本申请涉及生物技术领域,尤其涉及一种外源表达蛋白的信号标志物、外源表达蛋白及其制备方法;所述信号标志物包括如SEQ ID NO.1所示的kozak序列、如SEQ ID NO.2所示的信号肽和如SEQ IDNO.3所示的无序序列;所述外源表达蛋白包括DDR1蛋白片段、MAGEA4蛋白片段和ACP3蛋白片段,DDR1蛋白、MAGEA4蛋白和ACP3蛋白的N端分别连接信号标志物;利用kozak序列增加外源表达蛋白在翻译阶段的表达效率的这一特性,再利用信号肽增加外源表达蛋白在分泌过程中跟细胞膜识别定位的准确性的这一特性,最后通过无序序列加快分泌蛋白跟细胞膜的结合速度,因此通过该信号标志物,可以综合提高外源表达蛋白的表达量和表达纯度。