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[发明专利]枯草芽孢杆菌蛋白PgsA及其在表面展示系统中的应用-CN202210352096.2在审
发明人：黄明珠;宋卓琳;陈雪岚;涂宗财;李金林;张露;彭斌;胡明明 -专利权人：江西师范大学
申请日： 2022-04-02 - 公布日： 2022-07-05 - 主分类号： C07K14/32 文献下载
摘要：本发明公开了枯草芽孢杆菌蛋白PgsA及其在表面展示系统中的应用。枯草芽孢杆菌蛋白PgsA的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示，通过过表达载体pXMJ19在钝齿棒杆菌中表达量高，可将其用于构建高展示效率的钝齿棒杆菌表面展示系统以绿色荧光蛋白的编码基因与枯草芽孢杆菌细胞膜结合蛋白的编码基因pgsA融合后表达在细胞中，绿色荧光蛋白通过膜结合蛋白PgsA展示在细胞的表面。
枯草芽孢杆菌蛋白 pgsa 及其表面展示系统中的应用

[发明专利]一种芽孢表面稳定展示海藻糖合酶的工程菌及其构建方法-CN201611104170.X有效
发明人：王腾飞;韩登兰;王瑞明;汪俊卿 -专利权人：齐鲁工业大学
申请日： 2016-12-05 - 公布日： 2020-05-29 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明涉及一种芽孢表面稳定展示海藻糖合酶的工程菌及其构建方法。所述枯草芽孢杆菌工程菌，使枯草芽孢杆菌中编码芽孢萌发的皮层溶解酶基因sleB和cwlJ失活后获得；所述sleB基因核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；cwlJ基因核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示本发明首次通过失活芽孢萌发的皮层溶解酶基因sleB和cwlJ弱化芽孢萌发的方式提高芽孢表面展示海藻糖合酶的稳定性，经实际验证，可有效提高海藻糖合酶的酶活，12h内海藻糖合酶酶活可保持95％以上。
一种芽孢表面稳定展示海藻糖合酶工程及其构建方法

[发明专利]一种可添加于饲料中的鲤鱼鲤春病毒血症口服疫苗-CN201911204381.4在审
发明人：林锋;陈建明;黄爱霞;郭建林;孙丽慧;姜建湖 -专利权人：浙江省淡水水产研究所
申请日： 2019-11-29 - 公布日： 2020-02-04 - 主分类号： C12N15/75 文献下载
摘要：本发明公开了一种可添加于饲料中的鲤鱼鲤春病毒血症口服疫苗，通过芽孢表面展示技术将鲤春病毒血症病毒的G蛋白展示在芽孢表面，通过富集培养和芽孢诱导获得重组菌的芽孢，再经冷冻干燥制备出固态的重组疫苗。
鲤春病毒血症鲤鱼芽孢芽孢表面展示饲料富集培养口服疫苗免疫预防芽孢表面重组疫苗病毒病重组菌投喂制备诱导病毒展示

[发明专利]培养表面展示蜂毒肽蛋白片段重组枯草芽孢杆菌的培养基-CN201810994500.X在审
发明人：杨金龙;戴茜茜;罗文华;曹兰;姬聪慧;任勤 -专利权人：重庆市畜牧科学院
申请日： 2018-08-29 - 公布日： 2020-03-10 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明属于细菌培养基技术领域，具体涉及一种培养表面展示蜂毒肽蛋白片段重组枯草芽孢杆菌的培养基。所述培养表面展示蜂毒肽蛋白片段重组枯草芽孢杆菌的培养基，包括如下组分：K2PO40.1‑2.0g/L，酵母浸粉0.1‑该培养基的培养效果好，能够显著提高获得的表面展示蜂毒肽蛋白片段重组枯草芽孢杆菌落数。
培养表面展示蜂毒蛋白片段重组枯草芽孢杆菌培养基

[发明专利]一种在芽孢表面展示猪圆环病毒2型Cap蛋白的重组枯草芽孢杆菌、构建方法及应用-CN202210220438.5在审
发明人：潘康成;李威杰;张鑫;宋洪宁;刘明刚 -专利权人：四川农业大学;四川生力源生物工程有限公司
申请日： 2022-03-08 - 公布日： 2023-04-07 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明实施例公开了一种在芽孢表面展示猪圆环病毒2型Cap蛋白的重组枯草芽孢杆菌、构建方法及应用。该重组枯草芽孢杆菌是通过基因工程方法在整合型质粒pDG364的基础上构建了一个以芽孢衣壳蛋白CotB为锚定蛋白表面展示猪PCV2Cap截短抗原蛋白的重组载体，通过化学转化方法将重组载体转化到野生型枯草芽孢杆菌该菌直接将抗原蛋白展示在芽孢表面，无需破碎，可直接拌料或通过饮水免疫动物，免去了大规模注射的繁琐流程。且得益于芽孢良好的抗逆性，该菌易于保存及运输，大大降低成本。
一种芽孢表面展示圆环病毒 cap 蛋白重组枯草杆菌构建方法应用

[发明专利]一种表面展示目的蛋白或酶的萌发缺陷和无抗生素抗性基因的重组芽孢制备方法-CN201710338769.8有效
发明人：宁德刚;张磊;韦瑶;费倩 -专利权人：中国科学院水生生物研究所
申请日： 2017-05-15 - 公布日： 2019-08-06 - 主分类号： C12N15/75 文献下载
摘要：本发明属于基因工程领域，涉及一种表面展示目的蛋白或酶的萌发缺陷和无抗生素抗性基因的重组芽孢制备方法。该方法包括构建含枯草芽孢杆菌芽孢衣壳蛋白与目的蛋白或酶融合表达的重组基因、两侧有枯草芽孢杆菌位点特异的重组酶Xer识别和切割序列的抗生素抗性基因、以及以控制芽孢萌发的关键基因为整合片段的重组载体；重组载体转化枯草芽孢杆菌，通过同源重组和切除重组，分别将重组基因整合于染色体控制芽孢萌发基因中并剔除抗生素抗性基因，获得萌发缺陷、无抗生素抗性基因且表面展示目的蛋白或酶的重组芽孢。本发明具有安全和高效的优点，可用于制备以枯草芽孢杆菌芽孢为载体的动物口服重组芽孢疫苗、特异污染物降解酶或动物饲料添加酶等。
一种表面展示目的蛋白萌发缺陷抗生素抗性基因重组芽孢制备方法

[发明专利]FimHEd-CN202010630949.5有效
发明人：宁德刚;师忠港;张淼 -专利权人：中国科学院水生生物研究所
申请日： 2020-07-03 - 公布日： 2021-09-14 - 主分类号： C07K14/195 文献下载
摘要：本发明涉及爱德华氏菌(Edwardsiella)的I型纤毛蛋白FimH(FimHEd)的应用，具体是FimHEd在制备基于枯草芽孢杆菌芽孢传递载体的鱼类靶向口服疫苗中的应用本发明以FimHEd作为鱼类口服疫苗靶向肠道粘膜上皮细胞的配体，以枯草芽孢杆菌芽孢为靶向配体和特异抗原蛋白的传递载体，利用新一代芽孢表面展示技术构建表面展示靶向配体和特异抗原的重组芽孢以颗粒饲料包被靶向口服疫苗，通过传递载体表面的靶向配体FimHEd介导肠道粘膜上皮细胞提取特异抗原。本发明优点在于利用FimHEd的靶向作用促进芽孢载体传递的特异抗原突破肠道粘膜上皮屏障，提高了鱼类口服疫苗的免疫保护效果。
fimh base sub ed

[发明专利]芽孢表面展示系统用于N-乙酰神经氨酸生产的方法-CN201010207802.1无效
发明人：许平;马翠卿;徐小曼 -专利权人：山东大学
申请日： 2010-06-24 - 公布日： 2010-12-08 - 主分类号： C12P19/02 文献下载
摘要：本发明公开了一种芽孢表面展示系统用于N-乙酰神经氨酸生产的方法，该方法利用高拷贝穿梭载体，与芽孢外衣蛋白基因和N-乙酰神经氨酸醛缩酶基因重组后，构建表面展示表达载体，并转化入枯草芽孢杆菌得到重组菌株，该重组菌株的芽孢可催化此外，利用枯草芽孢杆菌芽孢稳定易于分离和抗逆性的特点，简便了后续分离过程，提高了N-乙酰神经氨酸醛缩酶的稳定性并增加了整个催化过程的安全性。
芽孢表面展示系统用于乙酰神经氨酸生产方法

[发明专利]一种枯草芽孢杆菌GC5表面展示GCRVVP7蛋白的重组芽孢及制备方法-CN201510041532.4有效
发明人：张永安;陈丹丹;郭霞 -专利权人：中国科学院水生生物研究所
申请日： 2015-01-27 - 公布日： 2017-09-19 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明公开了一种枯草芽孢杆菌GC5表面展示GCRV VP7蛋白的重组芽孢及制备方法，步骤（1）获得目前流行株Ⅱ型GCRV VP7核酸序列。（2）从草鱼体内分离野生型芽孢杆菌，确定其为枯草芽孢杆菌，命名为Bacillus subtilis GC5，CCTCC NOM2014654。（3）融合表达的重组整合型载体构建。（4）重组枯草芽孢杆菌的制备及鉴定。CCTCC NOM2014655。（5）表面展示VP7重组芽孢的诱导及其鉴定。芽孢的产生率高达100%，生产简便成本低，可作为饲料添加剂；具有肠道定制能力，有助于调节动物肠道菌落平衡、提高动物机体的免疫能力、增强动物营养代谢功能。芽孢具有抗逆性强、易于大规模生产，解决了GCRV VP7蛋白作为免疫抗原在极端环境中不稳定的问题。
一种枯草芽孢杆菌 gc5 表面展示 gcrv vp7 蛋白重组制备方法

[发明专利]一种表面展示家蚕乙醇脱氢酶重组芽孢及其制备方法-CN201110063273.7无效
发明人：陈克平;王楠;宁德刚;李国辉;姚勤 -专利权人：江苏大学
申请日： 2011-03-16 - 公布日： 2011-09-07 - 主分类号： C12N15/75 文献下载
摘要：将家蚕乙醇脱氢酶作为外源蛋白展示在枯草芽孢杆菌表面，属于重组融合蛋白技术领域。本发明以枯草芽孢杆菌芽孢衣壳蛋白基因cotC为分子载体，与家蚕乙醇脱氢酶基因Bmadh重组，构建出融合表达家蚕乙醇脱氢酶BmADH的整合型重组质粒。以之转化枯草芽孢杆菌，通过同源重组使外源基因整合于染色体上特定位点的淀粉酶基因amyE中，使淀粉酶基因被破坏而导致重组菌株无淀粉酶活性，以此成功地筛选出含有融合表达CotC-BmADH的重组枯草芽孢杆菌菌株通过诱导表达该重组菌株得到表面展示有家蚕乙醇脱氢酶融合蛋白的芽孢。本发明使原本对温度和pH不稳定的乙醇脱氢酶成为可在不同环境条件下具有相对稳定活性的乙醇脱氢酶融合蛋白，所产生的重组芽孢可用于动物直接口服。
一种表面展示家蚕乙醇脱氢酶重组芽孢及其制备方法

[发明专利]内生孢子展示平台、产品和方法-CN201980089106.4在审
发明人： B·L·戈洛姆;F·A·菲卡拉;R·萨拉姆扎德;D·柯蒂斯;K·蒂普顿;D·艾利 -专利权人：拜耳作物科学有限合伙公司
申请日： 2019-11-15 - 公布日： 2021-10-15 - 主分类号： A01N37/00 文献下载
摘要：本申请提供了可用于将蛋白和肽靶向至由短芽孢杆菌属、赖氨酸芽孢杆菌属或绿芽孢杆菌属的家族成员产生的内生孢子的表面的信号序列以及使用其的方法。并且同样地提供了使用特定的N端靶向序列及其衍生物在短芽孢杆菌属、赖氨酸芽孢杆菌属或绿芽孢杆菌属的家族成员的孢子外壁上展示异源分子，例如肽、多肽和其他重组构建体。
内生孢子展示平台产品方法

[发明专利]能在芽孢表面展示PAD4蛋白的炭疽芽孢杆菌及其应用-CN201010115586.8有效
发明人：展德文;王艳春;刘纯杰;陶好霞;袁盛凌;王令春;王芃 -专利权人：中国人民解放军军事医学科学院生物工程研究所
申请日： 2010-02-26 - 公布日： 2010-07-07 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明公开了一株能在芽孢表面展示PAD4蛋白的炭疽杆菌株及其应用。该菌株，是将Pa4基因插入到炭疽芽孢杆菌(Bacillus anthracis)芽孢蛋白bclA基因未端获得的菌株。具体可为炭疽芽孢杆菌(Bacillus anthracis)CGMCCNo.3404。该菌株可作为宿主，用于制备免疫制剂，所述免疫制剂优选为灭活疫苗、减毒活疫苗、亚单位疫苗或基因工程疫苗。
芽孢表面展示 pad4 蛋白炭疽杆菌及其应用

[发明专利]一种展示猪链球菌前噬菌体裂解酶的重组芽孢杆菌及其构建方法和应用-CN202310232695.5在审
发明人：钱平;朱梦媛;李祥敏;李鑫鑫;王林康 -专利权人：华中农业大学
申请日： 2023-03-13 - 公布日： 2023-06-27 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明提供了一种展示猪链球菌前噬菌体裂解酶的重组芽孢杆菌及其构建方法和应用，属于基因工程技术领域。本发明将枯草芽孢杆菌编码锚定蛋白cotG基因与编码前噬菌体裂解酶Lys0859基因融合，在枯草芽孢杆菌中进行外源表达，获得表面展示前噬菌体裂解酶Lys0859的重组枯草芽孢杆菌。所述重组枯草芽孢杆菌产生的芽孢可耐受高温、强酸强碱、胃肠道的环境，同时对猪链球菌、金黄色葡萄球菌、李斯特菌、产气荚膜梭菌等革兰氏阳性菌具有抑菌效果，可作为新型的替抗制剂。重组芽孢在应用于猪链球菌感染时，可通过口服接种，同时在储存和运输方面有极大便利，还具有节约生产成本的特点。
一种展示链球菌噬菌体裂解重组芽孢杆菌及其构建方法应用

[发明专利]一种补充人体必需氨基酸的口服重组营养多肽的制备方法-CN201510793140.3有效
发明人：陈克平;冯凡;陈美萍;陈亮;吕鹏;张春霞;陈先涛;姚勤;夏恒传;马上上 -专利权人：江苏大学
申请日： 2015-11-18 - 公布日： 2019-04-30 - 主分类号： C12N15/75 文献下载
摘要：本发明涉及一种补充人体必需氨基酸的口服重组营养多肽的制备方法，属于重组融合蛋白药物技术领域；本发明将带有肠激酶标签的营养多肽基因np整合到pJS700载体上，然后用芽孢衣壳蛋白基因cotC作为分子载体，构建融合表达的整合型重组质粒，将其转化枯草芽孢杆菌，使外源基因整合于染色体上的淀粉酶基因中，并筛选出含融合表达cotC‑NP的重组枯草芽孢杆菌菌株，诱导重组菌株产生的芽孢表面展示营养多肽；本发明构建的表面展示带有肠激酶标签营养多肽的重组芽孢
一种补充人体必需氨基酸口服重组营养多肽制备方法

[发明专利]用于基于类芽胞杆菌属的内生孢子展示平台的靶向序列-CN202080049189.7在审
发明人： D·柯蒂斯;K·蒂普顿 -专利权人：拜耳作物科学有限合伙公司
申请日： 2020-05-15 - 公布日： 2022-03-01 - 主分类号： C07K14/195 文献下载
摘要：提供了可用于将蛋白质和肽靶向至由类芽孢杆菌属的家族成员产生的内生孢子的表面的信号序列以及使用其的方法。并且同样地提供了使用特定的N端靶向序列及其衍生物在类芽孢杆菌属的家族成员的孢子表面展示异源分子，例如肽、多肽和其他重组构建体。
用于基于类芽胞杆菌内生孢子展示平台靶向序列