本发明涉及环糊精葡萄糖基转移酶技术领域,公开了一种环糊精葡萄糖基转移酶突变体,突变体为氨基酸序列如SEQ ID NO.1的野生型环糊精葡萄糖基转移酶的第189位、第255位突变到的蛋白(a);或者突变体为蛋白本发明的突变体转化甜菊糖苷为葡萄糖基甜菊糖苷时,产物中StevG1、RebAG1、StevG2含量增加,葡萄糖基甜菊糖苷的口味和整体品质得到提升。
本发明公开了一种高产γ‑环糊精葡萄糖基转移酶基因工程菌及构建方法,属于微生物工程技术领域。本发明提供了一种含有SEQ ID NO.1序列的γ‑环糊精葡萄糖基转移酶,并且成功的采用食品安全菌株枯草芽孢杆菌其进行异源表达,本发明的方法安全、高效,可应用于食品、药品的生产中。并且,采用本发明的方法,对枯草芽孢杆菌表达系统进行优化后,显著提高了该酶的胞外表达水平,胞外酶活可达30.18U/mL,较原始表达系统提高了7.4倍;本发明的γ‑环糊精葡萄糖基转移酶可直接作用于淀粉底物,在不添加络合剂的条件下转化率可达约34%,γ‑环糊精占比最高可达56%,具有工业生产潜力。