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[发明专利]蛋白质的分泌产生方法-CN201780065232.7在审
发明人：伊藤悠美;松田吉彦 -专利权人：味之素株式会社
申请日： 2017-10-20 - 公布日： 2019-10-08 - 主分类号： C12P21/02 文献下载
摘要：本发明开发了提高棒状细菌分泌产生异源蛋白质的新技术，并且提供分泌产生异源蛋白质的方法。对具有分泌产生异源蛋白质的能力的棒杆菌进行培养，分泌产生异源蛋白质，所述棒杆菌经过了修饰以降低RegX3蛋白质的活性。
分泌异源蛋白质棒杆菌蛋白质棒状细菌修饰开发

[发明专利]蛋白质的分泌产生方法-CN201780065233.1有效
发明人：伊藤悠美;松田吉彦 -专利权人：味之素株式会社
申请日： 2017-10-20 - 公布日： 2023-06-23 - 主分类号： C12N15/77 文献下载
摘要：本发明开发了提高棒状细菌分泌产生异源蛋白质的新技术，并且提供分泌产生异源蛋白质的方法。对具有分泌产生异源蛋白质的能力的棒杆菌进行培养，分泌产生异源蛋白质，所述棒杆菌经过了修饰以降低HrrSA系统的活性。
蛋白质分泌产生方法

[发明专利]用于分泌产生蛋白质的方法-CN201280054079.5有效
发明人：松田吉彦;板屋宽;菊池庆实;别府春树;J.A.V.乔曼塔斯;E.A.库塔科瓦 -专利权人：味之素株式会社
申请日： 2012-11-01 - 公布日： 2014-07-23 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明提供了一种分泌产生异源蛋白质的方法，是通过开发一种新技术，以提高棒状杆菌型细菌(coryneform bacterium)分泌产生异源蛋白质的能力。对具有分泌产生异源蛋白质能力的棒状杆菌型细菌进行修饰，使青霉素结合蛋白的活性降低，并使细胞表层蛋白(cell surface layer protein)的活性降低。利用该经过修饰的菌株作为表达宿主，分泌产生异源蛋白质。
用于分泌产生蛋白质方法

[发明专利]蛋白质的分泌产生方法-CN201980026987.5在审
发明人：长瀬悠美;松田吉彦 -专利权人：味之素株式会社
申请日： 2019-04-22 - 公布日： 2020-11-27 - 主分类号： C12N15/31 文献下载
摘要：本发明开发了提高棒状细菌分泌产生异源蛋白质的新技术，并且提供分泌产生异源蛋白质的方法。对具有分泌产生异源蛋白质的能力，并且以具有选自下述性质(A)、(B)和(C)中两种以上的性质的组合的方式进行了修饰的棒状细菌进行培养，分泌产生异源蛋白质：(A)与未修饰菌株相比，RegX3蛋白的活性降低；(B)与未修饰菌株相比，HrrSA系统的活性降低；(C)与未修饰菌株相比，HrcA蛋白的活性降低。
蛋白质分泌产生方法

[发明专利]一种提高酿酒酵母中异源蛋白分泌或表面展示表达的方法-CN202010261091.X有效
发明人：汤红婷;罗小舟;陈南柱 -专利权人：中国科学院深圳先进技术研究院
申请日： 2020-04-03 - 公布日： 2023-06-13 - 主分类号： C12N15/81 文献下载
摘要：本发明涉及一种提高酿酒酵母中异源蛋白分泌或表面展示表达的方法，具体公开了一种同时提高酿酒酵母中异源蛋白的细胞外分泌和表面展示表达的方法，该方法包括将一个或多个细胞壁相关蛋白失活的酿酒酵母细胞或敲除一个或多个编码细胞壁相关蛋白基因的酿酒酵母细胞作为宿主细胞，进行异源蛋白表面展示或分泌表达；异源蛋白为β‑葡萄糖苷酶异源蛋白表面展示或分泌表达的方法为：1)制备细胞外分泌型重组质粒；2)将重组质粒转化至本发明所述的酿酒酵母细胞内，进行培养及酶活测试。
一种提高酿酒酵母中异源蛋白分泌表面展示表达方法

[发明专利]一种超折叠绿色荧光蛋白介导异源蛋白在大肠杆菌中分泌表达方法-CN201611074253.9有效
发明人：张贞;马立新;卞璐;易犁 -专利权人：湖北大学
申请日： 2016-11-29 - 公布日： 2020-02-18 - 主分类号： C12N15/70 文献下载
摘要：本发明提出一种超折叠绿色荧光蛋白介导异源蛋白在大肠杆菌中胞外分泌表达的方法。步骤为：1)构建以超折叠绿色荧光蛋白(sfGFP)作为分泌标签的分泌表达载体pET23a/sfGFP‑GFP；2)构建异源蛋白基因重组表达载体；3)分别转化融合表达载体至大肠杆菌感受态细胞Rosetta本发明利用了超折叠绿色荧光蛋白的分泌特点，无需通过信号肽介导，实现异源蛋白以融合蛋白的形式在大肠杆菌中胞外分泌表达，简化操作过程，自分泌能力强，标签蛋白对目的蛋白功能无影响，能够快速优化表达条件，提高了目的蛋白的得率拓展了sfGFP的应用领域并为异源蛋白在大肠杆菌中实现胞外分泌表达提供了一个新方法。
一种折叠绿色荧光蛋白介导异源大肠杆菌分泌表达方法

[发明专利]蛋白质的分泌生产方法-CN201980069863.5在审
发明人：松田吉彦 -专利权人：味之素株式会社
申请日： 2019-10-25 - 公布日： 2021-06-08 - 主分类号： C07K19/00 文献下载
摘要：本发明开发降低TorA信号肽的残余的新型的技术，并且提供通过棒状细菌并利用了TorA信号肽的高效的异源蛋白质的分泌生产方法。本发明通过利用TorA信号肽，培养具有分泌生产异源蛋白质的能力并且以使得LepB蛋白质的活性升高的方式进行了修饰的棒状细菌，来分泌生产异源蛋白质。
蛋白质分泌生产方法

[发明专利]一种提高酿酒酵母分泌表达异源蛋白的方法及专用酿酒酵母菌株-CN201210044319.5有效
发明人：鲍晓明;沈煜;徐丽丽 -专利权人：山东大学
申请日： 2012-02-25 - 公布日： 2012-07-11 - 主分类号： C12N15/81 文献下载
摘要：本发明公开了一种提高酿酒酵母分泌表达异源蛋白的方法，是通过宿主菌改造、分泌表达载体构建、重组菌株构建、菌株培养、酶活测定，实现提高酿酒酵母分泌表达异源蛋白尤其是分子量大且二硫键丰富的异源蛋白。本发明还提供了所述方法中专用的提高异源蛋白分泌表达的重组酿酒酵母菌株，该菌株命名为酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)BSX010，已于2012年02月08日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心
一种提高酿酒酵母分泌表达蛋白方法专用菌株

[发明专利]具有高效分泌信号序列的哺乳动物表达载体-CN200880018842.2有效
发明人： R·杨;J·兰斯 -专利权人：英国龙沙生物医药股份有限公司
申请日： 2008-06-03 - 公布日： 2010-03-31 - 主分类号： C07K7/08 文献下载
摘要：本发明涉及基于哺乳动物细胞的表达和分泌系统，及利用分泌性信号肽表达和分泌重组蛋白。本发明也涉及使哺乳动物细胞，具体是CHO细胞分泌异源基因所用的表达盒。本发明还涉及使哺乳动物细胞，如CHO细胞分泌异源蛋白的方法。
具有高效分泌信号序列哺乳动物表达载体

[发明专利]异源蛋白的生产方法-CN98805410.8无效
发明人：应田丰雄;大屋智资;桑江忍;大山政男;小林薰;上村八寻 -专利权人：吉富制药株式会社
申请日： 1998-04-03 - 公布日： 2000-06-21 - 主分类号： C12P21/00 文献下载
摘要：一种异源蛋白的生产方法,包括在含有脂肪酸或其盐和表面活性剂的培养基上培养经基因操作制得的产异源蛋白宿主,且从培养物中收集异源蛋白。产异源蛋白宿主产生异源蛋白的量可以增加,此外,由于宿主本身分泌的酶对异源蛋白的降解可以被抑制,由此可以大幅度增加产生的异源蛋白的量。
蛋白生产方法

[发明专利]蛋白质的分泌产生方法-CN201280052867.0有效
发明人：鹤井典子;板屋宽;菊池庆实 -专利权人：味之素株式会社
申请日： 2012-10-25 - 公布日： 2014-07-09 - 主分类号： C12P21/02 文献下载
摘要：开发了一种改善棒状杆菌型细菌对异源蛋白质的分泌产生的新技术，从而提供了一种异源蛋白质分泌产生的方法。培养这样的棒状杆菌型细菌来分泌产生异源蛋白质，该细菌具有基因构建体，该构建体包含：在该棒状杆菌型细菌中发挥功能的启动子序列；连接在该启动子序列下游的、在该棒状杆菌型细菌中发挥功能的、编码信号肽的核酸序列；和连接在该编码信号肽的核酸序列下游的、编码包含Gln-Glu-Thr的氨基酸序列与所述异源蛋白质所成的融合蛋白质的核酸序列。
蛋白质分泌产生方法

[发明专利]细胞培养添加物及其用于增加细胞生物蛋白生产的用途-CN201880057051.4在审
发明人：詹妮弗·伦纳迪;弗拉维奥·施瓦兹;芭芭拉·姜;爱丽丝·曾 -专利权人：乔治洛德方法研究和开发液化空气有限公司
申请日： 2018-09-19 - 公布日： 2020-05-01 - 主分类号： C07K14/72 文献下载
摘要：本发明涉及用于增加蛋白生物分子生产的方法，其中a)培养生产异源蛋白生物分子的细胞，并且b)以如下量向培养基中添加添加物和/或添加物的来源，该量足以(i)增加分泌到该细胞培养基中的异源蛋白生物分子的总产量和/或(ii)增加分泌到该细胞培养基中的异源蛋白生物分子的细胞比生产率。
细胞培养添加物及其用于增加细胞生物蛋白生产用途

[发明专利]一种里氏木霉CBHІ信号肽突变体及其在促进异源蛋白高效表达分泌中的应用-CN202310526357.2在审
发明人：刘巍峰;张伟欣;吕文昊;刘琳 -专利权人：山东大学
申请日： 2023-05-11 - 公布日： 2023-07-14 - 主分类号： C12N9/42 文献下载
摘要：本发明涉及一种里氏木霉CBHI信号肽突变体及其在促进异源蛋白高效表达分泌中的应用。该突变体增强了对异源蛋白的引导能力，能够有效促进异源蛋白XynST11的表达分泌。在异源蛋白XynST11的表达分泌过程中引入里氏木霉CBHI信号肽突变体SPM1后，胞外培养基中XynST11的分泌量和发酵液中由XynST11产生的木聚糖酶酶活水平均有大幅度提高，达到了25U/mL，远远高于CBHI信号肽，因而里氏木霉CBHI信号肽突变体SPM1在促进异源蛋白表达分泌，制备木聚糖酶中具有很大的应用价值。
一种里氏 cbh 信号肽突变体及其促进蛋白高效表达分泌中的应用

[发明专利]通过N端的PI值控制生产可溶性重组蛋白-CN200880125469.0无效
发明人：李相俊;金英玉;南宝惠 -专利权人：国立水产科学院;贝克斯克公司
申请日： 2008-04-17 - 公布日： 2011-01-19 - 主分类号： C12N15/64 文献下载
摘要：本发明涉及利用具有受控pI值的包含信号序列(方向信号)的N区的多肽片段或其变体和/或由具有受控pI值的亲水性多肽构成的分泌增强子提高重组异源蛋白分泌效率的方法。本发明的方法不仅可以有效用于通过防止不溶性沉淀物的沉淀和通过增加重组蛋白的胞外或周质外分泌效率来生产重组异源蛋白，而且可以有效用于通过利用强分泌增强子增加膜通透性来转导有效治疗性蛋白。
通过 pi 控制生产可溶性重组蛋白

[发明专利]通过信号序列和分泌增强子生产可溶的天然形式的重组蛋白质-CN200780003878.9无效
发明人：李相俊;金英玉;南宝惠 -专利权人：国立水产科学院;贝克斯克公司
申请日： 2007-01-30 - 公布日： 2009-02-25 - 主分类号： C12N15/63 文献下载
摘要：本发明涉及使用由修饰的信号序列组成的分泌增强子提高异源蛋白的分泌效率的方法，所述修饰的信号序列包括信号序列的N－区和/或包括所述N－区的所述信号序列的疏水片段和/或亲水多肽。本发明的方法不但可以通过抑制不溶的沉淀并提高所述重组蛋白向周质中或胞外流体中的分泌效率用于生产重组的异源蛋白，并且还通过使用强分泌增强子提高所述重组蛋白的膜渗透性而用于治疗性蛋白的转导。
通过信号序列分泌增强生产可溶天然形式重组蛋白质

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