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[发明专利]一种细胞外囊泡膜蛋白提取与分析方法-CN202110777344.3在审
发明人：樊萌;安瑾;刘轩;胡尊芳 -专利权人：北京益微生物科技有限公司
申请日： 2021-07-09 - 公布日： 2021-11-09 - 主分类号： G01N30/02 文献下载
摘要：本发明公开了一种细胞外囊泡膜蛋白提取与分析方法。该方法包括：使用磁珠特异性富集提取细胞外囊泡膜蛋白，并结合蛋白质谱技术，对膜蛋白的组成进行鉴定和分析。该方法可避免蛋白质谱分析过程中，高丰度的非细胞外囊泡膜蛋白信号的影响和干扰，有助于鉴定出更多种类的细胞外囊泡膜蛋白。
一种细胞外囊泡膜蛋白提取分析方法

[发明专利]一种提取和检测鱼类精子膜蛋白的方法-CN201310681572.6无效
发明人：方弟安;张敏莹;徐东坡;刘凯;周彦锋;段金荣 -专利权人：中国水产科学研究院淡水渔业研究中心
申请日： 2013-12-12 - 公布日： 2014-04-02 - 主分类号： C07K1/14 文献下载
摘要：本发明公开了一种提取和检测鱼类精子膜蛋白的方法，包括样品的预处理、精子悬液的制作、精子的悬浮处理、精子膜蛋白分离、精子膜蛋白去脂纯化、精子膜蛋白的SDS-PAGE检测以及精子膜蛋白质谱检测的步骤；本方法在传统去污法的基础上，拟合了蛋白酶抑制剂和TM-PEK法的特点，所提取的鱼类精子膜蛋白盖度达到86%以上，平均每5×107个精子中可得到0.6mg膜蛋白和0.8mg胞质蛋白。本发明专利方法的推广应用可以为鱼类精卵作用机制以及受精机理的探明提供基础资料；可以为鱼类的增养殖尤其是江海洄游性鱼类的生殖繁育提供指导；可以为其他水生生物物种的精子膜蛋白研究提供有用的参考方法。
一种提取检测鱼类精子膜蛋白方法

[发明专利]膜蛋白分类在线预报方法-CN200710171805.2无效
发明人：金雨欢;陆文聪;钮冰;刘亮;王丽 -专利权人：上海大学
申请日： 2007-12-06 - 公布日： 2008-05-28 - 主分类号： G06F19/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种膜蛋白分类在线预报方法。本方法是利用机器学习方法Bagging对一个膜蛋白数据库样本进行学习，输出学习模型。预报器载入学习模型，输入数据转换器由Web客户端提交的膜蛋白序列码转换所得只包含“0”和“1”的数据，输出膜蛋白分类预测结果，通过Servlet组件返回到Web客户端。本发明能够基于普通的Web客户端单个或批量预测膜蛋白序列的膜蛋白类型。
膜蛋白分类在线预报方法

[发明专利]具有肥胖症的预防和治疗作用的化合物的筛选方法-CN201380073863.5有效
发明人：中岛利博;藤田英俊;荒谷聪子;八木下尚子 -专利权人：中岛利博
申请日： 2013-12-19 - 公布日： 2018-09-18 - 主分类号： C12N15/09 文献下载
摘要：一种筛选方法，其包含下述工序：使被验物质与滑膜蛋白基因表达细胞接触的工序，和确认由上述被验物质产生的对滑膜蛋白基因表达的影响或对滑膜蛋白的蛋白活性的影响的工序。一种抗肥胖药，其包含滑膜蛋白的siRNA、滑膜蛋白的诱捕核酸或滑膜蛋白的反义核酸作为有效成分。
具有肥胖症预防治疗作用化合物筛选方法

[发明专利]一种圆头精子跨膜蛋白247鉴定方法-CN202210687116.1在审
发明人：韩晓芳 -专利权人：山西省人民医院
申请日： 2022-06-16 - 公布日： 2022-10-14 - 主分类号： G01N23/04 文献下载
摘要：本发明公开了一种圆头精子跨膜蛋白247鉴定方法，包括取适量外周血，用质量百分含量为0.8‑1.0％的月桂酸钠溶液裂解经富集纯化的生物膜，提取跨膜蛋白，离心取上清液，得到跨膜蛋白质样品；在跨膜蛋白样品上加入磷酸盐缓冲液，使跨膜蛋白样品浓度达到100‑120个/ml，通风晾置5‑15min。本发明对圆头精子中的跨膜蛋白247的鉴定具有快速、准确、简便、成本低、设备简单等优势，适于大规模生产中应用，降低使用成本，大大提高了圆头精子中的跨膜蛋白247分离的分辨率，提高圆头精子中的跨膜蛋白247的溶解度、回收率，降低了杂质和人为操作所带来的分辨率损失，对圆头精子中的跨膜蛋白247的鉴定，具有重要的理论意义和潜在的应用价值。
一种精子膜蛋白 247 鉴定方法

[发明专利]肺炎支原体膜蛋白抗原包被磁珠的方法-CN202010478735.0在审
发明人：侯雨晴;朱越谭;曾敏霞;储迅涛 -专利权人：珠海丽珠试剂股份有限公司
申请日： 2020-05-29 - 公布日： 2020-08-25 - 主分类号： G01N33/543 文献下载
摘要：本发明提供了一种肺炎支原体膜蛋白抗原包被磁珠的方法，涉及生物技术领域。该方法包被的肺炎支原体膜蛋白抗原为天然肺炎支原体蛋白，该方法包括先使用还原剂处理肺炎支原体膜蛋白抗原，再将肺炎支原体膜蛋白抗原与磁珠偶联。该方法缓解了天然肺炎支原体膜蛋白抗原包被磁珠效率低的技术问题。
肺炎支原体膜蛋白抗原包被方法

[发明专利]基于Top-down策略的膜蛋白质变体鉴定方法-CN202111451096.X在审
发明人：张丽华;孙悦;梁玉;王超;杨开广;赵宝锋;梁振;张玉奎 -专利权人：中国科学院大连化学物理研究所
申请日： 2021-12-01 - 公布日： 2023-06-13 - 主分类号： G01N30/02 文献下载
摘要：本发明涉及一种基于Top‑down策略的膜蛋白质变体鉴定方法。在该方法中，将细胞或组织样品裂解后通过超高速离心法得到包含膜蛋白的疏水性组分。将所得疏水性组分利用凝胶洗脱液相组分截留电泳技术进行基于分子量的分级，再通过有机溶液沉淀法得到膜蛋白沉淀。将所得膜蛋白沉淀溶解后利用有机硅杂化整体柱实现完整膜蛋白的高效分离，再用orbitrap高分辨质谱进行Top‑down蛋白质组学鉴定。该方法针对完整膜蛋白溶解难、分离难、鉴定难的问题，建立了稳健的膜蛋白质组top‑down鉴定流程。
基于 top down 策略膜蛋白质变鉴定方法

[发明专利]一种兔波氏杆菌外膜蛋白及其制备方法和用途-CN201910157274.4在审
发明人：刘燕;鲍国连;韦强;肖琛闻;季权安;黄叶娥;李科 -专利权人：浙江省农业科学院
申请日： 2019-03-01 - 公布日： 2019-06-14 - 主分类号： C07K14/235 文献下载
摘要：本发明公开了一种兔波氏杆菌外膜蛋白及其制备方法和用途，该外膜蛋白为外膜蛋白PPP或外膜蛋白PL，所述外膜蛋白PPP包含：如SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列，所述外膜蛋白PL包含：如SEQ ID NO本发明的兔波氏杆菌外膜蛋白能够用于包被ELISA酶标板，作为检测抗原，用于检测兔波氏杆菌抗体，仅需要2个小时就能测得结果，且检测灵敏度、准确度高，本发明试剂盒便于操作、使用成本低、稳定性和重复性好，适合大规模推广应用
外膜蛋白核苷酸序列兔波氏杆菌波氏杆菌种兔制备检测灵敏度准确度发明试剂酶标板检测抗原包被抗体

[实用新型]一种细胞膜蛋白与细胞浆蛋白抽提试剂盒-CN201621159768.4有效
发明人：孙伯乐 -专利权人：上海碧云天生物技术有限公司
申请日： 2016-11-01 - 公布日： 2017-04-26 - 主分类号： C07K1/14 文献下载
摘要：本实用新型公开了一种细胞膜蛋白与细胞浆蛋白抽提试剂盒，包括盒体、铰链、盒盖、固定座、第一孔槽、装膜蛋白抽提试剂A的试管、标签、第二孔槽、装膜蛋白抽提试剂B的试管和说明书安放槽，盒盖通过铰链连接盒体，盒体的底部设有固定座，固定座的顶部设有第一孔槽，第一孔槽的内部设置有装膜蛋白抽提试剂A的试管，第一孔槽的一侧设有第二孔槽，第二孔槽的内部设有装膜蛋白抽提试剂B的试管，第二孔槽的一侧设有说明书安放槽。装膜蛋白抽提试剂A的试管和装膜蛋白抽提试剂B的试管的顶端均粘贴有对应的标签，装膜蛋白抽提试剂A的试管和装膜蛋白抽提试剂B的试管的壳体上均设有刻度。该试剂盒节约时间、方便使用。
一种细胞膜蛋白蛋白试剂盒

[发明专利]一种猪瘟病毒囊膜蛋白寡聚蛋白体及其制备方法和应用-CN201911185363.6有效
发明人：许雁;诺曼·吉利卡;李改;夏燕 -专利权人：诺华生物科技（武汉）有限责任公司;许雁
申请日： 2019-11-27 - 公布日： 2023-04-18 - 主分类号： C07K14/18 文献下载
摘要：本发明提供一种猪瘟病毒囊膜蛋白寡聚蛋白体及其制备方法和应用。寡聚蛋白体包括猪瘟病毒囊膜蛋白分子和外源寡聚化结构片段，猪瘟病毒囊膜蛋白分子选自猪瘟病毒囊膜蛋白E2分子、猪瘟病毒囊膜蛋白E0分子，猪瘟病毒囊膜蛋白E2分子与外源寡聚化结构片段形成E2寡聚蛋白体，猪瘟病毒囊膜蛋白E0分子与外源寡聚化结构片段形成E0寡聚蛋白体。将E2、E0寡聚蛋白体作为疫苗抗原，不含任何猪瘟病毒的遗传物质RNA，生产和使用均安全。E2及E0寡聚蛋白体中的各囊膜蛋白保持其天然结构及生物活性，做为疫苗抗原免疫效果显著；寡聚蛋白体将抗原的多个亚单位蛋白聚合在一起，克服了亚单位蛋白疫苗的弱点，疫苗免疫原性显著提高，且抗原含量高，容易生产和纯化
一种猪瘟病毒膜蛋白蛋白及其制备方法应用

[发明专利]一种含单跨膜区的膜蛋白其跨膜区的纯化方法-CN202011104152.8在审
发明人：李清心;吴金川;陈骏佳;蚁细苗;康佩姿;班雯婷 -专利权人：广东省科学院生物工程研究所
申请日： 2020-10-15 - 公布日： 2021-01-12 - 主分类号： C07K19/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种含单跨膜区的膜蛋白其跨膜区的纯化方。它是在含单跨膜区的膜蛋白的N或C端加入多聚组氨酸标签，然后将此含组氨酸标签的含单跨膜区的膜蛋白的编码基因转入到表达质粒中，再将表达质粒转入表达菌中，培养表达菌并诱导含单跨膜区的膜蛋白的表达，将表达菌破碎，并用含尿素和变性剂的缓冲液将含单跨膜区的膜蛋白溶解，在有尿素的情况下利用组氨酸标签对单跨膜区的膜蛋白进行纯化，并同时用再折叠剂使单跨膜区的膜蛋白再折叠并去除尿素，获得折叠的单跨膜区的膜蛋白。采用直接加入尿素法溶解目标蛋白，不需要收集细胞包涵体，既节约时间，也提高目标蛋白的产量。
一种含单跨膜区膜蛋白跨膜区纯化方法

[发明专利]一种弧菌外膜蛋白亚单位佐剂疫苗及规模化制备技术-CN201710156715.X在审
发明人：陶家发;孙承文;赖迎迢;江小燕;罗霞;赵长臣;巩华;刘春花;黄志斌 -专利权人：中国水产科学研究院珠江水产研究所
申请日： 2017-03-16 - 公布日： 2017-07-07 - 主分类号： A61K39/106 文献下载
摘要：本发明涉及一种哈氏弧菌外膜蛋白亚单位佐剂疫苗，具体涉及哈氏弧菌外膜蛋白亚单位佐剂疫苗及规模化制备技术。本发明所述哈氏弧菌外膜蛋白亚单位佐剂疫苗，包括以下组分哈氏弧菌外膜蛋白Ompk、Montanide ISA 763A(763A)佐剂。本发明还提供了所述的哈氏弧菌外膜蛋白亚单位佐剂疫苗规模化制备方法。其特征在于通过携带含有弧菌外膜蛋白Ompk基因质粒的大肠杆菌(工程菌)以500L发酵罐高密度培养与诱导表达，提取纯化得到弧菌外膜蛋白Ompk，与Montanide ISA 763A(763A)按照一定比例乳化，无菌分装，制成弧菌外膜蛋白Ompk佐剂疫苗成品。
一种弧菌膜蛋白单位佐剂疫苗规模化制备技术

[发明专利]用于膜蛋白在线鉴定的膜蛋白富集、纯化、酶解一体化装置及使用方法-CN201410320892.3有效
发明人：张祥民;刘一颖;晏国全;高明霞 -专利权人：复旦大学
申请日： 2014-07-08 - 公布日： 2014-10-01 - 主分类号： G01N30/06 文献下载
摘要：本发明属于生物分析与检测技术领域，具体为一种用于膜蛋白线鉴定的膜蛋白富集、纯化、酶解一体化装置。该装置由高压泵、六通阀、膜蛋白共价固定反应柱及有关连接组成。所述膜蛋白固定反应柱中填料表面的活性基团能够与膜蛋白游离氨基、羧基发生反应，从而将膜蛋白牢牢固定在反应柱上。本发明利用共价键合的原理将膜蛋白固定在反应柱内，增溶剂以及磷脂等干扰物可通过流动相在线冲洗的方法除去，不会造成额外的样品损失，从而达到理想的鉴定效果。实验表明，利用本发明装置具有反应效率高、非特异性吸附小等优点，并成功运用到大鼠鼠肝组织膜蛋白组的鉴定中。本发明装置结构新颖，实用高效，具有推广应用潜力。
用于膜蛋白在线鉴定富集纯化一体化装置使用方法

[发明专利]一种构建膜蛋白cDNA文库的方法及其应用-CN200810119120.8有效
发明人：田志刚;葛葵葵;孙汭;魏海明 -专利权人：中国科学技术大学
申请日： 2008-08-27 - 公布日： 2009-01-07 - 主分类号： C40B50/06 文献下载
摘要：本发明涉及了一种构建膜蛋白cDNA文库方法及其应用。该方法构建了用于特异性筛选膜蛋白表达的真核表达载体pSecTag－attR，该表达载体可与任意带有λ噬菌体重组位点attL的cDNA克隆文库进行克隆重组获得cDNA表达文库，转染COS－1细胞后，通过进一步免疫荧光筛选对文库中表达膜蛋白克隆进行筛选，获得膜蛋白cDNA表达文库。作为该方法的应用，C57BL/6小鼠肝脏淋巴细胞膜蛋白cDNA文库被建立，通过对该文库进行鉴定分析，证明该方法是一种高通量特异性筛选膜蛋白的有效方案，为描绘特定组织细胞表面膜蛋白图谱以及研究未知膜蛋白提供了一种有力的手段
一种构建膜蛋白 cdna 文库方法及其应用

[发明专利]分析-CN201380028866.7有效
发明人： F·H·马歇尔;S·A·亚扎那力-戴瓷弗;J·C·帕特勒 -专利权人：赫普泰雅治疗有限公司
申请日： 2013-05-31 - 公布日： 2017-03-08 - 主分类号： G01N33/542 文献下载
摘要：本发明提供用于评估膜蛋白构象稳定性的分析，包括(a)提供包含膜蛋白的第一群体和第二群体的样本；其中在所述第一群体中的膜蛋白标记有供体标记以及在所述第二群体中的膜蛋白标记有接受体标记，或者在所述第一群体中的膜蛋白标记有接受体标记以及在所述第二群体中的膜蛋白标记有供体标记；(b)将所述膜蛋白的第一和第二群体暴露至稳定性调节剂和/或条件；(c)以及，通过激活所述供体标记以允许与所述接受体标记进行产生可检测信号的距离依赖性相互作用，来评估在所述第一和第二群体的膜蛋白之间的聚集
分析