[发明专利]一种融合基因、表达载体及抗糖尿病药物筛选方法在审
| 申请号： | 202211514515.4 | 申请日： | 2022-11-29 |
| 公开（公告）号： | CN115992158A | 公开（公告）日： | 2023-04-21 |
| 发明（设计）人： | 刘超;杨晓松;刘秀芬;张飞雪 | 申请（专利权）人： | 湖北科技学院 |
| 主分类号： | C12N15/62 | 分类号： | C12N15/62;C07K19/00;C12N15/85;C12N15/861;C12N15/867;C12N5/10;G01N21/64 |
| 代理公司： | 武汉市首臻知识产权代理有限公司 42229 | 代理人： | 李双全 |
| 地址： | 437100 *** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种融合基因、表达载体及抗糖尿病药物筛选方法，该方法以真核表达载体pCDNA3.1为基础，插入人工合成的EBFP2‑T2A‑SGLT2融合基因而获得新的表达载体pBTS，转染HEK293细胞而获得同时表达蓝色荧光蛋白（EBFP2）和人源钠‑葡萄糖协同转运蛋白（SGLT2）的基因工程细胞，该基因工程细胞所表达蓝色荧光蛋白EBFP2用于评价转染效率，也可以作为计算SGLT2转运荧光葡萄糖的内参，自裂肽T2A用于连接EBFP2和SGLT2，在细胞内表达的同时能够胞内蛋白酶裂解而获得独立的SGLT2蛋白，能够更好的保持SGLT2在细胞内的真实构象，从源头上解决融合蛋白可能对SGLT2活性及其对荧光葡萄糖转运能力的影响，在活性检测过程中体现真实SGLT2的生物学活性，保证了药物检测结果的准确性、可重复性。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 融合 基因 表达 载体 糖尿病药物 筛选 方法 | ||
【主权项】：
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