本发明提供了一种双链RNA,其正义链核苷酸序列为序列表中SEQ ID NO.1所示序列,反义链核苷酸序列为序列表中SEQ ID NO.2所示序列。本发明还提供了一种RNAi反向重复序列,其所述双链RNA的正义链序列和反义链序列,其核苷酸序列为序列表中SEQ ID NO.3所示序列。本发明还提供了含有所述双链RNA或所述RNAi反向重复序列的表达载体及其应用。本发明提供的双链RNA、含有所述的双链RNA的正义链序列和反义链序列的RNAi反向重复序列及其表达载体能有效沉默V‑ATPA基因,可用于伊蚊的生物控制,具有环境友好的特色和较高的商业应用价值。
本发明属于分子基因学领域,具体涉及一种cfDNA建库的接头、引物组、试剂盒和建库方法;接头包括单链接头A和双链接头B;引物组包括SEQ ID NO.4‑6所示的序列;试剂盒包括所述接头和引物组;建库方法包括如下步骤(1)对cfDNA进行去磷酸化与变性,得单链cfDNA;(2)连接单链cfDNA与3′端被修饰的单链接头A,得3′端被修饰的单链连接产物;(3)单向扩增第一次连接产物,得双链cfDNA;(4)连接双链cfDNA与双链接头B,得双链连接产物;(5)除去双链连接产物中3′端被修饰的一条链;(6)文库质检;本发明首先将得到的ctDNA变性使其由双链变成单链,然后通过单链连接酶连接接头,使得几乎所有的ctDNA都能被捕获