本发明属于分子基因学领域，具体涉及一种ctDNA建库试剂盒和建库方法；包括发卡接头A、双链接头B和引物组；所述发卡接头A包括接头A1和接头A2，接头A1和接头A2的序列分别为SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2，且接头A2的3′端用生物素修饰；所述双链接头B包括接头B1和接头B2，接头B1和接头B2的序列分别为SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4；所述引物组包括扩增引物和接头引物，扩增引物的序列号为SEQ ID NO.5，接头引物的序列为SEQ ID NO.6‑7；本发明提供的试剂盒灵敏度高，能提高ctDNA测序通量和测序准确性。
本发明属于分子基因学领域，具体涉及一种cfDNA建库的接头、引物组、试剂盒和建库方法；接头包括单链接头A和双链接头B；引物组包括SEQ ID NO.4‑6所示的序列；试剂盒包括所述接头和引物组；建库方法包括如下步骤(1)对cfDNA进行去磷酸化与变性，得单链cfDNA；(2)连接单链cfDNA与3′端被修饰的单链接头A，得3′端被修饰的单链连接产物；(3)单向扩增第一次连接产物，得双链cfDNA；(4)连接双链cfDNA与双链接头B，得双链连接产物；(5)除去双链连接产物中3′端被修饰的一条链；(6)文库质检；本发明首先将得到的ctDNA变性使其由双链变成单链，然后通过单链连接酶连接接头，使得几乎所有的ctDNA都能被捕获，避免了ctDNA的损耗，从而提高了检测灵敏度。
