本发明公开了一种基于高响应葡萄糖适配体的电化学传感器,所述检测传感器包括电极,所述电极外附有葡萄糖检测核酸适配体和巯基己醇单分子层;所述葡萄糖检测核酸适配体包括能与葡萄糖进行特异性结合的人工合成核苷酸序列,以及修饰基团和亚甲基蓝基团,所述修饰基团为HO‑C6‑S‑S‑C6‑;所述能与葡萄糖进行特异性结合的人工合成核苷酸序列为序列SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3或SEQ本发明采用核酸适配体作为识别基元,能在全血环境中高灵敏度地检测葡萄糖,不需要任何酶的参与,检测过程十分便捷。
本发明涉及末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)的变体,该变体(i)包含如SEQ ID N°2中列出的氨基酸序列或功能等同序列,以及在对应于残基C302的位置处的至少一个氨基酸取代或功能等同残基,其中该位置参考SEQ ID N°1中列出的氨基酸序列编号,(ii)能够在没有模板的情况下合成核酸片段,以及(iii)能够将修饰的核苷酸掺入到核酸片段中。
本发明涉及末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)变体,每个TdT变体(i)具有选自SEQ ID NO:10‑35的氨基酸序列,或功能等效的序列,所述序列在对应于残基C302(对于SEQ ID NO:1)或(分别在SEQ ID NO:10‑35中)功能等效的残基的位置处具有至少一个氨基酸取代,(ii)能够在无模板的情况下合成核酸片段和(iii)能够使3'‑O‑修饰的核苷酸掺入核酸片段中。