[发明专利]一种用于检测CRISPR-Cas蛋白切割活性的双荧光素酶报告细胞系及其应用在审
| 申请号： | 202211255343.3 | 申请日： | 2022-10-13 |
| 公开（公告）号： | CN115725623A | 公开（公告）日： | 2023-03-03 |
| 发明（设计）人： | 松阳洲;杨悦;何梓彬;马文宾;梁普平;陈昱僖 | 申请（专利权）人： | 中山大学 |
| 主分类号： | C12N15/65 | 分类号： | C12N15/65;C12N15/867;C12N5/10;C12N15/54;C12Q1/02;C12N15/113;C12N9/22;C12N15/55;C12R1/91 |
| 代理公司： | 广州粤高专利商标代理有限公司 44102 | 代理人： | 孙凤侠 |
| 地址： | 510275 广东*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种用于检测CRISPR‑Cas蛋白切割活性的双荧光素酶报告细胞系及其应用。本发明所述报告细胞系将纳米荧光素酶基因Nluc与管家基因ACTG1融合表达，避免了细胞内环境变化对纳米荧光素酶Nluc活性的影响；通过Nluc活性的变化反映CRISRP‑Cas蛋白的切割活性，克服了现有GFP的半衰期较长，没有办法快速响应基因位点双链断裂的情况的不足。此外，本发明所述报告细胞系还可用于筛选CRISPR‑Cas蛋白抑制剂。本发明利用构建所得报告细胞系筛选到了能够在细胞内抑制SpCas9切割活性的小分子化合物，筛选过程的操作简单，检测方便，信号稳定。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 用于 检测 crispr cas 蛋白 切割 活性 荧光 报告 细胞系 及其 应用 | ||
【主权项】：
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