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[发明专利]储存宫内膜干细胞的方法-CN201110085328.4无效
发明人：项春生 -专利权人：杭州易文赛生物技术有限公司
申请日： 2011-04-06 - 公布日： 2011-08-17 - 主分类号： C12N5/0775 文献下载
摘要：本发明公开了一种储存宫内膜干细胞的方法，依次包括以下步骤：1）准备采集套装和配制培养基；2）经血收集；3）无菌检查；4）宫内膜干细胞分离培养：将步骤2）所得的采集管1内的混合液先进行过滤，然后采用密度梯度离心法，收集单个核细胞；将上述所得的单个核细胞接种于Chang完全培养基中，单个核细胞的接种密度为1*105~1*106/ml，置于37℃、饱和湿度、体积分数为5%的CO2培养箱中进行培养；5）细胞扩增和纯化；6）细胞冻存。采用本发明的方法能获得纯度较高、数量较大的目标细胞即宫内膜干细胞。
储存宫内干细胞方法

[发明专利]他克莫司单个核细胞内药物浓度的检测方法及应用-CN202011371323.3在审
发明人：李壹;徐欢;戴鑫华;白杨娟;邹远高;张君龙;牛倩;蔡蓓 -专利权人：四川大学华西医院
申请日： 2020-11-30 - 公布日： 2021-03-16 - 主分类号： G01N30/02 文献下载
摘要：本发明涉及生物医学领域，公开了他克莫司单个核细胞内药物浓度的检测方法，包括提取单个核细胞、UPLC条件、MS/MS条件、配制标准品、制备标准曲线和检测单个核细胞内他克莫司的浓度；本发明还提供了上述方法在肾移植术后管理产品中的应用本发明实现了对外周血单个核细胞TAC浓度的检测，相比全血谷浓度检测，本发明的检测方向和方法能够更加准确真实的反映肾移植受者体内TAC治疗药物的效果，且检测方法简单、检测快速、可实现自动化，检测结果更加准确
克莫司单个细胞内药物浓度检测方法应用

[发明专利]用于对单个细胞所具有的细胞毒性进行评价的组合物以及方法-CN201510140107.0在审
发明人： J.C.洛夫;N.范阮达若詹;B.居尔格;B.沃克 -专利权人：麻省理工学院;综合医院公司附属马萨诸塞州综合医院
申请日： 2009-07-13 - 公布日： 2015-07-01 - 主分类号： C12Q1/04 文献下载
摘要：本发明涉及用于对单个细胞所具有的细胞毒性进行评价的组合物以及方法。本发明提供了用以对存在于靶向细胞以及效应器细胞对之间的相互作用进行分析的方法，所述的方法利用到了高通量的筛选方法，用以对存在于微阵列之中的大量的单个细胞进行描绘。
用于单个细胞有的毒性进行评价组合以及方法

[发明专利]基于静态液滴阵列分离单个细胞的方法-CN202010064950.6在审
发明人：丁林;马吉德 -专利权人：丁林
申请日： 2020-01-20 - 公布日： 2020-06-05 - 主分类号： C12N5/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种基于静态液滴阵列分离单个细胞的方法，采用静态液滴阵列将预分离的细胞液分隔成若干个液滴，然后将液滴表面用相容性生物油覆盖，吸取出单个细胞。本发明所述的方法是利用微流控技术中常见的静态液滴阵列，将细胞溶液注射进入静态液滴阵列后，细胞溶液会被分割成若干个液滴，液滴通过生物相容性油包裹成可以移动的液滴，从而可以挑选出这些移动的液滴中只有单个细胞的液滴
基于静态阵列分离单个细胞方法

[发明专利]一种牛血清质量评价的方法-CN201710283822.9有效
发明人：徐家华;陈瑞爱;刘郁夫;路静;张舒琼;吴达兴;廖世昌 -专利权人：肇庆大华农生物药品有限公司;华南农业大学
申请日： 2017-04-26 - 公布日： 2018-12-21 - 主分类号： G01N33/96 文献下载
摘要：本发明公开一种牛血清质量评价方法，包括以下步骤：1)消化：使用0.25％EDTA‑胰酶溶液消化细胞，分散成单个细胞；2)加培养基：取两份单个细胞，分别加入含5％被评价牛血清的培养基10mL，混匀；3)进行1000、10000、10000倍稀释，加至96孔细胞板；4)挑选出含有单个细胞的孔；5)计数：分别在48h、72h、96h计数。该方法可以避免由于牛血清浓度差异导致细胞增殖不好，能快速高效地筛选出高品质牛血清。
种牛血清质量评价方法

[发明专利]一种高效的临床级CD56+群免疫细胞的制备方法-CN201611028882.8在审
发明人：姜丽君 -专利权人：吉林省拓华生物科技有限公司
申请日： 2016-11-18 - 公布日： 2017-04-05 - 主分类号： C12N5/0783 文献下载
摘要：本发明提供了一种高效的临床级CD56+群免疫细胞的制备方法，其包括a)从外周血或脐带血中分离出单个核细胞；b)将a)中获得的单个核细胞接种到用抗CD16抗体包被的培养器皿中；c)在培养基中添加兔抗人胸腺细胞免疫球蛋白、力尔凡及无动物源性细胞因子诱导、刺激在b)中接种的单个核细胞；d)每2‑3天根据细胞计数结果补充培养基和无动物源性细胞因子；e)获得CD56+群免疫细胞。本发明提供的临床级CD56+群免疫细胞的制备方法不仅降低了成本，更符合临床级制备要求，在体内外均显现出良好的杀伤活性。
一种高效临床 cd56 免疫细胞制备方法

[发明专利]脐带血单个核细胞来源的DC-CIK细胞制取方法及制剂-CN201510316136.8在审
发明人：章毅;李春丽;朱华;陈亮 -专利权人：中国干细胞集团上海生物科技有限公司;重庆市干细胞技术有限公司;陕西省干细胞技术有限公司;苏州市干细胞技术有限公司;上海市干细胞技术有限公司;三亚市干细胞技术有限公司;中国干细胞集团上海有限公司;中国干细胞集团重庆有限公司;中国干细胞集团陕西有限公司;中国干细胞集团三亚有限公司;章毅
申请日： 2015-06-10 - 公布日： 2015-12-02 - 主分类号： C12N5/0784 文献下载
摘要：一种DC-CIK共培养细胞制取方法，将分离自脐带血的单个核细胞分别进行分化成DC细胞和CIK细胞后，再进行共培养。采用多种因子对分离自脐带血的单个核细胞进行2级分化获得成熟的DC细胞。本发明提供的DC-CIK共培养细胞制取方法，将获取成熟的DC细胞的时间缩短了至少一半，提高了DC-CIK共培养的细胞效率。
脐带血单个细胞来源 dc cik 制取方法制剂

[发明专利]一种αβT细胞的制备方法-CN202211738681.2在审
发明人：魏伟;黄豪英 -专利权人：广州市天河诺亚生物工程有限公司
申请日： 2022-12-30 - 公布日： 2023-04-18 - 主分类号： C12N5/0783 文献下载
摘要：本发明公开了一种αβT细胞的制备方法。所述制备方法包括：将单个核细胞接种于含CD3抗体的基础培养基，进行培养，得到αβT细胞。本发明创造性地使用CD3抗体在体外诱导αβT细胞扩增，相比传统的αβT细胞制备方法操作简单，大大降低实验成本，此外，选用脐血单个核细胞作为扩增种子细胞，扩增能力更强，更安全，更具有市场应用价值，获得的αβT细胞流式表型优，细胞数量多。
一种细胞制备方法

[发明专利]一种离心管-CN201810774810.0有效
发明人：李丹;江南 -专利权人：苏州呼呼健康科技有限公司
申请日： 2018-07-16 - 公布日： 2023-07-25 - 主分类号： C12M1/24 文献下载
摘要：本发明提供了一种离心管，属于细胞分离技术领域。包括上管体、下管体、过滤膜和管盖。上管体为顶底两端开口结构。过滤膜封堵于上管体的底端，过滤膜能够允许分离液通过阻止单个核细胞通过。管盖盖合于上管体的顶端。由于过滤膜能够允许分离液通过，同时对单个核细胞具有阻止作用，分离液和红细胞将位于过滤膜以下，血浆和单个核细胞所在的白膜层将位于过滤膜以上，从而有效的将白膜层与分离液和红细胞隔离，从而保证所分离出的单个核细胞的纯度
一种离心管

[实用新型]一种离心管-CN201821125234.9有效
发明人：李丹;江南 -专利权人：苏州呼呼健康科技有限公司
申请日： 2018-07-16 - 公布日： 2019-02-12 - 主分类号： C12M1/24 文献下载
摘要：本实用新型提供了一种离心管，属于细胞分离技术领域。包括上管体、下管体、过滤膜和管盖。上管体为顶底两端开口结构。过滤膜封堵于上管体的底端，过滤膜能够允许分离液通过阻止单个核细胞通过。管盖盖合于上管体的顶端。由于过滤膜能够允许分离液通过，同时对单个核细胞具有阻止作用，分离液和红细胞将位于过滤膜以下，血浆和单个核细胞所在的白膜层将位于过滤膜以上，从而有效的将白膜层与分离液和红细胞隔离，从而保证所分离出的单个核细胞的纯度
上管体过滤膜单个核细胞分离液红细胞白膜层离心管下管体底端管盖细胞分离技术本实用新型顶端开口可拆卸的两端开口密封配合内侧壁外侧壁插设封堵盖合下管血浆隔离体内保证

[发明专利]获得具有溃疡性结肠炎治疗作用的细胞亚群的培养方法-CN201810357257.0在审
发明人：王芝辉;王义国;谭毅;马瑞萍 -专利权人：山东智康医疗科技有限公司
申请日： 2018-04-20 - 公布日： 2018-09-14 - 主分类号： C12N5/0775 文献下载
摘要：本发明公开了一种获得具有溃疡性结肠炎治疗作用的细胞亚群(CD90+CD105+)的培养方法，以自体骨髓为处理对象，包括以下步骤：(1)从成人骨髓中分离出单个核细胞，进行培养、扩增；(2)将培养的单个核细胞进行细胞因子活化刺激；(3)根据细胞生长情况，进行扩增传代操作，20天后进行流式检测细胞表型。本发明取骨髓进行单个核细胞分离，采用独特的无血清培养基、自体血清添加物和细胞因子组合下进行干细胞的培养，记录干细胞的增殖能力、检测细胞的亚群含量。本发明能够解决未经培养的干细胞中MSC比例低、增殖能力低的限制、扩增受限等问题。获得具有高比例高效治疗溃疡性结肠炎能力的细胞亚群(CD90+CD105+)。
溃疡性结肠炎单个核细胞细胞亚群干细胞扩增增殖能力治疗传代无血清培养基细胞因子活化添加物成人骨髓处理对象细胞表型细胞生长细胞因子自体骨髓自体血清检测流式受限亚群骨髓细胞刺激记录

[发明专利]一种高表达猪PBMCs细胞因子的饲养层细胞构建方法-CN202111364146.0在审
发明人：崔旻;王珂 -专利权人：华中农业大学
申请日： 2021-11-17 - 公布日： 2022-03-01 - 主分类号： C12N15/867 文献下载
摘要：一种高表达猪PBMCs细胞因子的饲养层细胞构建方法，包括以下步骤：(1)从猪的外周血单个核细胞中克隆细胞因子，设计同源臂引物并连接慢病毒载体，构建含有细胞因子的重组质粒；(2)使用转染的方式，利用阳离子转染试剂，将构建的重组质粒同辅助质粒共转染包装慢病毒的细胞；(3)用包装的慢病毒感染饲养层细胞。本发明将猪IL‑2、IL‑4和IFN‑α基因插入到猪PK‑15细胞基因组内，构建能稳定表达并分泌细胞因子的饲养层细胞，替代猪外周血单个核细胞培养的添加物。所构建的饲养层细胞适合大规模培养，同时也极大地降低了培养成本，操作技术简单，适用性广泛，可广泛用于猪外周血单个核系和猪特定免疫细胞的培养。
一种表达 pbmcs 细胞因子饲养细胞构建方法

[发明专利]CIK细胞及其培养方法和应用-CN201610290919.8有效
发明人：张文;张诺琳;陈伟雄 -专利权人：深圳瑞祥元科技有限公司
申请日： 2016-05-04 - 公布日： 2017-12-05 - 主分类号： C12N5/0783 文献下载
摘要：本发明公开了一种CIK细胞及其培养方法和应用。本发明CIK细胞培养方法包括如下步骤采集患者的外周血单个核细胞的步骤和将所述单个核细胞与抗CD3抗体、抗CD28抗体和细胞因子加入无血清培养基中进行诱导培养的步骤。本发明CIK细胞培养方法采用在抗CD28抗体和抗CD3抗体协同作用以提高刺激诱导单个细胞的刺激活性；采用含有细胞因子IL‑2和IL‑21联合诱导CIK细胞，使得该细胞因子的联合应用对淋巴细胞的扩增产生协同作用，提高CIK细胞的杀伤活性，且减少了因大剂量单因子应用所产生的毒副作用。而且，本发明实施例培养方法缩短了培养时间，降低培养成本，保证了CIK细胞的纯度。
cik 细胞及其培养方法应用

[发明专利]基于显微放大图像的血液目标细胞体积获取方法及系统-CN202211252142.8有效
发明人：刘亚慧;王志平;房祥飞;汪椿树;梅高接 -专利权人：深圳安侣医学科技有限公司
申请日： 2022-10-13 - 公布日： 2023-01-03 - 主分类号： G01N15/10 文献下载
摘要：基于显微放大图像的血液目标细胞体积获取方法及系统，识别出显微放大数字图像中的目标细胞，并获得显微放大数字图像中的每个目标细胞面积STC；单个目标细胞体积VTC=每个目标细胞面积STC×（目标细胞长轴半径a/目标细胞短轴半径b）×第二体积校正系数CVC2；或单个目标细胞体积VTC=第一吸收参数α1×每个目标细胞面积STC×第一体积校正系数CVC1。目标细胞体积计算，方法简单准确性高；使单个目标细胞体积的统计学分析就有了非常精准的基础，为临床获取了更深一层的有价值信息。能对不同状态、不同形态、不同物种的细胞进行适应性的面积和体积计算方法的处理，提高了相应状态下的红细胞体积计算的准确性。
基于显微放大图像血液目标细胞体积获取方法系统

[发明专利]一种分离单个核细胞的方法和装置-CN200810089682.2有效
发明人：胡祥;叶圣勤;李国喜;李建斌;邢培清;杜广有;程四国 -专利权人：深圳市北科生物科技有限公司;河南省红十字血液中心
申请日： 2008-04-14 - 公布日： 2009-10-21 - 主分类号： C12N5/08 文献下载
摘要：本发明提供了一种分离单个核细胞的方法和装置，特别是一种分离脐带血、骨髓、外周血单个核细胞的方法和装置，无须在百级净化环境下即可分离单个核细胞，不受样本数量、体积限制，效率高，无污染，不仅可以用于实验室研究
一种分离单个细胞方法装置

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