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[发明专利]基因修饰位点-CN202080056524.6在审
发明人：伦道夫·科特林;鲁本·多格拉西亚斯 -专利权人：兰诺龙有限公司
申请日： 2020-08-10 - 公布日： 2022-03-25 - 主分类号： C12N5/10 文献下载
摘要：本发明涉及基因工程，特别是转基因的插入位点、在该插入位点处包含转基因或其它修饰的细胞、用于靶向该插入位点的载体，以及通过在该位点处插入或其它修饰来产生转基因细胞的方法。插入位点或“安全港基因座”在人类染色体13q12.12上的SPATA13基因内鉴定。描述在染色体13q12.12上的SPATA13基因内包含基因修饰的哺乳动物细胞，其中修饰可为插入，诸如整合转基因。还描述能够并适于引导转基因插入到该插入位点的核酸分子。这些细胞或核酸可用于治疗。
基因修饰

[发明专利]插入有特定基因的干细胞治疗剂的基因插入位点分析系统及分析方法-CN202180093173.0在审
发明人：徐海荣;金御珍;张多荣;金性洙;金湘浩 -专利权人：细胞和大脑有限公司
申请日： 2021-08-27 - 公布日： 2023-09-22 - 主分类号： G16B40/20 文献下载
摘要：插入有特定基因的干细胞治疗剂的基因插入位点分析系统包括：基本信息管理单元，用于管理运行插入有特定基因的干细胞治疗剂的基因插入位点分析系统所需的信息；基因插入位点分析单元，用于管理上述基因插入位点分析系统所需的信息；以及数据库(DB)管理单元，用于管理由上述基本信息管理单元及上述基因插入位点分析单元生成或参照的数据库(DB)。
插入特定基因干细胞治疗分析系统方法

[发明专利]基于片段重叠群的含有重复基因的双面基因组片段填充方法和装置-CN202111310669.7在审
发明人：柳楠;李胜华;朱永琦;崔晓宇;李晓峰;任燕;卞忠勇;李洋 -专利权人：山东建筑大学
申请日： 2021-11-05 - 公布日： 2022-01-04 - 主分类号： G16B20/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种基于片段重叠群的含有重复基因的双面基因组片段填充方法及装置。该方法主要包括以下步骤：计算获得缺失基因集合；对最大缺失基因串分类，将基因元素分为三种类型：n‑Type‑1串、n‑Type‑2串和n‑Type‑3串，其中n为缺失基因串的长度；对最大缺失基因串与重复基因的关系分类，将基因元素与重复基因的关系分为三种类型：无相关、半相关和相关，无相关是指插入串与重复基因不相邻且插入位置与重复基因无涉及，半相关是指插入串与重复基因不相邻且插入位置可能会与重复基因有涉及关系，有无涉及插入位置替代，相关是指插入与重复基因相邻或插入位置与重复基因完全涉及；搜索无相关和半相关类型的插入串，执行无相关和半相关串插入算法；对相关类型串构造辅助图，利用回溯算法和最大匹配算法进行插入。本发明基于片段重叠群进行基因组填充，能够提高填充准确率和完备率，更具有一般性和实用性。
基于片段重叠含有重复基因双面基因组填充方法装置

[发明专利]一种基因工程菌及其制备方法和在生产半胱氨酸中的应用-CN202011500021.1在审
发明人：朱永强;潘梦垚;陈召峰;韦光绪;曾庆宇;吕国锋;陈静;赵初秋;池圣锋;杨芝 -专利权人：浙江新和成股份有限公司;上虞新和成生物化工有限公司;黑龙江新和成生物科技有限公司
申请日： 2020-12-18 - 公布日： 2021-05-18 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明公开了一种基因工程菌及其在生产半胱氨酸中的应用，该基因工程菌包括宿主细胞和目的基因，目的基因插入至游离型质粒中；或同时插入至质粒和基因组中；插入至质粒中的目的基因主要由按顺序连接的trpBA基因和trpB基因构成；插入至基因组中的目的基因为trpBA基因。本发明通过将trpBA基因和trpB基因插入宿主细胞中，得到trpBA基因和trpB基因过表达的基因工程菌，该工程菌能够表达出特定摩尔比例的α亚基和β亚基，从而使酶法合成L‑半胱氨酸的反应中有较高的催化速率和转化率
一种基因工程及其制备方法生产半胱氨酸中的应用

[发明专利]基于第三代基因测序数据的外源插入信息的检测方法和装置-CN202211629203.8有效
发明人：姜亚菲;龚佳震;刘淼;陶琳娜;王静 -专利权人：北京诺禾致源科技股份有限公司
申请日： 2022-12-19 - 公布日： 2023-03-28 - 主分类号： G16B20/20 文献下载
摘要：本发明提供了一种基于第三代基因测序数据的外源插入信息的检测方法和装置，涉及外源信息插入检测技术领域，缓解了现有技术中对于外源信息插入的检测速度慢、准确率低的技术问题。该方法包括：对待检测个体进行三代测序，整合参考基因和外源基因得到整合基因组，将测序结果与整合基因组进行比对，得到确定外源信息插入的第一Reads及插入位点，以及参考基因与外源基因插入片段之间的易位点；基于第一Reads与易位点，准确地检测外源序列的插入信息，包括插入的位点及插入的序列。
基于第三代基因序数插入信息检测方法装置

[发明专利]定点插入和/或敲除真核细胞基因的方法及其专用载体-CN02123654.2无效
发明人：连正兴;李宁 -专利权人：连正兴;李宁
申请日： 2002-11-05 - 公布日： 2004-05-26 - 主分类号： C12N15/63 文献下载
摘要：本发明公开了一种定点插入和/或敲除真核细胞基因的方法及其专用载体，涉及基因工程领域中插入和/或敲除基因的方法。本发明的目的是提供一种在真核细胞中定点插入和/或敲除基因的方法。一种在真核细胞中定点插入和/或敲除基因的方法，是以抑肌素(Myostatin)基因的DNA全序列或片断为目标，与欲插入的基因形成同源重组载体，并与标记基因连接后，转染真核细胞，筛选得到同源重组的转基因阳性细胞利用本发明的方法得到的转基因真核细胞，可以是动物体细胞或生殖细胞。这些细胞可用于进行细胞学、细胞治疗、基因功能、转基因等方面的研究与开发。
定点插入真核细胞基因方法及其专用载体

[发明专利]利用重测序技术快速确定转基因株系插入位点的方法-CN201810038567.6有效
发明人：徐纪明;胡晗;毛文轩;毛传澡 -专利权人：浙江大学
申请日： 2018-01-16 - 公布日： 2021-03-26 - 主分类号： C12Q1/6869 文献下载
摘要：本发明公开了一种利用重测序技术确定转基因株系插入位点的方法，包括以下步骤：1)、提取转基因株系基因组DNA，总量至少2g；2)、进行基因组重测序，数据量至少12G；3)、利用转基因载体T‑DNA序列作为模板，对得到的测序数据进行比对分析，得到插入位点的信息；4)、根据插入位点的信息设计引物，进行PCR验证；从而确定每个转基因株系的插入位点。利用本发明的方法确定转基因株系插入位点具有方法成熟、简单，成功率高的特点，可以广泛应用于转基因株系的插入位点确定。
利用重测序技术快速确定转基因插入方法

[发明专利]基于CRISPR技术对大肠杆菌K4进行基因插入的方法-CN202011384236.1在审
发明人：尹鸿萍;朱岩;王莹 -专利权人：中国药科大学
申请日： 2020-12-01 - 公布日： 2021-02-05 - 主分类号： C12N15/70 文献下载
摘要：本发明公开了基于CRISPR技术对大肠杆菌K4进行基因插入的方法。本发明涉及生物技术基因编辑领域，具体涉及基于CRISPR/Cas9系统的外源基因靶向大肠杆菌中染色体的方法。本发明方法包括：利用导入的λRed同源重组系统和CRISPR系统实现在大肠杆菌K4的LacZ基因中插入靶基因。本发明建立了一种高效、简单的将大肠杆菌传统基因编辑技术与CRISPR系统相结合的靶基因定位插入方法。与现有大肠杆菌K4基因编辑方法相比，本发明提供的方法能够在大肠杆菌中实现高效准确的目的基因插入工作。本发明提供的细菌中基因插入方法操作简便快捷，实验成本较低，尤其适用于高通量基因编辑工作。
基于 crispr 技术大肠杆菌 k4 进行基因插入方法

[发明专利]基于CRISPR技术对大肠杆菌K4进行基因插入的方法-CN202011479939.2在审
发明人：尹鸿萍;朱岩;王莹 -专利权人：中国药科大学
申请日： 2020-12-15 - 公布日： 2021-03-23 - 主分类号： C12N15/70 文献下载
摘要：本发明公开了基于CRISPR技术对大肠杆菌K4进行基因插入的方法。本发明涉及生物技术基因编辑领域，具体涉及基于CRISPR/Cas9系统的外源基因靶向大肠杆菌中染色体的方法。本发明方法包括：利用导入的λRed同源重组系统和CRISPR系统实现在大肠杆菌K4的LacZ基因中插入靶基因。本发明建立了一种高效、简单的将大肠杆菌传统基因编辑技术与CRISPR系统相结合的靶基因定位插入方法。与现有大肠杆菌K4基因编辑方法相比，本发明提供的方法能够在大肠杆菌中实现高效准确的目的基因插入工作。本发明提供的细菌中基因插入方法操作简便快捷，实验成本较低，尤其适用于高通量基因编辑工作。
基于 crispr 技术大肠杆菌 k4 进行基因插入方法

[发明专利]改造的大肠杆菌及其在发酵生产L-缬氨酸中的应用-CN202310784984.6在审
发明人：孟刚;赵春光;魏爱英;苏厚波;张英;张晓琴;毕国东;王攀 -专利权人：北京中科伊品生物科技有限公司
申请日： 2023-06-29 - 公布日： 2023-08-04 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：在生产缬氨酸的大肠杆菌中通过“敲除pflB基因”、“敲除pflB基因和adhE基因”、“敲除pflB基因和adhE基因且敲除ilvE（E）基因同时插入来自枯草芽孢杆菌的ilvE（B）基因”、“敲除pflB基因、adhE基因和thiE基因且敲除ilvE（E）基因同时插入来自枯草芽孢杆菌的ilvE（B）基因”或“敲除pflB基因、adhE基因、thiE基因和mdh基因且敲除ilvE（E）基因同时插入来自枯草芽孢杆菌的ilvE（B）基因”获得的工程菌均可以提高L‑缬氨酸的产量。
改造大肠杆菌及其发酵生产缬氨酸中的应用

[发明专利]一种基因、重组质粒及在提高番茄果实色素积累中的应用-CN201010598551.4无效
发明人：刘永胜;高永峰;李颖楠;刘继恺;唐晓凤;张治国;苗敏 -专利权人：四川大学
申请日： 2010-12-21 - 公布日： 2011-07-13 - 主分类号： C12N15/29 文献下载
摘要：一种基因，它具有序列表中SEQ ID NO：1所示的核苷酸序列。一种真核重组质粒，由序列表中SEQ ID NO：1所示核苷酸序列中的基因片段和真核表达载体构成，所述基因片段是起始密码子下游1135bp至1549bp的核苷酸序列，所述基因片段正向和反向插入真核表达载体，正向插入的基因片段与反向插入的基因片段之间存在有150bp的内含子。制备方法：(1)将上述基因片段正向插入到pSK载体上，再将该基因片段反向插入已含正向插入基因片段的pSK载体；(2)利用限制性内切酶切下pSK载体上含有所述基因片段的部段连接到真核表达载体上。
一种基因重组质粒提高番茄果实色素积累中的应用

[发明专利]基于全基因组测序数据快速鉴定外源插入序列的方法-CN202211715491.9在审
发明人：王露;朱世林;毛伟华;刘泽华 -专利权人：武汉万摩科技有限公司
申请日： 2022-12-29 - 公布日： 2023-05-30 - 主分类号： G16B30/00 文献下载
摘要：本发明提供了一种基于全基因组测序数据快速鉴定外源插入序列的方法，包括如下步骤：测序数据质控，数据初步比对，初步比对结果筛选，二次比对结果评估，同源性检测，初步插入区域检测，精确插入位点鉴定，插入及侧翼序列组装，插入位点影响基因获取，插入位点引物设计。本发明与传统实验检测技术方法相比，耗时短、可重复且转基因插入特征呈现更全面；与其他现有全基因组重测序方法相比更加精确与直观，结果理解更友好，更有利于转基因动植物的安全风险评估，有助于转基因或基因编辑技术的发展与应用
基于基因组序数快速鉴定插入序列方法

[发明专利]用于外源基因定点插入的基因编辑系统和方法-CN202010875673.7在审
发明人：栗凤鹏;曹青;李华顺 -专利权人：阿思科力（苏州）生物科技有限公司
申请日： 2020-08-27 - 公布日： 2022-03-01 - 主分类号： C12N15/113 文献下载
摘要：本发明实施例公开了一种用于外源基因定点插入的基因编辑系统和方法，所述基因编辑系统，包括Cas9、sgRNA和ssDNA，所述Cas9和sgRNA构成RNP复合物，所述sgRNA为外源基因的插入位点，所述ssDNA为外源基因的插入模板。本发明主要利用基因编辑技术，通过ssDNA利用作为外源基因的插入模板，在sgRNA的配合下，成功在AAVS1位点实现4.5kb(aAPC1：EF1a‑CD19‑CD86‑CD64‑PolyA)的定点敲入；AAVS1敲入外源基因片段具有稳定表达、不影响其他基因转录的优点；从而使改造后的细胞遗传背景更为简单和统一，排除插入位点和拷贝数对其它基因功能的影响。
用于基因定点插入编辑系统方法

[发明专利]抗虫耐除草剂玉米转化事件-CN201810140851.4有效
发明人：刘博林;佘秋明;谭超;许洁婷;王绪霞;田裴秀子;聂东明;韩宇;马崇烈;章旺根 -专利权人：中国种子集团有限公司
申请日： 2018-02-11 - 公布日： 2022-11-18 - 主分类号： C12N15/82 文献下载
摘要：本申请以玉米自交系祥249为受体，经过农杆菌介导的遗传转化，得到在特定基因组位点插入外源基因插入物的玉米植株，其中外源基因插入物包含以下三个基因：抗虫基因、抗草铵膦基因和抗草甘膦基因。本申请所获得的转化事件中，所插入的外源基因位于玉米基因组的非功能位点，不影响受体植物自身其他基因的表达，在使转基因玉米植物获得抗虫和耐除草剂特性的同时，保持了其良好的农艺性状。
抗虫耐除草剂玉米转化事件

[发明专利]一种牛SEPT7基因插入/缺失突变的检测方法及其应用-CN202110304062.1有效
发明人：蓝康澍;李洁;宋恩亮;王勇胜;潘传英;张思欢;姜富贵;费攀锋;田欣;雷柞;高龙鑫;沈成龙;牛至寒 -专利权人：西北农林科技大学
申请日： 2021-03-22 - 公布日： 2022-06-24 - 主分类号： C12Q1/6888 文献下载
摘要：本发明公开了一种牛SEPT7基因插入/缺失突变的检测方法及其应用。以牛全基因组DNA为模板，通过PCR扩增牛SEPT7基因部分片段，应用琼脂糖凝胶电泳鉴定个体SEPT7基因9‑bp插入突变的基因型。根据性状关联分析结果，SEPT7基因9‑bp插入突变位点的基因型与母牛的繁殖性状显著相关。因此，SEPT7基因9‑bp插入突变位点可用于母牛繁殖性状的早期标记辅助选择，以加快建立遗传资源优良的牛群体。
种牛 sept7 基因插入缺失突变检测方法及其应用

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