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[发明专利]一种悬浮培养细胞单克隆筛选培养方法-CN201911361000.3有效
发明人：吴宗学;李跃;王增福;李海鹰;倪娇;赵成全;程海波;史张艳 -专利权人：乾元浩生物股份有限公司
申请日： 2019-12-25 - 公布日： 2021-12-14 - 主分类号： C12N5/071 文献下载
摘要：本发明公开一种悬浮培养细胞单克隆筛选培养方法，属于细胞培养技术领域。本发明通过在细胞培养容器内加入明胶溶液预处理，辅助促贴壁培养基，驯化悬浮细胞恢复贴壁特性，待适应贴壁后经有限稀释法进行单克隆培养，再以悬浮驯育培养基进行悬浮培养驯化，完成悬浮培养细胞单克隆筛选培养。本发明方法通过对悬浮细胞恢复贴壁培养特性，有效解决了悬浮细胞单克隆筛选培养的难题，细胞具有悬浮亲源性，大大缩短悬浮培养驯化时间。本发明提供了一种促贴壁培养基和一种悬浮驯育培养基，分别可用于恢复悬浮细胞贴壁特性和辅助细胞悬浮培养驯化。本发明方法可以用于CHO和PK15悬浮细胞的单克隆筛选，是选择优质、高效细胞基质的有效人工筛选途径。
一种悬浮培养细胞单克隆筛选方法

[发明专利]咖啡愈伤组织的悬浮培养方法-CN201910599053.2在审
发明人：王晓阳;闫林;黄丽芳;孙权;龙宇宙;林兴军;孙燕;谭军;董云萍;吉训志 -专利权人：中国热带农业科学院香料饮料研究所
申请日： 2019-07-04 - 公布日： 2019-08-27 - 主分类号： A01H4/00 文献下载
摘要：本发明涉及植物组织培养技术领域，特别涉及咖啡愈伤组织的悬浮培养方法。本发明所述方法将咖啡胚性愈伤组织接种至悬浮培养基中进行悬浮起始培养；然后取所述悬浮起始培养后的新生细胞团，以0.03～0.04ml新生细胞团/1ml液体培养基的浓度接种至所述悬浮培养基中进行继代增殖培养本发明选择特定的悬浮培养基结合特定的继代起始浓度对咖啡愈伤组织进行悬浮培养，悬浮增殖率较高，且悬浮细胞的胚性活力保持良好。
悬浮培养基悬浮培养愈伤组织咖啡悬浮新生细胞接种植物组织培养技术继代增殖培养胚性愈伤组织液体培养基活力保持悬浮细胞继代胚性

[发明专利]动物细胞的悬浮培养用添加物、悬浮培养用培养基和悬浮培养方法-CN201980049708.7在审
发明人：伊藤健一郎;风吕光俊平;大矢裕介;樋口拓哉 -专利权人：味之素株式会社
申请日： 2019-07-26 - 公布日： 2021-03-09 - 主分类号： C12N5/02 文献下载
摘要：本发明涉及含有水溶性聚合物的动物细胞的悬浮培养用添加物和培养基、以及包括用含有水溶性聚合物的培养基对动物细胞进行悬浮培养的动物细胞的悬浮培养方法，根据本发明，能够提供在动物细胞的悬浮培养中，可抑制因搅拌、振荡、回流、气体通风等物理刺激导致的胰岛素等培养基成分的析出、提高动物细胞的培养效率和培养细胞的品质的动物细胞的悬浮培养用添加物、悬浮培养用培养基和悬浮培养方法。
动物细胞悬浮培养添加物培养基方法

[发明专利]甘蔗悬浮单细胞的分离培养方法及再生成植株的方法-CN202310483613.4在审
发明人：李素丽;张德梅;王瑞;袁帅;李馨竹 -专利权人：广西大学
申请日： 2023-04-28 - 公布日： 2023-07-21 - 主分类号： C12N5/04 文献下载
摘要：本发明属于生物技术领域，提供甘蔗悬浮单细胞的分离培养方法及再生成植株的方法。甘蔗悬浮单细胞的分离培养方法包括愈伤组织的诱导及继代培养；胚性悬浮细胞的获取和悬浮单细胞的获取；再生成植株的方法包括将胚性悬浮单细胞在MS培养基中悬浮振荡继代培养，得到疏松型悬浮细胞颗粒；将疏松型悬浮细胞颗粒转到基本分化培养基上进行分化培养；将不规则紧密型细胞团转移到基本MS生根培养基上光照培养；本发明首次建立了甘蔗悬浮单细胞培养与植株再生体系，为甘蔗新品种的培育提供基础。
甘蔗悬浮单细胞分离培养方法再生植株

[发明专利]无血清悬浮培养型MDCK细胞株及其应用-CN201910237638.X在审
发明人：乔自林;马忠仁;马祺;徐水林;刘振斌;张海霞;李向茸;王家敏 -专利权人：西北民族大学
申请日： 2019-03-27 - 公布日： 2019-06-07 - 主分类号： C12N5/071 文献下载
摘要：本发明公开了一种无血清悬浮培养型MDCK细胞株及其应用，所述无血清悬浮培养型MDCK细胞株保藏于中国典型培养物保藏中心，分类命名：犬肾细胞MDCK‑XF04，保藏编号为：CCTCC NO：C2018192；所述无血清悬浮培养型MDCK细胞株可应用于流感疫苗和禽流感疫苗的生产。本发明通过无血清适应培养和悬浮培养驯化，得到了无血清悬浮培养型MDCK‑XF04细胞株，犬肾细胞MDCK‑XF04细胞在无血清培养基悬浮培养活力高、结团少且均一性较好，完全适应在无血清培养基中进行悬浮培养，为我国开展流感和禽流感疫苗的相关研究和生产提供了无血清悬浮培养型细胞株。
悬浮培养无血清保藏无血清培养基禽流感疫苗犬肾细胞细胞株血清中国典型培养物应用流感疫苗均一性驯化结团流感细胞分类生产研究

[发明专利]无血清悬浮培养型MDCK细胞株及其应用-CN201910238103.4在审
发明人：王家敏;马忠仁;徐水林;马祺;冯若飞;乔自林;刘振斌;令世鑫 -专利权人：西北民族大学
申请日： 2019-03-27 - 公布日： 2019-06-07 - 主分类号： C12N5/071 文献下载
摘要：本发明公开了一种无血清悬浮培养型MDCK细胞株及其应用，所述无血清悬浮培养型MDCK细胞株保藏于中国典型培养物保藏中心，分类命名：犬肾细胞MDCK‑XF02，保藏编号为：CCTCC NO：C2018190；所述无血清悬浮培养型MDCK细胞株可应用于流感疫苗和禽流感疫苗的生产。本发明通过无血清适应培养和悬浮培养驯化，得到了无血清悬浮培养型MDCK‑XF02细胞株，犬肾细胞MDCK‑XF02细胞在无血清培养基悬浮培养活力高、结团少且均一性好，完全适应在无血清培养基中进行悬浮培养，为我国开展流感和禽流感疫苗的相关研究和生产提供了无血清悬浮培养型细胞株。
悬浮培养无血清保藏无血清培养基禽流感疫苗犬肾细胞细胞株血清中国典型培养物应用流感疫苗均一性驯化结团流感细胞分类生产研究

[发明专利]无血清悬浮培养型MDCK细胞株及其应用-CN201910237651.5在审
发明人：马忠仁;乔自林;靳冬武;刘振斌;令世鑫;柏家林;王家敏 -专利权人：西北民族大学
申请日： 2019-03-27 - 公布日： 2019-06-25 - 主分类号： C12N5/071 文献下载
摘要：本发明公开了一种无血清悬浮培养型MDCK细胞株及其应用，所述无血清悬浮培养型MDCK细胞株保藏于中国典型培养物保藏中心，分类命名：犬肾细胞MDCK‑XF03，保藏编号为：CCTCC NO：C2018191；所述无血清悬浮培养型MDCK细胞株可应用于流感疫苗和禽流感疫苗的生产。本发明通过无血清适应培养和悬浮培养驯化，得到了无血清悬浮培养型MDCK‑XF03细胞株，犬肾细胞MDCK‑XF03细胞在无血清培养基悬浮培养活力高、结团少且均一性较好，完全适应在无血清培养基中进行悬浮培养，为我国开展流感和禽流感疫苗的相关研究和生产提供了无血清悬浮培养型细胞株。
悬浮培养无血清保藏无血清培养基禽流感疫苗犬肾细胞细胞株血清中国典型培养物应用流感疫苗均一性驯化结团流感细胞分类生产研究

[发明专利]一种马尾松胚性细胞增殖的悬浮培养方法-CN201910617230.5有效
发明人：姚瑞玲;王胤 -专利权人：广西壮族自治区林业科学研究院
申请日： 2019-07-10 - 公布日： 2022-04-01 - 主分类号： C12N5/04 文献下载
摘要：本发明公开了一种马尾松胚性细胞增殖的悬浮培养方法，包括材料选择、初始接种和悬浮培养工序，将在培养基Ⅰ中培养获得的生长快、活力旺盛的胚性愈伤作为培养材料，然后将在培养基Ⅱ中通过二次振荡培养获取的胚性培养物置于培养基Ⅲ中进行悬浮培养，最后获得马尾松悬浮胚性细胞。本发明详细、系统地对悬浮增殖培养中的材料性状、初始接种量、接种密度、培养周期及培养条件等进行了明确的规定，实现了马尾松胚性愈伤悬浮培养体系的建立，并获取了大量的悬浮培养的胚性细胞系，为今后开展相关马尾松细胞与基因工程方面的研究提供了可靠的资源与技术保障
一种马尾松细胞增殖悬浮培养方法

[发明专利]一种悬浮培养细胞的方法-CN201210542003.9有效
发明人：徐明明;张静;马景霞 -专利权人：山东滨州沃华生物工程有限公司
申请日： 2012-12-14 - 公布日： 2013-04-17 - 主分类号： C12N5/02 文献下载
摘要：本发明提供一种悬浮培养细胞的方法，其包括如下步骤：（1）利用细胞融合技术将贴壁无限传代细胞系与有限传代悬浮细胞融合，建立既能无限传代又能悬浮培养的融合细胞系；（2）筛选悬浮生长的融合细胞；（3）将融合细胞系传代培养本发明的有益效果是：本发明利用细胞融合技术将贴壁培养的细胞驯化为可悬浮培养的细胞，充分利用了悬浮培养的优点，为利用悬浮细胞获得目的产物奠定基础，本方法所驯化悬浮细胞可利用含有血清的普通细胞培养液进行培养，与无血清培养液相比，大大降低了培养成本。本方法采用全悬浮培养，简化生产过程，缩短生产时间，提高生产效率，并易于进行扩大培养。
一种悬浮培养细胞方法

[发明专利]一种悬浮生物培养系统装置-CN202310832336.3在审
发明人：崔大祥;彭家伟;周园园;王茜茜;崔明青;葛美英 -专利权人：国纳之星（上海）纳米科技发展有限公司;上海纳米技术及应用国家工程研究中心有限公司
申请日： 2023-07-07 - 公布日： 2023-08-22 - 主分类号： C12M3/02 文献下载
摘要：本发明涉及一种悬浮生物培养系统装置，其主要由培养系统、智能控制系统两大模块组成，智能控制系统与培养系统可通过连接钮扣进行组装，即可形成悬浮生物培养系统装置。培养系统与智能控制系统组装方便，对于一些需静置培养类悬浮细胞，培养系统也可独立使用，对于需要动态培养类生物培养物，培养系统可与智能控制系统组装使用，因此整个悬浮生物培养系统装置不仅操作简易、且携带便捷，适用于如悬浮细胞类、固定化3D细胞类和细菌发酵类等悬浮培养。
一种悬浮生物培养系统装置

[发明专利]一种适应全悬浮培养的羊睾丸永生化细胞驯化方法-CN201811205098.9在审
发明人：杨朋欣;丁国杰;冯育宁;周建华;薛晓娟;郑玉芳;汉武娇;李媛妹;池贤凤;侯丹丹 -专利权人：安徽东方帝维生物制品股份有限公司
申请日： 2018-10-16 - 公布日： 2020-04-24 - 主分类号： C12N5/071 文献下载
摘要：本发明公开了一种适应全悬浮培养的羊睾丸永生化细胞驯化方法，包括：(1)将未驯化的羊睾丸细胞水浴复苏后离心；(2)用含5％新生牛血清的DMEM培养液重悬细胞后接种于细胞培养瓶内培养；(3)传代培养，消化；(4)回旋悬浮培养；(5)转入悬浮培养瓶中培养直至细胞大团消失，重复培养时细胞密度能够稳定，获得适应全悬浮的羊睾丸永生化细胞。在悬浮培养条件下，本发明驯化培养的代细胞形态为圆球形、透亮，呈单个或小团状悬浮状；经过10代的悬浮驯化细胞可稳定在96h培养至2～3×106细胞/ml；病毒培养适应性显示，所驯化的悬浮细胞接种羊口疮病毒72h后，病毒滴度达到峰值，与贴壁培养的细胞产毒水平相似。
一种适应悬浮培养睾丸永生细胞驯化方法

[发明专利]一种木芙蓉细胞的悬浮培养方法-CN201711491079.2在审
发明人：刘军;谢丹 -专利权人：杭州纽贝生物科技有限公司
申请日： 2017-12-30 - 公布日： 2018-05-15 - 主分类号： C12N5/04 文献下载
摘要：本发明公开了一种木芙蓉细胞的悬浮培养方法，是取木芙蓉腋芽作为外植体，进行表面消毒；然后将消毒后的外植体置于愈伤组织诱导培养基上，进行培养获得愈伤组织；再进行细胞预培养、细胞悬浮培养和细胞继代培养，获得大量的悬浮培养细胞本发明通过对木芙蓉进行细胞的悬浮培养，可实现大规模快速生产出有效成分含量高的木芙蓉细胞培养物，为木芙蓉细胞悬浮培养生产次生代谢产物奠定了良好的基础。
一种木芙蓉细胞悬浮培养方法

[发明专利]一种桔梗细胞的悬浮培养方法-CN201711491086.2在审
发明人：刘军;谢丹 -专利权人：杭州纽贝生物科技有限公司
申请日： 2017-12-30 - 公布日： 2018-04-20 - 主分类号： C12N5/04 文献下载
摘要：本发明公开了一种桔梗细胞的悬浮培养方法，是取桔梗腋芽作为外植体，进行表面消毒；然后将消毒后的外植体置于愈伤组织诱导培养基上，进行培养获得愈伤组织；再进行细胞预培养、细胞悬浮培养和细胞继代培养，获得大量的悬浮培养细胞本发明通过对桔梗进行细胞的悬浮培养，可实现大规模快速生产出有效成分含量高的桔梗细胞培养物，为桔梗细胞悬浮培养生产次生代谢产物奠定了良好的基础。
一种桔梗细胞悬浮培养方法

[发明专利]一种石榴细胞的悬浮培养方法-CN201711491077.3在审
发明人：刘军;谢丹 -专利权人：杭州纽贝生物科技有限公司
申请日： 2017-12-30 - 公布日： 2018-05-11 - 主分类号： C12N5/04 文献下载
摘要：本发明公开了一种石榴细胞的悬浮培养方法，是取石榴腋芽作为外植体，进行表面消毒；然后将消毒后的外植体置于愈伤组织诱导培养基上，进行培养获得愈伤组织；再进行细胞预培养、细胞悬浮培养和细胞继代培养，获得大量的悬浮培养细胞本发明通过采用对石榴细胞的悬浮培养，可实现大规模快速生产出均匀一致的有效成分含量高的石榴细胞培养物，为石榴细胞悬浮培养生产次生代谢产物奠定了良好的基础。
一种石榴细胞悬浮培养方法

[发明专利]一种合欢细胞的悬浮培养方法-CN201711491080.5在审
发明人：刘军;谢丹 -专利权人：杭州纽贝生物科技有限公司
申请日： 2017-12-30 - 公布日： 2018-05-08 - 主分类号： C12N5/04 文献下载
摘要：本发明公开了一种合欢细胞的悬浮培养方法，是取合欢腋芽作为外植体，进行表面消毒；然后将消毒后的外植体置于愈伤组织诱导培养基上，进行培养获得愈伤组织；再进行细胞预培养、细胞悬浮培养和细胞继代培养，获得大量的悬浮培养细胞本发明通过对合欢进行细胞的悬浮培养，可实现大规模快速生产出有效成分含量高的合欢细胞培养物，为合欢细胞悬浮培养生产次生代谢产物奠定了良好的基础。
一种合欢细胞悬浮培养方法

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