本发明公开了一种真菌漆酶基因Lac1,其核苷酸序列如SEQ ID NO:1所述。本发明还公开了漆酶重组菌株的构建方法:将真菌漆酶基因Lac1与表达载体pPIC9K连接,所得的重组质粒pPIC9K‑Lac1经线性化后,转化毕赤酵母GS115,构建获得毕赤酵母重组菌株GS115/pPIC9K‑Lac1;将毕赤酵母重组菌株进行诱导发酵,筛选具漆酶活性毕赤酵母重组菌株作为漆酶重组菌株。本发明还同时提供了利用漆酶重组菌株制备重组漆酶的方法;重组漆酶用于染料脱色。
本发明公开一种可可丛枝病菌漆酶及其工程菌、重组漆酶和应用。该可可丛枝病菌漆酶的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。编码上述漆酶的DNA序列如SEQ ID NO:2所示。该DNA序列在构建巴斯德毕赤酵母表达系统中应用。重组毕赤酵母工程菌是将表达载体pPICZαA‑6AA‑LacMP线性化后转化毕赤酵母获得。重组漆酶是将重组毕赤酵母工程菌进行发酵获得。该重组漆酶具有漆酶活性并对中性或碱性环境和卤素有较高的耐受性;实现了该漆酶在生物酶法合成阿魏酸多聚物中的应用。
本发明公开了一种优化后适用于毕赤酵母表达的漆酶LbLAC3I序列及其表达应用。所述漆酶LbLAC3I的核苷酸序列如SEQ ID No 1,全长1518bp,其编码的蛋白质序列如SEQ ID No2,共501个氨基酸。通过将该序列构建到毕赤酵母表达载体并转化入毕赤酵母中表达,可用于漆酶的生产及染料脱色。
本发明公开了一种优化后可在毕赤酵母和拟南芥中表达的漆酶LbLAC9I序列及其应用。所述漆酶LbLAC9I的核苷酸序列如SEQ ID No 1,全长1518 bp,其编码的蛋白质序列如SEQ ID No 2,共501个氨基酸。通过将该序列转入毕赤酵母和拟南芥中都能表达出有活性的漆酶,该漆酶可用于染料脱色。