物质无菌操作半固体虫草酸发酵物种子液母种制备分割生产

[发明专利]一种水溶性红曲黄色素的发酵调控方法-CN202011389350.3有效
发明人：黄永嫦;王海波;谢畅丰;严盟 -专利权人：广东肇庆星湖生物科技股份有限公司
申请日： 2020-12-01 - 公布日： 2023-04-14 - 主分类号： C12P17/18 文献下载
摘要：本发明属于发酵工程技术领域，具体为一种水溶性红曲黄色素的发酵调控方法，步骤如下：①将红曲霉菌种进行试管斜面活化扩大培养，再取孢子与菌丝体洗脱液接入一级种子培养基中，进行种子扩大培养，培养至对数生长期得种子液；②将步骤①的种子液按比例接入二级种子培养基，进行种子扩大培养，培养至对数生长期得二级种子液；③将步骤②所述的二级种子培养液按5‑20％的比例接入发酵培养基中发酵调控。在温度和pH两者有效的结合调控下，经好氧发酵，流加有利于形成产物的补料入发酵液中，得到高产水溶性黄色素。
一种水溶性红曲黄色素发酵调控方法

[发明专利]一种产乳酸凝结芽孢杆菌微生物制剂的制备方法-CN202210150288.5在审
发明人：江永明;吴峰 -专利权人：鑫九通科技（武汉）有限公司
申请日： 2022-02-18 - 公布日： 2022-05-06 - 主分类号： C12N1/20 文献下载
摘要：本发明涉及一种产乳酸凝结芽孢杆菌微生物制剂的制备方法，包括以下步骤：1)将80％以上菌体形成芽孢的凝结芽孢杆菌转入无菌水中，形成种子培养液；2)将种子培养液转接到一级液体培养基中进行一级发酵，制成一级发酵液；3)将一级发酵液转接到二级液体培养基中进行二级发酵，制成二级发酵液；4)将二级发酵液接入麸皮固体培养基中，混合均匀后培养60～72h，制备得到产乳酸凝结芽孢杆菌微生物制剂。本发明提供了适用于凝结芽孢杆菌的液体培养基及液体培养产芽孢条件，且制得的产乳酸凝结芽孢杆菌微生物制剂每克含83～132亿个活菌，芽孢出芽率不低于92％，杂菌率＜0.2％，且L‑乳酸含量不低于36.5g/
一种乳酸凝结芽孢杆菌微生物制剂制备方法

[发明专利]以甘油为碳源并流加底物诱导制备甘露聚糖酶的方法-CN200810229197.0无效
发明人：韩国宝;王武良 -专利权人：沈阳华星生物科技有限公司
申请日： 2008-12-02 - 公布日： 2009-04-22 - 主分类号： C12N9/42 文献下载
摘要：以甘油为碳源并流加底物诱导制备甘露聚糖酶的方法，采用以毕赤酵母做载体生产甘露聚糖酶的基因工程菌的发酵生产工艺，其特征是：在一级种子培养发酵罐中利用种子培养液进行培养；在二级种子培养发酵罐中以基础培养液进行培养；在生产发酵罐中，初期投入部分基础培养液进行培养，随着发酵过程的进行按一定的比例和速度分别流加甘油、甲醇和底物甘露聚糖至发酵液中以完成发酵。
甘油碳源流加底物诱导制备甘露聚糖方法

[发明专利]一种制作酱油过程中酱油酵母的培养及其添加方法-CN201710013927.2在审
发明人：周良洪;蒋云峰;王高科 -专利权人：江苏恒顺沭阳调味品有限公司
申请日： 2017-01-09 - 公布日： 2018-07-17 - 主分类号： C12N1/16 文献下载
摘要：一种制作酱油过程中酱油酵母的培养方法，包括以下步骤：(1)制作麦芽粉，(2)制备糖化液，(3)过滤糖化液，(4)调配糖化液浓度，(5)制作试管种子，(6)一级扩大培养，(7)二级扩大培养，(8)种子罐培养，最终将定量的种子罐酱油酵母溶液加入发酵罐中发酵。本发明通过自制酵母培养液，并经过一级扩大、二级扩大和种子罐培养，制得酱油酵母液，能够降低酱油酵母的使用成本，代替完全添加酱油干酵母的酱油生产方法，并能够提高酱油酵母的利用率。
酱油酵母糖化液酱油种子罐培养制作发酵二级扩大培养一级扩大培养酵母培养液酱油生产干酵母麦芽粉种子罐试管制备过滤调配自制

[发明专利]一种提高毕赤酵母表达眼镜王蛇抗菌肽产量的诱导方法-CN202211289953.5在审
发明人：沈李元;朱新鹏;刘杰;李雯倩;卢玉平;钱晓明 -专利权人：江苏亢钧生物科技有限公司
申请日： 2022-10-21 - 公布日： 2023-03-21 - 主分类号： C12N1/38 文献下载
摘要：本发明提供了一种提高毕赤酵母表达眼镜王蛇抗菌肽产量的诱导方法，具体诱导表达方法步骤如下：1）按照1‑15%的接种比例，将酵母种子接种至一级培养基YPD中，在29℃下振荡培养16‑18h，获得一级培养液；2）将一级培养液按照1‑15%的接种比例，转接至二级培养基BMGY中，在29℃下振荡培养16‑18h，获得二级培养液；3）将二级培养液全部转接至BMMY培养基中，开始诱导培养；4）添加甲醇1%、山梨醇0.02‑0.5%混合诱导剂进行诱导培养，诱导达到2.5后停止诱导表达，收集表达液。
一种提高酵母表达眼镜王蛇抗菌产量诱导方法

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