本发明公开了一种用于TRV介导的基因沉默系统中的指示基因，其核酸序列如SEQ ID No:1所示，还公开了含有该序列的病毒诱导沉默载体及其构建方法，并利用该沉默载体侵染柑橘幼苗的方法。本发明为TRV介导的病毒诱导基因沉默体系提供有效的指示基因，是首次在柑橘中成功建立TRV介导的病毒沉默系统，成功地沉默了柑橘中的指示基因。利用本发明的沉默载体构建的沉默系统操作简单、转化效率高、能够快速地在柑橘中对基因进行功能验证。能够有效地抑制柑橘中的内源基因表达，表型显著。本发明提供的沉默载体为快速、有效地在柑橘中进行基因功能验证提供了可靠技术。
本发明公开了一种基于CasRx的植物基因沉默载体及其构建方法和应用，涉及植物分子生物学领域中的定向基因沉默技术。本植物基因沉默载体是CasRx双元表达载体pHLW‑CasRx；其结构是35S驱动CasRx蛋白表达、AtU6‑26启动子驱动sgRNA表达；其系列是SEQ ID NO.1所示。本发明建立的基于CasRx的植物基因沉默载体能够快速简单特异地对植物基因进行高效的基因沉默，弥补了植物中基于CasRx的高效定向基因沉默系统，同时解决了RNAi技术诸多缺陷；本发明建立的植物基因沉默体系简单、快速、高特异性，能够快速高效高特异性的对植物靶标基因进行表达量敲低和RNA干扰。
本发明公开了一种鉴定桑树MmPDS基因的VIGS沉默体系及其构建方法和应用，所述沉默体系具有如SEQ ID NO.1所示的干扰片段基因序列。本发明首次实现桑树MmPDS基因VIGS沉默体系的构建，获得了具有能够使桑树MmPDS基因沉默的体系；本发明通过在特异性引物中引入Xba I酶切位点和BamH I酶切位点，并采用烟草脆裂病毒TRV构建的桑树MmPDS基因沉默体系，能够在桑树植株内进行系统扩散转播；本发明所述沉默体系能够有效降低桑树MmPDS基因的表达水平，叶绿素被漂白。
