[发明专利]重组人糖基化尿激酶原的制备方法无效
申请号: | 96119836.2 | 申请日: | 1996-09-27 |
公开(公告)号: | CN1062016C | 公开(公告)日: | 2001-02-14 |
发明(设计)人: | 方继明;肖成祖;余炜源;张正光;李风知;黄子才;陈昭烈;叶建新 | 申请(专利权)人: | 中国人民解放军军事医学科学院生物工程研究所 |
主分类号: | C12N15/58 | 分类号: | C12N15/58;C12N15/85;C12N15/06 |
代理公司: | 中国人民解放军总后勤部专利服务中心 | 代理人: | 吴嘉善 |
地址: | 100071*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | 本发明是利用生物工程的方法,通过基因工程技术构建了一种有双重放大功能的表达载体,并获得一株高效表达的CHO工程细胞。经微载体和低血清培基高密度灌流培养和纯化,制备一种治疗冠状动脉梗塞,脑血栓,中央视网膜动静脉血栓和其他血栓病的药物一重组人糖基化尿激酶原。$#! | ||
搜索关键词: | 重组 人糖基化 尿激酶 制备 方法 | ||
【主权项】:
1.一种重组人糖基化尿激酶原的制备方法,包括以下步骤:(1)人尿激酶原全长cDNA基因的构建和克隆,(2)表达载体的构建,(3)CHO工程细胞的转染和筛选,(4)CHO工程细胞的培养和(5)CHO工程细胞分泌产物的纯化,其特征在于CHO工程细胞是以CHO?dhfr-为宿主细胞,所述的表达载体是pMTSV-du,它由下图所示的各元件组成,并用微载体灌流培养技术高密度培养和放大培养CHO工程细胞。
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