本发明属于基因工程技术领域,具体涉及一种具有三螺旋结构的重组人源化III型胶原蛋白、制备方法及应用。本发明所述重组人源化III型胶原蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示;所述的重组人源化III型胶原蛋白具有三螺旋结构以及(Gly‑X‑Y)n重复序列模式,并可自组装形成特征性的胶原蛋白纤维形貌;所述的重组人源化III型胶原蛋白具有多个人III型胶原蛋白的重要功能位点,生物活性高;本发明构建了重组人源化III型胶原蛋白的大肠杆菌表达体系,表达量高,易于纯化,制备的重组人源化III型胶原蛋白水溶性好
本发明公开了一种密码子优化的斑马鱼g型溶菌酶‑1基因及其重组表达蛋白。斑马鱼共有三个溶菌酶基因,分别为c型溶菌酶、g1型溶菌酶和g2型溶菌酶。所述的斑马鱼g型溶菌酶‑1基因系通过优选获得,经密码子优化后采用全基因合成的方式获得,其核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示,其编码的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示。该基因与载体pET‑28a(+)连接,获得重组质粒28a‑Lys‑g1,进一步转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,经诱导表达、纯化及SDS‑PAGE验证,经复性,获得高纯度、高溶菌活性的斑马鱼g型溶菌酶‑1重组蛋白。