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[发明专利]小RNA文库测序过程中去除接头自连产物的方法-CN202111348934.0在审
发明人：马士清;刘军;陈一友 -专利权人：杭州诺辉健康科技有限公司
申请日： 2021-11-15 - 公布日： 2023-05-16 - 主分类号： C12Q1/6806 文献下载
摘要：具体而言，提供了一种对DNA双链和DNA单链进行选择性切割的方法，所述方法包括混合DNA内切酶和所述DNA双链和DNA单链的步骤：其中，DNA双链中的酶切位点位于DNA:DNA配对区；DNA内切酶可以识别DNA双链中的酶切位点并进行切割；任选地，所述DNA双链和DNA单链产生于RNA测序文库的构建过程中；任选地，所述DNA双链为RNA测序文库构建过程中使用的5’接头和3’接头形成的自连产物。
rna 文库过程去除接头产物方法

[发明专利]建构环状模板和检测DNA分子的方法-CN201710522482.0在审
发明人：吴梦楚;田孟崇 -专利权人： PGI股份有限公司
申请日： 2017-06-30 - 公布日： 2018-01-09 - 主分类号： C12N15/10 文献下载
摘要：本发明提供一种建构环状模板的方法，其包含制备部分双链线性DNA分子，且将部分双链线性DNA分子与能够分子内连接单链DNA分子的连接酶反应以产生部分双链环状DNA分子。检测DNA分子的方法包含以下步骤。用探针分离靶DNA分子以形成部分双链线性DNA分子。将部分双链线性DNA分子与能够分子内连接单链DNA分子的连接酶反应以产生部分双链环状DNA分子。通过使用探针作为引物来进行部分双链环状DNA分子的环状测序。
建构环状模板检测 dna 分子方法

[发明专利]试剂盒及其在核酸测序中的用途-CN201480081856.4有效
发明人：耿春雨;于竞;祝珍珍;章文蔚;李计广;龚梅花;蒋慧;贺玲瑜 -专利权人：深圳华大智造科技有限公司
申请日： 2014-09-12 - 公布日： 2020-11-03 - 主分类号： C12N15/10 文献下载
摘要：提供了一种试剂盒、一种基于双链DNA制备环状双链DNA的方法、一种制备双链核酸融合分子的方法、一种基于双链DNA片段构建测序文库的方法、一种核酸测序方法、一种基于双链DNA制备环状双链DNA的装置、一种基于双链DNA片段构建测序文库的设备以及一种核酸测序系统。
试剂盒及其核酸中的用途

[发明专利]一种等温解开双链DNA及制备单链DNA的方法-CN201610987745.0有效
发明人：唐卓;陈刚毅 -专利权人：中国科学院成都生物研究所
申请日： 2016-11-10 - 公布日： 2020-05-08 - 主分类号： C12N15/10 文献下载
摘要：本发明属于分子生物学技术领域，提供一种等温解开双链DNA的方法以及基于该方法制备单链DNA的方法。等温解开双链DNA的技术方案为利用重组酶结合单链DNA探针形成复合物，复合物识别双链DNA中与单链DNA探针同源的序列并侵入双链DNA，从而实现双链DNA的等温开链，随后单链DNA探针和双链中一条链互补配对，而单链结合蛋白结合另一条链稳定开链结构。基于该方案及单链DNA探针3’‑末端可以被连接酶和聚合酶等酶识别的特性，本发明还提出了制备单链DNA的方案，并详细介绍了通过连接酶或延伸酶制备单链DNA的方案。以上技术方案均可在等温条件下完成，且无需ATP循环系统，甚至ATP可被dATP替代，所用酶来源广泛、易于获得，为等温技术以双链DNA作为研究对象提供了一个通用平台。
一种等温解开 dna 制备方法

[发明专利]一种用于目标DNA富集的试剂盒、制备方法和应用-CN201811584853.9在审
发明人：王永利;宋卓 -专利权人：人和未来生物科技（长沙）有限公司
申请日： 2018-12-24 - 公布日： 2019-02-19 - 主分类号： C12Q1/6806 文献下载
摘要：本申请公开了一种用于目标DNA富集的试剂盒、制备方法和应用。本申请的试剂盒，包括双链DNA探针和同源重组酶；双链DNA探针带有生物素标记；同源重组酶用于与待测样本的单链DNA结合，并促进双链DNA探针与待测样本中的同源性单链DNA结合。本申请用于目标DNA富集的试剂盒，采用双链DNA探针，利用同源重组酶的靶标识别作用，能够靶向富集待测样本中的单链目标DNA；并且基于同源重组酶的双链DNA探针同源性单链目标DNA识别和富集，效率高、均匀性和稳定性好，特别适合于多靶标DNA或者拷贝数较低的目标DNA的富集。本申请的试剂盒中，其核心组分的双链DNA探针制备方法简单、易操作，且成本低。
双链DNA探针目标DNA 富集试剂盒同源重组酶待测样本制备方法和应用单链DNA 同源性申请单链生物素标记靶标DNA 均匀性拷贝数重组酶靶标靶向制备

[发明专利]扩增核酸序列的方法-CN201680054169.2有效
发明人：陈崇毅;邢栋;X·S·谢 -专利权人：哈佛学院董事及会员团体
申请日： 2016-07-15 - 公布日： 2022-08-19 - 主分类号： C12Q1/6865 文献下载
摘要：提供了用于核酸扩增的方法，包括使双链核酸和与转座子DNA结合的转座酶接触，其中转座子DNA包括转座酶结合位点和RNA聚合酶启动子序列，其中转座酶/转座子DNA复合物结合沿双链核酸分布的靶位置并且将双链核酸切割成多个双链片段，各双链片段具有结合双链片段各5'端的转座子DNA，沿着转座子DNA延伸双链片段以制备在各末端具有双链RNA聚合酶启动子序列的双链延伸产物，使双链延伸产物与RNA聚合酶接触以制备各双链延伸产物的多个RNA转录物，将RNA转录物逆转录成单链拷贝DNA，形成针对单链拷贝DNA的互补链，以形成对应各双链片段的多个双链DNA扩增子。
扩增核酸序列方法

[发明专利]双链DNA抗原、其制备方法、包含其的试剂、试剂盒及应用-CN201810127235.5有效
发明人：饶微;袁锦云;张云;孙志成;易昊禹;陈顺利 -专利权人：深圳市新产业生物医学工程股份有限公司
申请日： 2018-02-08 - 公布日： 2020-09-11 - 主分类号： G01N33/68 文献下载
摘要：本发明提供了一种双链DNA抗原、其制备方法、包含其的试剂、试剂盒及应用。该制备方法包括提取双链DNA；采用蛋白酶及RNA酶去除双链DNA中的组蛋白和RNA成分得到第一纯化DNA；将第一纯化DNA剪切成500～2000bp的片段得到剪切DNA；采用核酸酶S1、外切核酸酶I和去甲基化酶消除剪切DNA中的单链和甲基化修饰的DNA分子得到第二纯化DNA；以及对第二纯化DNA进行纯化回收得到双链DNA抗原。采用各种酶对所提取的双链DNA中可能存在的蛋白、RNA、操作过程中产生的单链DNA以及修饰过的DNA分子进行降解消化，使得所得双链DNA抗原的纯度相对更高，因而使检测结果特异性高更准确。
双链 dna 抗原制备方法包含试剂试剂盒应用

[发明专利]一种DNA长度可控片段化方法及其在构建文库中的应用-CN201810239733.9在审
发明人：吴雅坤;林振华 -专利权人：苏州泰康吉安仪器科技有限公司
申请日： 2018-03-22 - 公布日： 2018-09-04 - 主分类号： C12N15/10 文献下载
摘要：本发明公开了一种DNA长度可控片段化方法及其在构建文库中的应用，可用于cDNA与双链DNA的可控片段化，及其文库的构建。在单链cDNA分子片段化中，通过向合成与RNA模板互补的cDNA链的反转录反应中加入dUTP，得到含有dU碱基的cDNA；在双链DNA分子的片段化中，通过向合成双链DNA的PCR反应中加入dUTP，得到含有dU碱基的双链DNA；在所述cDNA与双链DNA上的dU碱基处进行酶处理，断裂DNA分子，生成片段化的cDNA与双链DNA；将片段化的cDNA与双链DNA进行末端补平处理。通过上述方式，本发明能够制备长度可调的片段化DNA，便于提高cDNA与双链DNA文库的建库效率，同时能消除长片段DNA不能有效测通的缺陷，并为长片段DNA序列的拼接提供校正序列。本方法可用于基于DNA扩增反应的测序文库构建。
双链DNA 片段化构建文库可控长片段DNA 碱基可用双链DNA分子片段化DNA 测序文库长度可调单链cDNA 分子片段合成双链断裂DNA 反转录碱基处酶处理补平建库拼接制备校正应用合成

[发明专利]一种响应双链核酸的DNA分子电路及其使用方法-CN202111239968.6在审
发明人：苏昕;陈婧;李俊洁;付胜男 -专利权人：北京化工大学
申请日： 2021-10-25 - 公布日： 2023-04-28 - 主分类号： C12Q1/682 文献下载
摘要：本发明提供一种信号识别传感元件以及以之为基础构建的响应双链核酸的DNA分子电路。本发明所述信号识别传感元件包含名称为单链核酸输出的一条单链DNA和名称为单链DNA探针的一条单链DNA。本发明的响应双链核酸的DNA分子电路利用核酸外切酶驱动目标双链DNA置换出核酸外切酶模块中的单链核酸输出，游离的单链核酸输出被生物传感器响应。本发明响应双链核酸的DNA分子电路可在37℃的环境下直接响应双链核酸，扩展了DNA分子电路底物库，有效提高了DNA分子电路的响应和处理信息功能。
一种响应核酸 dna 分子电路及其使用方法

[发明专利]一种DNA连接酶的酶活测定方法-CN202110480362.5在审
发明人：翟琦巍;李升建;周靖晗;杨小丽 -专利权人：上海碧云天生物技术有限公司
申请日： 2021-04-30 - 公布日： 2021-07-02 - 主分类号： C12Q1/48 文献下载
摘要：本发明提供了一种DNA连接酶的酶活测定方法，包括：(1)提供RNA单链及与之互补的受体DNA单链和供体DNA单链；(2)退火获得DNA/RNA杂合双链，受体DNA单链的3’端羟基与供体DNA单链的5’端磷酸基团相邻但存在缺刻，该杂合双链的荧光基团产生荧光；(3)以待测DNA连接酶处理DNA/RNA杂合双链，获得缺刻处连接的完整DNA/RNA杂合双链，该杂合双链的荧光基团保持荧光；(4)对完整DNA/RNA杂合双链直接或加热变性后以核糖核酸酶消化，留下DNA连接产物，根据其荧光强度进行定量，确定待测DNA连接酶酶活。
一种 dna 连接酶测定方法

[发明专利]在双链DNA片段末端产生预定粘性末端的方法-CN201210057073.5有效
发明人：陈威华;赵国屏 -专利权人：中国科学院上海生命科学研究院;国家人类基因组南方研究中心
申请日： 2012-03-06 - 公布日： 2013-09-18 - 主分类号： C12N15/10 文献下载
摘要：本发明涉及在双链DNA片段末端产生预定粘性末端的方法。揭示了一种新的在双链DNA片段末端产生预定粘性末端的方法，所述方法通过构造修饰状态与双链DNA内部不同的含可切割酶切识别位点的双链DNA末端，可以特异性地将双链DNA的末端转变成预设的粘性末端，不需要考虑DNA内部的序列组成和酶切位点组成。利用本发明的方法，可方便、快捷、准确地获得预定的粘性末端，从而实现长链DNA连接，且不引入多余的DNA序列。
dna 片段末端产生预定粘性方法

[发明专利]一种高降解DNA测序文库的构建方法及其应用-CN201810870019.X在审
发明人：王进科;武剑 -专利权人：东南大学
申请日： 2018-08-02 - 公布日： 2018-12-21 - 主分类号： C12Q1/6806 文献下载
摘要：本发明公开了一种高降解DNA测序文库的构建方法及其应用，该构建方法是先将双链DNA 1变性，在得到的单链DNA 1的3′端连接单链接头，再用DNA聚合酶延伸连接单链接头的单链DNA 2使其成为双链DNA 2，然后向双链DNA 2无单链接头的一端连接标签T接头，成为双链DNA 3，最后用PCR扩增两端连接接头的双链DNA 3使其成为可测序文库。该方法极大的简化了基于ssDNA的NGS文库制备的过程，实现了低成本、高效率、高通量和低偏倚的高降解DNA测序文库构建，可用于高降解DNA片段测序分析。
双链DNA 测序文库构建降解单链单链DNA 测序分析连接接头一端连接低成本高通量高效率变性可用偏倚制备文库应用标签延伸

[发明专利]操纵双链DNA末端的方法-CN202080051846.1在审
发明人：林继伟;王洪琦 -专利权人：华大青兰生物科技（无锡）有限公司
申请日： 2020-07-13 - 公布日： 2022-03-01 - 主分类号： C12N15/10 文献下载
摘要：操纵双链DNA末端的方法，其原理是利用限制性缺刻酶在双链DNA的一条链上先产生一个或多个缺刻，然后利用寡核苷酸适配体结合同一个或不同的限制性缺刻酶在双链DNA的另一条链上产生切割，切割的位置通过寡核苷酸适配体的设计确定，最终切断目的双链DNA，并在切割处产生各种长度的5’突出末端、各种长度的3’突出末端或平末端。利用本发明的方法产生的双链DNA末端的碱基可以随意设计，这种末端可用于双链DNA拼接，特别是双链DNA的无缝拼接。
操纵 dna 末端方法

[发明专利]与RNA对应的双链DNA的合成方法以及扩增方法-CN201080020926.7无效
发明人：林田幸信 -专利权人：和光纯药工业株式会社
申请日： 2010-05-11 - 公布日： 2012-04-25 - 主分类号： C12N15/09 文献下载
摘要：本发明提供一种价格低廉、操作简便，由特定RNA合成对应的双链DNA的方法以及扩增该双链DNA的方法。含有与具有polyA的模板RNA相对应的碱基序列的双链DNA的合成方法，其特征在于，工序1为使用5’末端添加已知序列的DNA片段的寡聚(dT)引物，对具有polyA的模板RNA进行逆转录反应，得到单链DNA；工序2为在不具有3’→5’核酸外切酶活性和链置换活性的聚合酶的存在下，使用5’末端添加已知序列的DNA片段的随机引物，将工序1中得到的单链DNA进行双链化反应，得到双链DNA。本发明还提供含有与具有polyA的模板RNA相对应的碱基序列的双链DNA的扩增方法，其特征在于，工序3为将得到的双链DNA进一步进行PCR反应。
rna 对应 dna 合成方法以及扩增

[发明专利]通过三螺旋相互作用纯化与检测双链DNA靶序列的方法-CN02807063.1无效
发明人： F·布兰克;B·卡姆龙 -专利权人：甘瑟尔股份有限公司
申请日： 2002-03-25 - 公布日： 2004-05-19 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：本发明涉及新的双链DNA靶序列，该序列能够与第三链相互作用，生成稳定的三螺旋。本发明还涉及纯化双链DNA分子的方法，根据该方法，让含有所述DNA分子的溶液与第三链DNA接触，该第三链能够通过杂交与所述DNA分子所带的双链DNA靶序列生成三螺旋结构。
通过螺旋相互作用纯化检测 dna 序列方法

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