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[发明专利]人体细胞全形态免疫荧光染色方法及试剂盒-CN201810978362.6有效
发明人：肖乐义;刘元柱;米明仁;杨勤英;李娟 -专利权人：青岛言鼎生物医疗科技有限公司
申请日： 2018-08-27 - 公布日： 2021-03-30 - 主分类号： G01N1/30 文献下载
摘要：本发明公开了一种人体细胞全形态免疫荧光染色方法及试剂盒，应用细胞核抗原、细胞核仁抗原和细胞核浆抗原的抗体及细胞膜与细胞浆中相关抗原的抗体，采用直接免疫荧光法或间接免疫荧光法，对人体细胞进行全形态染色。能清晰完整的显示细胞核尤其是能标定细胞核的核仁，清晰可见核仁的数量、形态、体积大小和分布。再加上免疫荧光染色法特征性显示细胞的抗原，从而可以对人体细胞进行全形态观察和分析。
人体细胞形态免疫荧光染色方法试剂盒

[发明专利]一种克隆无动物成分的人胚胎干细胞的方法-CN02130722.9无效
发明人：李建远;王海燕;刘运祥;刘雪霞;靳韶华 -专利权人：李建远
申请日： 2002-09-18 - 公布日： 2004-03-24 - 主分类号： C12N5/00 文献下载
摘要：本发明提供了一种将人体细胞核与人卵母细胞核置换克隆胚胎干细胞技术，包含以下主要步骤：采集制备人供体细胞；促排卵，取卵；脱卵母细胞周围的卵丘细胞；人卵母细胞核与人体细胞核置换；核置换后的人卵母细胞激活和体外培养发育到囊胚技术本发明是克隆与人供体基因相同的胚胎干细胞技术，同时也是克隆人的关键技术。克隆的胚胎干细胞无任何动物成分，经过体外培养可建立胚胎干细胞系，定向诱导分化为人体各种干细胞，为应用干细胞治疗、克隆组织和器官等临床治疗性研究奠定基础，同时控制克隆人技术的发展。
一种克隆动物成分胚胎干细胞方法

[发明专利]完全人杂交瘤融合配偶体细胞系-CN200680031268.5无效
发明人：伊利亚·特拉赫特;加夫雷尔·卡兰塔罗夫 -专利权人：哥伦比亚大学
申请日： 2006-08-25 - 公布日： 2009-02-11 - 主分类号： C07K16/00 文献下载
摘要：本发明的某些方面涉及称为人核型嵌合细胞的新型完全人融合配偶体细胞系，以及制备它们的方法。然后人核型嵌合细胞与人抗体分泌性淋巴样细胞融合，从而制备称为基于核型嵌合的杂交瘤的完全人杂交瘤，其同样地分泌完全人单克隆抗体。通过下列步骤制备人核型嵌合细胞：从第一恶性B淋巴细胞细胞系或正常B淋巴细胞分离供体细胞核，所述供体细胞核基本上无细胞质，并将该供体细胞核转移到来自第二T或B淋巴样细胞系的受体细胞质中。随着时间，所述细胞核同步化并融合，从而形成嵌合的核型嵌合融合配偶体细胞系。细胞核转移可以通过利用胞质内细胞核注射或通过碰撞诱导的细胞核引入来实现。
完全杂交瘤融合配偶体细胞

[发明专利]一种提高猪体细胞核移植胚胎发育效率的方法-CN201611270683.8有效
发明人：李奎;刘志国;牟玉莲;郑新民;毕延震 -专利权人：中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
申请日： 2016-12-30 - 公布日： 2019-08-09 - 主分类号： C12N15/877 文献下载
摘要：本发明公开了一种提高猪体细胞核移植胚胎发育效率的方法。本发明提供了毛壳素的应用，为如下(a1)‑(a5)中的至少一种：(a1)制备用于动物体细胞核移植的供核细胞培养液；(a2)制备用于动物体细胞核移植的重构胚胎培养液；(a3)培养用于动物体细胞核移植的供核细胞；(a4)培养用于动物体细胞核移植的重构胚胎；(a5)促进动物体细胞核移植中的重构胚形成囊胚。本发明通过利用小分子药物毛壳素对体细胞核移植中的供核细胞或者重构胚胎进行处理，促进体细胞核移植重编程的发生，显著提高克隆胚胎的囊胚发育率和囊胚细胞数，最终提高猪体细胞核移植技术的整体效率。本发明对提高猪体细胞核移植技术的整体效率有重要意义。
动物体细胞核猪体移植供核细胞重构细胞核移植技术体细胞核移植细胞核移植胚胎发育整体效率毛壳囊胚制备胚胎培养液胚胎培养液小分子药物克隆胚胎囊胚细胞重要意义重编程重构胚发育应用

[发明专利]一种人体脱落细胞免疫荧光染色试剂盒及方法-CN202210199129.4在审
发明人：肖乐义;刘元柱;肖晨亮;米明仁;孙丽君;杨勤英;李娟;张腾业 -专利权人：青岛言鼎生物医疗科技有限公司
申请日： 2022-03-02 - 公布日： 2022-08-02 - 主分类号： G01N33/52 文献下载
摘要：本发明公开了一种人体脱落细胞荧光染色试剂盒及方法，用对细胞核特别是细胞核仁RNA有特殊亲和力的荧光染料SYTO RNA Select将细胞核仁和细胞核染成绿色，组合上皮细胞抗原等(EpCAM、CK、波形蛋白等)的单克隆抗体标记红色的荧光染料，将细胞浆和细胞表面染成红色。通过本染色方法与染色试剂盒能清晰完整的显示细胞核尤其是能标定细胞核的核仁，清晰可见核仁的数量、形态、体积大小和分布。这是分析人体细胞病理学的关键特征，再加上免疫荧光染色法特征性显示细胞浆和细胞膜的抗原，从而可以对人体脱落细胞进行全形态观察和分析。
一种人体脱落细胞免疫荧光染色试剂盒方法

[发明专利]用体细胞核移植技术制备移核胚胎干细胞的方法-CN03113135.2无效
发明人：毛曦;储成林;浦跃朴;林萍华;毛钊 -专利权人：东南大学
申请日： 2003-04-08 - 公布日： 2005-10-19 - 主分类号： C12N5/10 文献下载
摘要：用体细胞核移植技术制备移核胚胎干细胞的方法是关于应用体细胞核移植技术制备细胞的一种方法，该方法用显微操作仪将成年动物的神经细胞核移植入动物胚胎的去核胚胎干细胞胞质体内，重新组成具全新基因型移核胚胎干细胞，并培养移核胚胎干细胞使其分裂、增殖到2⁸个，胚胎干细胞和神经细胞属同种异体细胞，所制备的细胞为具核供体细胞－神经细胞基因型的移核胚胎干细胞，本发明不但解决了胚胎干细胞在医学上应用的伦理问题，也解决了细胞移植时出现的免疫排斥问题。还解决了进行体细胞核移植时，核供体细胞与核受体细胞的细胞周期同步以及核受体细胞的来源问题，这无疑将加快人胚胎干细胞包括从中得到发展的细胞工程和组织工程的发展。
体细胞移植技术制备胚胎干细胞方法

[发明专利]一种基于微流道的机器人化体细胞核移植操作方法-CN201910449314.2有效
发明人：孙明竹;刘曜玮;赵新;王雪锋;赵启立;崔茂盛 -专利权人：南开大学
申请日： 2019-05-28 - 公布日： 2022-09-30 - 主分类号： C12N15/873 文献下载
摘要：一种基于微流道的机器人化体细胞核移植操作方法。该方法的特点是引入的微流道用于存储细胞，引入了平行的双针分别用于细胞去核以及注核。该方法包括以下关键步骤：细胞的微流道存储，细胞的定位，细胞吸持，细胞去核，去核针与注核针的转换，细胞注核，最后释放已操作的细胞。实验结果表明该流程较传统体细胞核移植流程节约了41.7％的时间，并与手动体细胞核移植的存活率、成功率一致，有效的提升了体细胞核移植的效率与可重复性。
一种基于微流道机器人化体细胞移植操作方法

[发明专利]一种包括Rad51激活剂的用于胚胎发育的组合物以及用其提高胚胎发育率的方法-CN201980009895.6在审
发明人：李东律;朴卿顺;李娥菻 -专利权人：车医科学大学校产学协力团
申请日： 2019-01-23 - 公布日： 2020-09-04 - 主分类号： C12N15/877 文献下载
摘要：本发明一方面提供一种通过使用增加Rad51活性的物质(RS‑1)来增加体细胞核移植效率的方法以及由此制备的体细胞核置换细胞。本发明另一方面提供一种通过筛选增加Rad51活性的物质来增加体细胞核置换效率的方法。可以通过使用增加Rad51活性的物质来提高体细胞核置换的效率。
一种包括 rad51 激活剂用于胚胎发育组合以及提高方法

[发明专利]一种用于DNA倍体分析的SVM细胞核分类器训练方法-CN202011588584.0有效
发明人：刘炳宪;谢菊元;王焱辉;王克惠;黄涛 -专利权人：宁波江丰生物信息技术有限公司
申请日： 2020-12-28 - 公布日： 2023-04-07 - 主分类号： G06V20/69 文献下载
摘要：本发明提供了一种用于DNA倍体分析的SVM细胞核分类器训练方法，包括：对细胞学的扫描图像进行预处理得到多个细胞核待选区一；去除每个细胞核待选区域一中的淋巴细胞以及杂质图像；于细胞核待选区域一中去除重叠的细胞核，得到由单个细胞核构成的多个细胞核待选区域二；分别提取每个细胞核待选区域二的多种形态特征、纹理特征和颜色特征以组成一个多维的特征，多维的特征用以作为最终的细胞核待选区域三；采用SVM分类器对细胞核待选区域三进行分类训练，其中，分类结果包括粒细胞和体细胞。其技术方案的有益效果在于，能有效地在分类前过滤大量淋巴细胞、杂质和重叠细胞，使用较少的特征主要对体细胞和粒细胞进行分类，提高了分类器训练的效率。
一种用于 dna 分析 svm 细胞核分类训练方法

[发明专利]一种猪克隆胚胎的制备方法-CN201410029726.8有效
发明人：冀倩倩;赵海静;宋振威;赵广银;丛佩清;陈瑶生 -专利权人：中山大学
申请日： 2014-01-17 - 公布日： 2014-05-07 - 主分类号： C12N15/877 文献下载
摘要：该制备方法包括：获得供体细胞；取重编程因子重组载体，转入所得供体细胞，得核供体细胞；将所得核供体细胞移植到去除细胞核的卵细胞中，融合和激活，即得。本发明提供的制备方法在获得核供体细胞之后直接移植到去除细胞核的卵细胞中，缩减了利用重编程因子制备猪克隆胚胎的步骤，操作简单易行，缩短了工作周期，且有效提高了猪克隆胚胎发育效率。
种猪克隆胚胎制备方法

[发明专利]一种细胞核移植方法-CN200910107266.5有效
发明人：杜玉涛;王俊;汪建;杨焕明 -专利权人：深圳华大基因科技有限公司
申请日： 2009-05-06 - 公布日： 2009-11-18 - 主分类号： C12N15/06 文献下载
摘要：本发明公开了一种细胞核移植方法，包括以下步骤：构建卵母细胞；采用浓度为0.05～20ug/ml的去核试剂，将所述卵母细胞处理0.5～26小时，获得细胞质体；构建具有所需遗传特性的供体细胞或细胞核，将细胞质体与所述供体细胞或细胞核融合本发明通过使用去核试剂灭活卵母细胞来去除卵母细胞的细胞核，取代现有技术的细胞核移植技术中需要机械操作去除卵母细胞细胞核的步骤，简化了该步骤的操作，可广泛应用于多种物种的细胞核移植操作中。
一种细胞核移植方法

[发明专利]克隆人自体基因的胚胎干细胞定向诱导成体细胞分化-CN200410090893.X无效
发明人：李建远;王海燕;刘雪霞;王延伟;刘运祥 -专利权人：李建远;王海燕;刘雪霞
申请日： 2004-11-17 - 公布日： 2006-05-31 - 主分类号： C12N5/08 文献下载
摘要：克隆人自体基因的胚胎干细胞定向诱导成体细胞分化技术涉及采用体细胞核移植技术克隆人自体基因的胚胎，建立胚胎干细胞系和体外定向诱导人成体细胞分化技术。解决人类细胞、组织和器官移植所面临的供体严重缺乏和排斥反应两大难题。采用核移植克隆技术将人体细胞的细胞核转移到健康人或动物的去核卵母细胞中，经融合激活后，培养发育至囊胚。取囊胚内细胞团，可得到与供者同基因的胚胎干细胞。建立胚胎干细胞系，大量扩增的胚胎干细胞在一定条件下可定向诱导分化为人体所需要的，具有相同组织特异性的神经细胞、造血干细胞、成骨细胞、胰岛细胞和心肌细胞等成体细胞，临床移植不会产生移植排斥反应。另外，胚胎干细胞系可用于基因治疗等多种类型研究。
克隆基因胚胎干细胞定向诱导成体细胞分化

[发明专利]胚胎干细胞系及其制备方法-CN200480039480.7无效
发明人：卢圣一;黄禹锡;李柄千;姜成根;刘英俊;李有振;金淳雄;权大基;权喜善;古子敏;朴乙淳;黄尹英;文信容;吴善京;安圭里;尹贤洙;朴钟爀;金顺钟;崔阳圭 -专利权人：财团法人首尔大学校产学协力财团
申请日： 2004-12-30 - 公布日： 2007-02-28 - 主分类号： C12N5/28 文献下载
摘要：一种从通过将人体细胞的细胞核移植入去核的人卵母细胞制备的核移植卵母细胞上衍生的胚胎干细胞系，可分化成各种希望的细胞类型。
胚胎细胞系及其制备方法

[发明专利]一种提高人种间核移植胚胎核质相容性及发育率的方法-CN201010270285.2无效
发明人：成国祥;冯云;陈建泉;沙红英 -专利权人：上海转基因研究中心
申请日： 2010-09-02 - 公布日： 2012-03-21 - 主分类号： C12N15/877 文献下载
摘要：该方法包括步骤：(a)将供核细胞的细胞核移入去除了细胞核的非人哺乳动物卵母细胞的卵周隙内，电刺激促进融合，从而形成重构卵；(b)将来自于人卵的胞质移入步骤(a)的重构卵；(c)对步骤(b)的重构卵进行电刺激，从而形成由人体细胞的细胞核、非人哺乳动物的去核卵胞质、和人卵胞质三种成分组成的重构卵。
一种提高人种移植胚胎核质相容性发育方法

[发明专利]一种DNA倍体分析设备的细胞归一化IOD值计算方法-CN201811065914.0有效
发明人：贺权源;刘朝前;罗军 -专利权人：湖南品胜生物技术有限公司
申请日： 2018-09-13 - 公布日： 2021-12-21 - 主分类号： G16B40/00 文献下载
摘要：本发明一种DNA倍体分析设备的细胞归一化IOD值计算方法，通过将细胞核按照IOD值的大小不同，分入连续的间隔内，计算出每个间隔内的细胞数量，并采用高斯曲线拟合，求出μ值，以μ值作为2倍体细胞核归一化IOD值，以保证在多峰、平顶情况时，2倍体细胞核归一化IOD值更准确。
一种 dna 分析设备细胞归一化 iod 计算方法

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