本发明公开了一种检测大气环境中磺胺类耐药基因sulI的方法。该方法包括以下两个内容:(1)提取目标大气环境样品中的DNA,以此获取的DNA为模板,用本发明设计的正向引物和反向引物对(SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2)提取的DNA样品为模板,利用定量PCR扩增技术获得目的基因的PCR产物;(2)运用步骤(1)中得到的PCR扩增循环数,依据定量PCR测定目的基因sulI质粒标准品的标准曲线,得到目标大气环境样品中磺胺类耐药基因sulI的含量。本发明提供的目的基因引物序列和方法可以对大气环境样品中磺胺类耐药基因sulI进行快速精确定量。