[发明专利]一种苯乙醇胺-N-甲基转移酶的高通量筛选方法在审
| 申请号： | 202210670475.6 | 申请日： | 2022-06-14 |
| 公开（公告）号： | CN114854822A | 公开（公告）日： | 2022-08-05 |
| 发明（设计）人： | 陈可泉;孙金娣;王昕;冯娇 | 申请（专利权）人： | 南京工业大学 |
| 主分类号： | C12Q1/48 | 分类号： | C12Q1/48;C12Q1/34;C12N15/70;C12N15/54;C07D311/94 |
| 代理公司： | 南京擎天知识产权代理事务所(普通合伙) 32465 | 代理人： | 蓝霞 |
| 地址： | 210000 江苏省南京市*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种苯乙醇胺‑N‑甲基转移酶的高通量筛选方法。在酶标仪的96孔板中加入底物去甲肾上腺素和S‑腺苷蛋氨酸、PBS缓冲液、S‑腺苷‑L‑同型半胱氨酸水解酶SAHH，加入酶样品苯乙醇胺‑N‑甲基转移酶，在微孔板震荡反应器中，20‑50℃，500‑1000rpm，反应1‑3h，4℃，3700rpm离心，取上清，再加入化合物NDCC反应0‑90min，反应过程中每隔1‑30min取出酶标板，酶标测定其吸光值；根据吸光值变化，酶活定义为在特定条件下，每分钟OD405nm吸光值的变化*1000000。本发明具有操作简单、成本低廉、检测准确等特点，对苯乙醇胺‑N‑甲基转移酶的定向进化具有深远意义。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 乙醇胺 甲基转移酶 通量 筛选 方法 | ||
【主权项】：
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