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[发明专利]双重RT-PCR检测花生条纹病毒和黄瓜花叶病毒的方法-CN201110417063.3无效
发明人：谢宏峰;迟玉成;许曼琳;陈蕾;樊堂群;许婷婷;吴菊香 -专利权人：山东省花生研究所
申请日： 2011-12-01 - 公布日： 2012-07-11 - 主分类号： C12Q1/70 文献下载
摘要：本发明公开了双重RT-PCR检测花生条纹病毒和黄瓜花叶病毒的方法，其中，包括如下步骤：a.总RNA提取和cDNA第一链合成；b.引物的设计；c.双重RT-PCR扩增；d.同时检测PStV和CMV的双重RT-PCR体系的建立；f.单一RT-PCR扩增；g.双重RT-PCR与单一RT-PCR的灵敏性比较；h.双重RT-PCR检测的特异性的检测。
双重 rt pcr 检测花生条纹病毒黄瓜花叶病毒方法

[发明专利]一种可同时鉴别TGEV和PEDV病毒的双重RT-PCR方法-CN201510411851.X在审
发明人：宋磊;吕茂杰;杨保收;付旭彬;梁武 -专利权人：天津瑞普生物技术股份有限公司
申请日： 2015-07-14 - 公布日： 2015-12-16 - 主分类号： C12Q1/70 文献下载
摘要：本发明提供了一种可同时鉴别TGEV和PEDV病毒的双重RT-PCR方法，该方法通过对TGEV S蛋白基因和PEDV S蛋白基因序列进行比对，分别选择其保守序列设计引物，保证病原鉴定的准确性和引物的特异性另外，通过对RT-PCR反应体系和反应条件的优化，得到特异性、敏感性较高的PEDV和TGEV的双重RT-PCR检测方法。经最终实验证实，本发明的双重RT-PCR方法，不仅TGEV和PEDV的单项RT-PCR敏感性高，分别能达到1.51ng/μL和1.82ng/μL，TGEV和PEDV的双重RT-PCR敏感性也极其显著，最低可检测到
一种同时鉴别 tgev pedv 病毒双重 rt pcr 方法

[发明专利]同时检测多种辣椒病毒的四重RT-PCR检测引物及方法-CN201510689135.8在审
发明人：唐前君;戴良英;刘湘宁;刘茂炎;李迅;刘双清;李魏 -专利权人：湖南农业大学
申请日： 2015-10-22 - 公布日： 2015-12-23 - 主分类号： C12Q1/70 文献下载
摘要：本发明公开了一种同时检测多种辣椒病毒的四重RT-PCR检测引物及方法，本方法采用如SEQ ID NO：1-SEQ ID NO：8所示的四对引物，一次RT-PCR可同时检测辣椒4种病毒：蚕豆萎蔫病毒2号(与目前单重RT-PCR和双重RT-PCR检测方法相比，本发明方法用一个RT-PCR可同时检测辣椒4种病毒，检测的病毒种类增多，检测效率大为提高，检测成本显著降低。
同时检测多种辣椒病毒 rt pcr 引物方法

[发明专利]犬瘟热病毒与犬副流感病毒双重RT-PCR检测及其专用引物-CN201310694619.2有效
发明人：王贵升;田夫林;王金宝;尹斐斐;陈静;徐鸿;李玉杰 -专利权人：山东省动物疫病预防与控制中心
申请日： 2014-01-14 - 公布日： 2014-03-26 - 主分类号： C12Q1/70 文献下载
摘要：本发明公开了一种犬瘟热病毒和犬副流感病毒的双重RT-PCR检测及其专用引物。本发明的实验证明，本发明提供的犬瘟热病毒和犬副流感病毒的双重RT-PCR检测专用引物敏感性好，最低能检测到RNA含量约为1×10-3ng/µL，其灵敏度远远高于1ng/µL的灵敏度。本发明的双重RT-PCR检测方法，简便、快速、经济、高效，具有很好的应用前景。
犬瘟热病毒流感病毒双重 rt pcr 检测及其专用引物

[发明专利]神经坏死病毒的RT-PCR检测方法-CN201110288027.1无效
发明人：陈新华;敖敬群;母尹楠 -专利权人：国家海洋局第三海洋研究所
申请日： 2011-09-26 - 公布日： 2012-01-11 - 主分类号： C12Q1/70 文献下载
摘要：神经坏死病毒的RT-PCR检测方法，涉及病毒的检测方法。提供神经坏死病毒的RT-PCR检测方法、神经坏死病毒的RT-PCR检测试剂盒及其制备方法。神经坏死病毒的RT-PCR检测方法：RT-PCR引物设计；含有检测目的片段重组质粒pSP-NNV的构建和作为阳性对照的小RNA片段的制备；引物的特异性实验和灵敏度检测实验；回收率实验和方法有效性实验。试剂盒设有盒体和检测试剂，检测试剂设有裂解液、吸附液、洗涤液、重蒸水、RT-PCR混合反应液、NNV-PCR反应液、阳性对照、阴性对照、RNA提取和RT反应管。
神经坏死病毒 rt pcr 检测方法

[发明专利]一种同步检测百合隐症病毒、斑驳病毒和黄瓜花叶病毒的方法-CN201610210177.3在审
发明人：张玉宝;王亚军;刘维;谢忠奎;王若愚;杨果;郭志鸿 -专利权人：中国科学院寒区旱区环境与工程研究所
申请日： 2016-04-07 - 公布日： 2016-06-22 - 主分类号： C12Q1/70 文献下载
摘要：本发明提供了一种免疫捕获三重RT-PCR同步检测百合隐症病毒、斑驳病毒和黄瓜花叶病毒的方法，其步骤包括在同一个PCR反应管中用LSV、LMoV和CMV的多克隆抗体特异性捕获LSV、LMoV和CMV粒子、利用LSV、LMoV和CMV的特异性引物进行三重反转录聚合酶链式反应RT-PCR、琼脂糖凝胶电泳检测目的片段；该方法将ELISA和RT-PCR结合，对现有的免疫捕获RT-PCR进行了改进，实现了用免疫捕获RT-PCR同步检测三种百合病毒LSV、LMoV和CMV，从而完善了免疫捕获RT-PCR技术。
一种同步检测百合病毒斑驳黄瓜花叶病毒方法

[发明专利]一种直接检测A+B型流感病毒的实时荧光RT-PCR方法-CN201410438234.4无效
发明人：于洪波;陈善光;欧阳辉;吴清华 -专利权人：深圳市梓健生物科技有限公司
申请日： 2014-08-29 - 公布日： 2014-11-26 - 主分类号： C12Q1/70 文献下载
摘要：本发明提供了一种直接检测A型、B型流感病毒的实时荧光RT-PCR试剂盒，所述试剂盒包含有RT-PCR反应液，RT-PCR反应液为具有流感病毒裂解功能的RT-PCR反应液。在本发明中采用具有A型和B型流感病毒裂解活性的RT-PCR反应液进行扩增，反应液直接将A型和B型流感病毒裂解之后使病毒RNA释放出来，那么便可以直接进行RT-PCR过程；因此可以不需要在扩增之前提取RNA样本后再进行PCR的过程大大缩减了时间，并且大大降低了病毒RNA的降解程度，大大提升诊断的准确性。
一种直接检测流感病毒实时荧光 rt pcr 方法

[发明专利]一种快速鉴别1型和3型鸭甲肝病毒的双重荧光定量方法-CN201410317515.4在审
发明人：姜世金;林少莉;张瑞华 -专利权人：山东农业大学
申请日： 2014-07-04 - 公布日： 2014-09-17 - 主分类号： C12Q1/70 文献下载
摘要：本发明提供了一种检测1型和3型鸭甲肝病毒的双重荧光定量RT-PCR特异性引物，是对GenBank上已发表的DHAV-1、DHAV-3的序列进行比对，在两种病毒基因序列的保守但相互之间差异又较大的区域，分别设计一对针对1的特异性检测引物SEQ1、SEQ2，一条Taqman探针Probe1；一对针对DHAV-3的特异性检测引物SEQ3、SEQ4，一条Taqman探针Probe2；确定了针对DHAV-1和DHAV-3的双重荧光定量RT-PCR的特异性引物及Taqman探针浓度；利用该组引物建立的双重荧光定量RT-PCR检测方法，特异性好、灵敏度高，可以用于1型和3型鸭甲肝病毒的快速血清型鉴定和实时定量分析。
一种快速鉴别甲肝病毒双重荧光定量方法

[发明专利]一种快速鉴定鸭甲肝病毒血清型的双重RT-PCR方法-CN201310036594.7无效
发明人：姜世金;陈琳琳 -专利权人：山东农业大学
申请日： 2013-01-30 - 公布日： 2013-04-24 - 主分类号： C12Q1/70 文献下载
摘要：本发明涉及一种快速鉴定鸭甲肝病毒血清型的双重RT-PCR方法，是分别合成针对鸭甲肝病毒1型特异性引物SEQ1和SEQ2和针对鸭甲肝病毒3型特异性引物SEQ3和SEQ4，以待检样品RNA为模板，以SEQ1和SEQ3为引物反转录获得病毒cDNA，以上述两对引物为双重引物，以病毒cDNA为模板，在同一反应体系中进行PCR反应，可同时完成对鸭甲肝病毒1型和鸭甲肝病毒3型的快速鉴定。本发明根据RT-PCR技术原理，根据鸭甲肝病毒基因型与血清型相对应以及我国大陆地区只有两种血清型鸭甲肝病毒的特点，建立了双重RT-PCR检测方法，其简单、快速、特异性好、灵敏度高，可以用于1型和3型鸭甲肝病毒的快速血清型鉴定
一种快速鉴定甲肝病毒血清双重 rt pcr 方法

[发明专利]草莓超低温疗法脱毒再生苗病原体检测的方法-CN201410784226.5无效
发明人：罗娅;汤浩茹;邱静;王小蓉;张勇;陈清;孙勃;邓群仙;李雁翎;田钰 -专利权人：四川农业大学
申请日： 2014-12-16 - 公布日： 2015-04-01 - 主分类号： C12Q1/70 文献下载
摘要：本发明公开了一种草莓超低温疗法脱毒再生苗病原体检测的方法，具体包括如下步骤：(1)田间草莓苗提取总RNA：(2)总RNA反转录为cDNA(3)设计四种病毒引物；(4)单一RT-PCR检测田间苗；(5)多重RT-PCR病毒检测体系：本发明在利用单一RT-PCR检测SVBV、SMYEV、SMoV和SCV的基础上，通过优化影响多重RT-PCR的因子，建立起多重RT-PCR检测SVBV、SMYEV、SMoV和SCV
草莓超低温疗法脱毒再生病原体检测方法

[发明专利]禽流感病毒N9型RT-PCR检测试剂盒及检测方法-CN201310176317.6有效
发明人：陈直平;张严峻;李辉 -专利权人：浙江省疾病预防控制中心
申请日： 2013-05-10 - 公布日： 2013-08-21 - 主分类号： C12Q1/70 文献下载
摘要：本发明涉及禽流感病毒N9型RT-PCR检测试剂盒及检测方法。目的是提供的检测试剂盒应具有使用方便、检测准确的特点，提供的方法应具有检测准确性高、检测简单方便的特点。技术方案是：一种禽流感病毒N9型的荧光定量RT-PCR检测试剂盒，包括脱氧三磷酸核苷、MgCl2、RT-PCR缓冲液、流感病毒N9基因标准品、RNA酶抑制剂、MMLV逆转录酶以及DNA聚合酶；其特征在于荧光定量RT-PCR检测试剂盒还包括上游引物、下游引物和特异性探针；一种禽流感病毒N9型的荧光定量RT-PCR检测方法，按以下步骤进行：（1）提取RNA；（2）进行RT-PCR反应；（3）对RT-PCR反应产物进行荧光检测
禽流感病毒 n9 rt pcr 检测试剂盒方法

[发明专利]禽流感病毒H7型RT-PCR检测试剂盒及检测方法-CN201310175739.1无效
发明人：夏时畅;张严峻;李辉 -专利权人：浙江省疾病预防控制中心
申请日： 2013-05-10 - 公布日： 2013-09-04 - 主分类号： C12Q1/70 文献下载
摘要：本发明涉及禽流感病毒H7型RT-PCR检测试剂盒及检测方法。目的是提供的检测试剂盒应具有使用方便、检测准确的特点，提供的方法应具有检测准确性高、检测简单方便的特点。技术方案是：禽流感病毒H7型荧光定量RT-PCR检测试剂盒，包括脱氧三磷酸核苷、MgCl2、RT-PCR缓冲液、禽流感病毒H7基因标准品、RNA酶抑制剂、MMLV逆转录酶以及DNA聚合酶；其特征在于荧光定量RT-PCR检测试剂盒还包括上游引物、下游引物和特异性探针；一种禽流感病毒H7型荧光定量RT-PCR检测方法，按以下步骤进行：（1）提取样品RNA；（2）进行RT-PCR反应；（3）对RT-PCR反应产物进行荧光检测
禽流感病毒 h7 rt pcr 检测试剂盒方法

[发明专利]同时检测A、B型流感病毒的实时荧光定量检测方法及试剂盒-CN200510034834.5无效
发明人：程小雯 -专利权人：程小雯
申请日： 2005-05-20 - 公布日： 2006-11-22 - 主分类号： G01N21/76 文献下载
摘要：型流感病毒的实时荧光定量检测方法及试剂盒，针对A型、B型流感病毒保守序列的引物及相应探针不同DNA序列，分别建立和优化包括引物、探针、酶、寡聚核苷酸和镁离子的A型、B型定量反应体系和反应条件，检测并建立标准曲线，试剂盒包括：RT－PCR反应缓冲液、Taq酶、RT－PCR酶、RT－PCR酶稀释液、DEPC水、阳性对照、阴性对照。解决了双重荧光定量PCR检测体系等问题，具有操作简单、可定量、污染少、检测速度快等优点，可同时检测A、B型流感病毒，检出病毒的最小量达10^－5TCID50，可广泛用于医学和农业等领域
同时检测流感病毒实时荧光定量方法试剂盒

[发明专利]用于辛德比斯病毒荧光RT-PCR检测的引物和LNA探针及其试剂盒-CN201510172263.5在审
发明人：洪烨;郑夔;戴俊;袁帅;师永霞;黄吉城 -专利权人：广东出入境检验检疫局检验检疫技术中心
申请日： 2015-04-13 - 公布日： 2015-06-24 - 主分类号： C12Q1/70 文献下载
摘要：本发明公开了一种用于辛德比斯病毒荧光RT-PCR检测的引物和LNA探针及其试剂盒。本发明的用于辛德比斯病毒荧光RT-PCR检测的引物，序列如SEQ ID NO：1-2所示，探针序列如SEQ ID NO：3所示。本发明的试剂盒，包括无RNA酶的灭菌双蒸水、RT-PCR缓冲液、RT-PCR酶混合液、阳性对照模板、阴性对照模板，还包括引物和LNA探针，所述引物的序列如SEQ ID NO：1-2所示；所述探针的序列如本发明为辛德比斯病毒的实时荧光RT-PCR检测，特别是为国境口岸人群及蚊类携带辛德比斯病毒的实时荧光RT-PCR检测提供了灵敏特异快速简便的检测方法。
用于德比病毒荧光 rt pcr 检测引物 lna 探针及其试剂盒

[发明专利]猪繁殖与呼吸综合症和猪乙型脑炎双重一步法RT-PCR诊断试剂盒-CN201310181721.2有效
发明人：余波;冉懋韬;谭诗文;史开志 -专利权人：贵州省畜牧兽医研究所
申请日： 2013-05-17 - 公布日： 2013-07-24 - 主分类号： C12Q1/70 文献下载
摘要：本发明公开了一种猪繁殖与呼吸综合症和猪乙型脑炎双重一步法RT-PCR诊断试剂盒，包括100µL DL2000、20µL RT-PCR一步法酶、250µL酶缓冲液、300µL RNase Free dH2OGenBank中的猪繁殖与呼吸综合症病毒（PRRSV）ORF7 N基因、猪乙型脑炎病毒（JEV）NS1基因序列，设计了2对引物，通过反应条件的优化，成功研制了检测猪繁殖与呼吸综合征病毒和猪乙型脑炎病毒的双重一步法RT-PCR诊断试剂盒，它对这两种病毒具有敏感性、特异性。
繁殖呼吸综合症猪乙型脑炎双重一步法 rt pcr 诊断试剂盒

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