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[发明专利]粘附型细胞的培养方法、培养容器和蛋白质的产生方法-CN201580031475.X在审
发明人：市村直也;平野孝明 -专利权人：日本瑞翁株式会社
申请日： 2015-06-24 - 公布日： 2017-02-22 - 主分类号： C12N5/071 文献下载
摘要：本发明是即使让粘附型细胞处于悬浮状态下，也能够不使其死亡而是使其增殖的粘附型细胞的培养方法；包含液体培养基和在该液体培养基中悬浮生存的粘附型细胞、使用含脂环结构的聚合物而制成的培养容器；以及蛋白质的产生方法通过使粘附型细胞和含脂环结构的聚合物成型体接触，从而能够使该粘附型细胞在液体培养基中以悬浮的状态增殖。
粘附细胞培养方法容器蛋白质产生

[发明专利]生产在无血清的培养基悬浮培养中稳定的A549细胞系的方法-CN200480038524.4无效
发明人： Z·刘;R·L·小龙利;M·P·桑托洛;M·沃洛奇 -专利权人：先灵公司
申请日： 2004-12-21 - 公布日： 2007-01-17 - 主分类号： C12N5/08 文献下载
摘要：本发明提供了使细胞，如A549细胞适应在无血清并且无动物材料的培养基悬浮培养中生长的方法。本发明提供了从适应在无血清并且无动物材料的培养基悬浮培养中生长的A549细胞制备病毒，如腺病毒的方法。
生产血清培养基悬浮培养稳定 a549 细胞系方法

[发明专利]一种硫酸新霉素发酵的方法-CN201210465665.0无效
发明人：沈联兵;周云;李文豪;何连明;姚明高 -专利权人：宜昌三峡制药有限公司
申请日： 2012-11-19 - 公布日： 2013-03-13 - 主分类号： C12P19/52 文献下载
摘要：一种硫酸新霉素发酵的方法，其特征在于该方法由以下步骤组成：1）培养斜面孢子：将砂土孢子制得斜面孢子；2）培养斜面孢子悬浮液：将斜面孢子于28±2℃，4～12天培养制得斜面孢子悬浮液；3）种子罐培养：将斜面孢子悬浮液放入种子培养罐中培养，种子罐中花生粕的质量含量为种子罐培养液质量的1～2%；4）发酵罐培养：将经种子罐培养的培养液送入发酵培养罐中培养，发酵罐中的培养液中的花生粕的质量含量为发酵罐培养液质量的0～4%；5）将发酵液浓度稀释稀发酵液
一种硫酸新霉素发酵方法

[发明专利]一种以工业大麻悬浮细胞制备大麻二酚的方法-CN202211485594.0在审
发明人：李珊珊;杨镇才;王丹;王志刚;翟莹;钟胐杲 -专利权人：齐齐哈尔大学
申请日： 2022-11-24 - 公布日： 2023-03-28 - 主分类号： C07C39/23 文献下载
摘要：本发明公开了一种以工业大麻悬浮细胞制备大麻二酚的方法，所述的方法包括以下步骤：(1)大麻细胞的制备；(2)悬浮细胞的培养；以及(3)赤霉素诱导悬浮细胞合成大麻二酚。使用本发明的方法能够快速获得大麻悬浮细胞，且培养4d以后其细胞数达到亿个以上。此外，本发明通过对细胞培养条件进行优化，有效提高了悬浮细胞的生长速度，且细胞存活率为90％以上。本发明通过赤霉素的诱导，大麻悬浮细胞培养18d即可快速获得CBD和CBDA，且CBD总含量能够达到0.539μg/mL。
一种工业大麻悬浮细胞制备方法

[发明专利]一种黄菖蒲愈伤组织的培养方法-CN201010162983.0无效
发明人：杨柳燕;杜宏伟;武俊;肖琳;李丽观;陈洪龄;许超;华海峰;张全兴 -专利权人：南京大学;江苏九久环境科技有限公司
申请日： 2010-05-05 - 公布日： 2010-09-01 - 主分类号： A01H4/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种黄菖蒲愈伤组织的培养方法：当黄菖蒲种子胚芽上的愈伤组织直径超过0.5cm时，将其从种子胚芽上切除，接种到新鲜的固体继代培养基上，进行继代培养，此后每2周继代培养一次；取出一粒愈伤组织在无菌滤纸上用镊子夹成小块，放入新鲜的培养液中，在25℃、90转/分钟条件下培养2周，形成愈伤组织悬浮液，将愈伤组织悬浮液按1∶30(v/v)接种到新鲜的培养液中进行继代培养，继代培养周期为2周；当需要使用愈伤组织进行快速繁殖或者转基因时，使用50目孔径的无菌尼龙膜过滤愈伤组织悬浮液，得到的大块愈伤组织转接到固体继代培养基上备用，过滤后剩余的愈伤组织悬浮液继续培养。
一种菖蒲组织培养方法

[发明专利]包含胶质前体细胞的细胞聚集体的制备方法-CN202080061852.5在审
发明人：神山淳;镰田泰裕;中村雅也;冈野荣之;齐藤美帆;井上满博 -专利权人：学校法人庆应义塾;大日本住友制药株式会社
申请日： 2020-09-04 - 公布日： 2022-04-19 - 主分类号： C12N5/02 文献下载
摘要：本发明涉及的包含胶质前体细胞的细胞聚集体的制备方法包括以下步骤：步骤(1)，在含有1种以上的SMAD信号传导抑制剂及1种以上的Wnt信号传导激活剂的类胚体形成培养基中，不存在饲养细胞的情况下，将多潜能干细胞悬浮培养5天～10天，由此形成细胞聚集体；步骤(2)，将步骤(1)中得到的细胞聚集体在含有维甲酸的类胚体形成培养基中悬浮培养；步骤(3)，将步骤(2)中得到的细胞聚集体在含有维甲酸及1种以上的SHH信号传导激活剂的类胚体形成培养基或神经·胶质增殖用培养基中悬浮培养；以及步骤(4)，将步骤(3)中得到的细胞聚集体在不含维甲酸、且含有1种以上的SHH信号传导激活剂的神经·胶质增殖用培养基中悬浮培养。
包含胶质体细胞细胞聚集体制备方法

[发明专利]一种玫烟色棒束孢菌菌株的分离及培养方法-CN201310392214.3有效
发明人：马瑞燕;田晶;李新凤;梁丽;郝赤;刘同先 -专利权人：山西农业大学
申请日： 2013-09-02 - 公布日： 2013-12-18 - 主分类号： C12N1/14 文献下载
摘要：本发明公开一种玫烟色棒束孢菌菌株的分离及培养方法，该方法为：从蔬菜叶上采集被虫生真菌侵染的烟粉虱虫尸，从虫尸上分离虫生真菌，放入PDA培养基上培养后制成孢子悬浮液喷于烟粉虱2龄若虫上，培养后从虫尸上再次分离该虫生真菌从冰箱中取出虫生真菌，制成孢子悬浮液，用滤纸片沾取孢子悬浮液，接种于培养基上，对置于霉菌培养箱中培养，挑取菌丝接入无菌水中搅拌，过滤，将孢子悬浮液，置于培养皿中心，在菌落中心打孔，吐温-80打散，搅拌，用该方法对最适培养基配方、温度、pH、光照条件和通气条件进行筛选。本发明的优点在于菌落直径面积大，产孢量大。
一种烟色棒束孢菌菌株分离培养方法

[发明专利]生产百里酚的方法-CN200810067880.9无效
发明人：李晓东;邓盾;卢爱华 -专利权人：深圳职业技术学院
申请日： 2008-06-18 - 公布日： 2008-11-12 - 主分类号： C12P7/22 文献下载
摘要：本发明涉及生产百里酚的方法，包括如下步骤：培养诱导材料，即获取用作诱导材料的百里香无菌幼苗；制备愈伤组织，即将诱导材料接种到诱导培养基上获取愈伤组织；细胞悬浮培养，即将愈伤组织接到悬浮培养基中培养，获取细胞悬浮培养物和培养液；提取，即对细胞悬浮培养物和培养液进行提取以获取百里酚。
生产百里方法

[发明专利]一种鸭瘟病毒的全悬浮培养方法-CN201811172272.4在审
发明人：叶俊贤;陈瑞爱;李延鹏;蔡仕君;罗琼 -专利权人：华农（肇庆）生物产业技术研究院有限公司;华南农业大学;肇庆大华农生物药品有限公司;甘肃健顺生物科技有限公司
申请日： 2018-10-09 - 公布日： 2019-01-15 - 主分类号： C12N7/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种鸭瘟病毒的全悬浮培养方法，包括以下步骤：步骤1：鸭胚细胞衍生的传代细胞系的复苏与传代培养。步骤2：采用二阶培养法，向全悬浮培养的鸭胚细胞衍生的传代细胞系接种鸭瘟病毒，实现病毒大规模培养。步骤3：接毒后，每隔12h取样测定病毒的TCID₅₀，在病毒TCID₅₀达到最高时收获病毒并保存，得到培养后的鸭瘟病毒。本发明的全悬浮培养方法提高了病毒培养规模和效率，符合未来疫苗生产的趋势，有广阔的应用前景及蕴含良好的经济效益。
鸭瘟病毒全悬浮病毒传代鸭胚大规模培养细胞系接种细胞病毒培养传代培养疫苗生产二阶取样复苏保存收获应用

[发明专利]一种鸭肝炎病毒的全悬浮培养方法-CN201811172271.X在审
发明人：温良海;陈瑞爱;蔡仕君;叶俊贤;谭银娟 -专利权人：华农（肇庆）生物产业技术研究院有限公司;华南农业大学;肇庆大华农生物药品有限公司;甘肃健顺生物科技有限公司
申请日： 2018-10-09 - 公布日： 2019-02-01 - 主分类号： C12N7/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种鸭肝炎病毒的全悬浮培养方法，包括以下步骤：步骤1：鸭胚细胞衍生的传代细胞系的复苏与传代培养。步骤2：采用二阶培养法，向全悬浮培养的鸭胚细胞衍生的传代细胞接种鸭肝炎病毒，实现病毒大规模培养。步骤3：接毒后，每隔12h取样测定病毒的ELD₅₀，在病毒ELD₅₀达到最高时收获病毒并保存，得到培养后的鸭肝炎病毒。本发明的全悬浮培养方法提高了病毒培养规模和效率，符合未来疫苗生产的趋势，有广阔的应用前景及蕴含良好的经济效益。
鸭肝炎病毒全悬浮病毒鸭胚传代大规模培养细胞病毒培养传代培养传代细胞疫苗生产二阶取样接种复苏保存收获应用

[发明专利]一种全悬浮培养BHK-21细胞的CD培养基及其摇瓶培养工艺-CN202111190990.6在审
发明人：王龙;姚芸;王猛 -专利权人：无锡多宁生物科技有限公司
申请日： 2021-10-13 - 公布日： 2021-12-21 - 主分类号： C12N5/071 文献下载
摘要：本发明公开了一种全悬浮培养BHK‑21细胞的CD培养基及其摇瓶培养工艺，包括下列步骤：1)按配比称量培养基中各组成分；2)将称量好的氨基酸组；维生素组；无机盐与微量元素组；脂类、糖类与缓冲剂组溶解；3)将溶解好的各组成分混合，用0.2μm的滤膜过滤，获得悬浮培养BHK‑21细胞的CD培养基；本发明所述悬浮培养BHK‑21细胞的CD培养基具有成本低廉、安全性高、污染风险小、批间差小且稳定好的特点，并且具有制作快速
一种悬浮培养 bhk 21 细胞 cd 培养基及其工艺

[发明专利]大蒜胚性悬浮培养系建立用的培养基-CN201010169619.7无效
发明人：张允刚 -专利权人：江苏徐淮地区徐州农业科学研究所
申请日： 2010-05-06 - 公布日： 2010-09-01 - 主分类号： A01H4/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种建立大蒜胚性悬浮培养系的培养基，属大蒜组织培养技术。将2，4-D、KT、蔗糖、琼脂溶解于基本培养基B5中，pH值调整至5.8-6.0制得，其各组份的用量为：以1L基本培养基B5加入量计：B5 1L，2，4-D 2mg，KT 0.5-2mg，蔗糖30g。有益效果是利用本培养基可以建立大蒜悬浮培养系，解决了大蒜茎尖分生组织诱导出胚性愈伤组织悬浮培养时易丧失胚性，难以成系的技术难题。
大蒜悬浮培养建立培养基

[发明专利]茶叶悬浮单细胞的分离培养方法-CN201710344329.3有效
发明人：侯如燕;胡奕铮;焦卫婷;孙俊;李建超;肖昱 -专利权人：安徽农业大学
申请日： 2017-05-16 - 公布日： 2021-03-26 - 主分类号： C12N5/04 文献下载
摘要：本发明公开了一种茶叶悬浮单细胞的分离培养方法，包括茶树叶片的选取、无菌叶片的消毒、愈伤组织的诱导、液体悬浮细胞的培养、液体悬浮细胞的扩大培养、单细胞分离等步骤。本发明方法所制备的茶叶悬浮细胞生长速度快，代谢活性较高。建立了一个快速生长的悬浮细胞培养体系及单细胞分离方法，为茶叶细胞学研究和次级代谢产物的研究奠定基础。
茶叶悬浮单细胞分离培养方法

[发明专利]悬浮MDCK细胞相关疫苗生产的二阶培养工艺技术-CN201611207062.5在审
发明人：罗顺;蔡仕君;赵志欣;王嘉琪 -专利权人：甘肃健顺生物科技有限公司
申请日： 2016-12-23 - 公布日： 2018-07-03 - 主分类号： C12N5/071 文献下载
摘要：本发明涉及悬浮MDCK细胞相关疫苗生产的二阶培养工艺技术。本发明以悬浮MDCK细胞作为宿主细胞，采用二阶培养接毒方式生产能在MDCK悬浮细胞上病变的病毒，即，在细胞密度生长到2×106/mL‑20×106/mL时，用生产培养基稀释1‑5倍，稀释后细胞密度在1×本发明的生产工艺简单；不浪费培养基；不换液；生产培养基和生长培养基为相同或不同培养基，二者按比例混合，即可以达到细胞生长和病毒生长的作用。
二阶稀释悬浮生产培养基工艺技术疫苗生产培养基按比例混合生长培养基细胞病毒生长宿主细胞细胞生长悬浮细胞换液生产工艺病变病毒生长生产

[发明专利]一种用于Vero细胞的培养基及其培养方法-CN200710187466.7无效
发明人：黄宗堂;唐贺文 -专利权人：天津百若克医药生物技术有限责任公司
申请日： 2007-11-27 - 公布日： 2008-05-21 - 主分类号： C12N5/06 文献下载
摘要：本发明涉及一种培养基的配制和使用方法，更具体地说涉及一种用于Vero细胞的培养基及其培养方法。属于生物制品领域。本发明产品的培养方法如下：将贴壁生长的Vero细胞，Vero细胞悬浮适应SFM无血清培养基驯化适应培养，Vero生长方式可由贴壁生长转化为悬浮生长；进一步使Vero细胞可以在Vero扩增CHEMICALLYDEFINED MEDIUM培养基中扩增生长。本发明方法具有良好的效果，因为使Vero细胞生长模式，从贴壁生长转化为悬浮生长，改变细胞的生长模式，可以极大地增加细胞产量。
一种用于 vero 细胞培养基及其培养方法