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[发明专利]一种基于活性炭和柠檬酸的烟草外植体防褐化方法-CN201711331435.4在审
发明人：曾婉俐;邓乐乐;向海英;宋春满;张涛;许力;张建铎;蒋佳芮;苏杨;李雪梅;陈章玉 -专利权人：云南中烟工业有限责任公司
申请日： 2017-12-13 - 公布日： 2018-06-12 - 主分类号： A01H4/00 文献下载
摘要：本发明涉及一种基于活性炭和柠檬酸的烟草外植体防褐化方法，包括如下步骤：步骤（1），种子的消毒；步骤（2），种子培养；步骤（3），烟草外植体预培养；步骤（4），烟草外植体组织培养；步骤（5），外植体防褐化培养；本发明将多种防褐化手段有效结合，彼此作用，不仅防褐化效果更佳，还使得生根天数大幅度缩短，外植体褐化率为9.9‑15.9%，外植体7‑10天生根，培养40‑46天，根长＞1cm，根数≥2条，效果良好。
防褐化烟草外植体外植体柠檬酸活性炭生根有效结合种子培养组织培养褐化率预培养根数天数消毒

[发明专利]一种基于活性炭的烟草外植体防褐化方法-CN201711329629.0有效
发明人：李雪梅;向海英;曾婉俐;许力;张建铎;邓乐乐;蒋佳芮;宋春满;张涛;苏杨;陈章玉 -专利权人：云南中烟工业有限责任公司
申请日： 2017-12-13 - 公布日： 2020-06-16 - 主分类号： A01H4/00 文献下载
摘要：本发明涉及一种基于活性炭的烟草外植体防褐化方法，包括如下步骤：步骤（1），种子消毒；步骤（2），种子培养；步骤（3），烟草外植体培养；步骤（4），防褐化培养；步骤（5），生根培养；步骤（6），炼苗移栽。本发明不仅可以有效缓解烟草外植体褐化现象，还可以改善外植体整体的分化状态。根系不仅生长加快，而且质地柔韧不易折断，生根苗移栽成活率高。使用方便、成本低、效果好。
一种基于活性炭烟草外植体防褐化方法

[发明专利]一种快速高效的烟草再生体系建立的方法-CN202210682399.0在审
发明人：程昌合;郑宏斌;张仲文;史久长;王卫民;张力 -专利权人：浙江中烟工业有限责任公司
申请日： 2022-06-15 - 公布日： 2022-09-16 - 主分类号： A01H4/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种快速高效的烟草再生体系建立的方法，包括以下步骤：将烟草土培苗的外植体用活化的发根农杆菌侵染液侵染；将经侵染后的外植体接种于共培养的培养基上暗培养24‑48h，外植体分化形成毛状根；将经暗培养的外植体转移至发根诱导培养基上诱导培养，筛选出带有烟草再生植株的烟草毛状根；将经诱导培养产生的毛状根进行继代培养和扩增培养，获得再生植株；将获得的再生植株移栽入营养土中培养，获得烟草再生植株。本申请的方法，适用于多种烟草品种的毛状根的诱导，具有取材方便、诱导速度快、遗传稳定及节约成本等优点，通过直接诱导烟草土培苗，实现土培苗烟草再生体系快速、高效的诱导和扩繁。
一种快速高效烟草再生体系建立方法

[发明专利]一种基于活性炭和维生素C的烟草外植体防褐化方法-CN201711329630.3在审
发明人：许力;邓乐乐;曾婉俐;宋春满;蒋佳芮;张建铎;向海英;张涛;李雪梅;苏杨;贾凌;高军平;夏庆友;陈章玉 -专利权人：云南中烟工业有限责任公司
申请日： 2017-12-13 - 公布日： 2018-04-24 - 主分类号： A01H4/00 文献下载
摘要：本发明涉及一种基于活性炭和维生素C的烟草外植体防褐化方法，包括如下步骤步骤（1），种子的消毒；步骤（2），种子培养；步骤（3），烟草外植体培养；步骤（4），防褐化培养；本发明不仅可以有效缓解外植体褐化现象，无需其他防褐化手段，褐化率为9.1‑23.6%，同时，活性炭与维生素C协同，更有效刺激植物细胞分裂、改善氧化‑还原，有效地促进了烟草外植体快速出芽，最快5d即可诱导出芽。
一种基于活性炭维生素烟草外植体防褐化方法

[发明专利]一种烟草外植体防褐化方法-CN201711331433.5在审
发明人：曾婉俐;张建铎;邓乐乐;张涛;高茜;许力;宋春满;蒋佳芮;向海英;陈章玉;李雪梅;夏庆友;贾凌;高军平 -专利权人：云南中烟工业有限责任公司
申请日： 2017-12-13 - 公布日： 2018-04-24 - 主分类号： A01H4/00 文献下载
摘要：本发明涉及一种烟草外植体防褐化方法，包括如下步骤步骤（1），种子的消毒；步骤（2），种子培养；步骤（3），烟草外植体组织培养；步骤（4），外植体防褐化培养。本发明的防褐化方法，不仅能有效降低褐化发生率，并且能明显缩短外植体分化芽点的出现时间，改善芽点的生长状态。整个工艺使用方便、成本低。
一种烟草外植体防褐化方法

[发明专利]一种快速高效的烟草毛状根诱导和扩繁的方法-CN202210342239.1在审
发明人：程昌合;任志广;张勇刚;刘化冰;项波卡;刘建国;张晓兵;夏琛 -专利权人：浙江中烟工业有限责任公司
申请日： 2022-04-02 - 公布日： 2022-07-22 - 主分类号： A01H4/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种快速高效的烟草毛状根诱导和扩繁的方法，所述方法包括如下步骤：将烟草土培苗的外植体用活化的发根农杆菌侵染液侵染，将经侵染后的外植体接种于共培养的培养基上暗培养24~48h，将经暗培养的外植体转移至发根诱导培养基上诱导培养，将经诱导培养产生的毛状根进行继代培养和扩增培养，从而获得大量烟草毛状根。本发明提供一种土培苗直接诱导毛状根方法，适用于多种烟草品种的毛状根的诱导，具有取材方便、诱导速度快、遗传稳定及节约成本等优点，通过直接诱导烟草土培苗，实现土培苗烟草毛状根快速、高效的诱导和扩繁。
一种快速高效烟草毛状根诱导方法

[发明专利]一种烟草土培苗的再生方法-CN202310301752.0在审
发明人：吴晓宗;李佩霖;李隆;徐健博;朱智文;郭万旺 -专利权人：郑州轻工业大学;郑州辰霖生物科技有限公司
申请日： 2023-03-24 - 公布日： 2023-08-25 - 主分类号： A01H4/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种烟草土培苗的再生方法，涉及农业工程技术领域。本发明所述再生方法包括如下步骤：将烟草土培苗的外植体用活化的发根农杆菌侵染液侵染，将经侵染后的外植体接种于共培养的培养基上暗培养24～48h，将经暗培养的外植体转移至发根诱导培养基上诱导培养，将经诱导培养产生的再生烟草幼苗进行继代培养和扩增培养，载入营养土中进行从而获得大量烟草再生。本发明提供一种土培苗直接诱导再生方法，适用于多种烟草品种的再生的诱导，具有取材方便、诱导速度快、遗传稳定及节约成本等优点，通过直接诱导烟草土培苗，实现土培苗烟草再生快速、高效的诱导和扩繁。
一种烟草土培苗再生方法

[发明专利]用精胺诱导烟草胚状体的方法-CN201610899689.5有效
发明人：周凤珏;龚银花;周文亮;许鸿源;赖洪敏;王五权;韦忠;陈念平;许皓翔;林北森;罗刚;覃迎姿;刘春萍 -专利权人：广西壮族自治区烟草公司百色市公司;广西大学
申请日： 2016-10-14 - 公布日： 2018-12-11 - 主分类号： A01H4/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种用精胺诱导烟草胚状体的方法，以精胺作诱导剂制备诱导培养基进行烟草叶片外植体的胚状体诱导。本发明以精胺作诱导剂制备的诱导培养基比传统的培养基诱导烟草胚状体形成速度快、产量高、质量好，且原始外植体无需转瓶进行继代培养，即可直接达到生产烟草胚状体的目的。
精胺诱导烟草胚状体方法

[发明专利]一种用维生素C、聚乙烯基吡咯烷酮及谷胱甘肽防烟草外植体褐化的方法-CN201711329637.5在审
发明人：向海英;许力;曾婉俐;邓乐乐;张涛;蒋佳芮;张建铎;宋春满;苏杨;陈章玉;夏庆友;贾凌;高军平 -专利权人：云南中烟工业有限责任公司
申请日： 2017-12-13 - 公布日： 2018-05-22 - 主分类号： A01H4/00 文献下载
摘要：本发明是用维生素C、聚乙烯基吡咯烷酮及谷胱甘肽防烟草外植体褐化的方法，包括如下步骤：烟草种子的消毒、烟草种子培养、烟草外植体培养、外植体愈伤组织防褐化培养后进行烟草愈伤组织总酚的测定，所述的防褐化培养基为褐化培养处理后，可以有效缓解褐化现象，改善外植体整体的分化状态。添加维生素C、聚乙烯基吡咯烷酮(PVP)和谷胱甘肽在培养基中，具有使用方便、成本低、效果好等优点。
一种维生素聚乙烯吡咯烷酮谷胱甘肽烟草外植体褐化方法

[发明专利]用灵发素诱导烟草胚状体的方法-CN201610899706.5有效
发明人：周文亮;许鸿源;周凤珏;赖洪敏;龚银花;陈念平;王五权;韦忠;许皓翔;林北森;罗刚;覃迎姿;刘春萍 -专利权人：广西大学
申请日： 2016-10-14 - 公布日： 2018-11-02 - 主分类号： A01H4/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种用灵发素诱导烟草胚状体的方法，以灵发素作诱导剂制备诱导培养基进行烟草叶片外植体的胚状体诱导。本发明以灵发素作诱导剂制备的诱导培养基比传统的培养基诱导烟草胚状体形成速度快、产量高、质量好，且原始外植体无需转瓶进行继代培养，即可直接达到生产烟草胚状体的目的。
用灵发素诱导烟草胚状体方法

[发明专利]一种提高烟草基因编辑遗传转化率及组织培养效率的方法-CN202111402184.0在审
发明人：蒋佳芮;向海英;许力;曾婉俐;张建铎;高茜;米其利;杨文武;邓乐乐;李雪梅 -专利权人：云南中烟工业有限责任公司
申请日： 2021-11-22 - 公布日： 2022-02-25 - 主分类号： C12N15/84 文献下载
摘要：本发明公开了一种提高烟草基因编辑遗传转化率及组织培养效率的方法，包括以下步骤：(1)农杆菌活化培养；(2)农杆菌悬浮液的制备；(3)外植体的准备；(4)侵染；(5)共培养；(6)植株再生。本发明利用基因编辑技术，通过添加乙酰丁香酮，提高烟草外植体产生愈伤组织比率，可将烟草组织培养产生愈伤组织的时间缩短至20‑25天，分化苗转化率提高至89％以上，显著提高了烟草的基因编辑效率和组织培养效率
一种提高烟草基因编辑遗传转化组织培养效率方法

[发明专利]烟草发状根培养法生产烟碱-CN00107949.2无效
发明人：曹阳;巩普遍;董建新;樊红梅;张兴 -专利权人：西北农林科技大学无公害农药研究服务中心
申请日： 2000-06-01 - 公布日： 2003-01-29 - 主分类号： C12N5/04 文献下载
摘要：本发明涉及烟草发状根培养法生产烟碱。用发根农杆菌侵染烟草无菌苗的外植体，诱导该外植体长出发根；用Southern杂交检测根系中的T-DNA，以确定发状根株系；培养具有T-DNA的根系，用固定化连续培养法，在改良的MSO培养基中培养该最优发状根系
烟草发状根培养生产烟碱

[发明专利]一种用维生素C、L-半胱氨酸和亚硫酸氢钠防止烟草外植体褐化的方法-CN201711331461.7在审
发明人：邓乐乐;曾婉俐;许力;蒋佳芮;张建铎;向海英;宋春满;张涛;苏杨;李雪梅;陈章玉 -专利权人：云南中烟工业有限责任公司
申请日： 2017-12-13 - 公布日： 2018-06-05 - 主分类号： A01H4/00 文献下载
摘要：本发明是一种用维生素C、L‑半胱氨酸和亚硫酸氢钠防烟草外植体褐化的方法，包括如下步骤：植物种子的消毒、植物种子培养、烟草外植体诱导培养、外植体增殖培养后进行外植体愈伤组织防褐化培养，所述的防褐化培养基为褐化培养处理后，可以有效缓解褐化现象，改善外植体整体的分化状态。添加维生素C、L‑半胱氨酸和亚硫酸氢钠在培养基中，具有使用方便、成本低、效果好等优点。
亚硫酸氢钠维生素C 烟草外植体半胱氨酸培养基外植体褐化植物种子防褐化分化状态褐化现象有效缓解诱导培养愈伤组织增殖培养蔗糖琼脂添加剂消毒

[发明专利]一种用硫代硫酸钠防止烟草外植体褐化的方法-CN201711332624.3在审
发明人：许力;向海英;蒋佳芮;邓乐乐;张建铎;曾婉俐;高茜;宋春满;张涛;李雪梅;陈章玉 -专利权人：云南中烟工业有限责任公司
申请日： 2017-12-13 - 公布日： 2018-06-12 - 主分类号： A01H4/00 文献下载
摘要：本发明是一种用硫代硫酸钠防止烟草外植体褐化的方法。包括如下步骤：植物种子的消毒，植物种子培养，植物外植体培养，植物外植体防褐化培养，植物外植体的继代防褐化培养，得到的植物外植体褐化率为18.7‑23.3％。可以有效缓解外植体褐化现象，可以改善外植体整体的分化状态。
植物外植体硫代硫酸钠烟草外植体植物种子防褐化外植体褐化分化状态褐化现象有效缓解培养基褐化率抗氧化天然的继代消毒

[发明专利]一种农杆菌介导的除草剂Basta抗性导入烟草的转化方法-CN201910142094.9在审
发明人：贺其其;陈晓庆;武秀明 -专利权人：上海迈其生物科技有限公司
申请日： 2019-02-26 - 公布日： 2019-05-31 - 主分类号： C12N15/82 文献下载
摘要：本发明公开了一种农杆菌介导的除草剂Basta抗性导入烟草的转化方法，由以下步骤组成：烟草外植体预培养；利用已转入basta抗性质粒的农杆菌浸染烟草外植体；共培养；分化培养，其中分化培养基中Basta的浓度为
抗性除草剂Basta 农杆菌介导烟草外植体烟草除草剂筛选分化培养基农杆菌浸染分化培养抗性质粒生根诱导阳性植株有效减少抗性苗农杆菌特美汀阳性率预培养叶盘抗生素转化清洗筛选转入生长检测污染

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