[发明专利]一种芦笋胆固醇C-22羟化酶异源表达载体构建方法在审

专利信息
申请号: 202210636737.7 申请日: 2022-06-07
公开(公告)号: CN115386584A 公开(公告)日: 2022-11-25
发明(设计)人: 林春;刘正杰;董玉梅;毛自朝;张永辉;黄玲;成钦;黎玉萍;吴贺 申请(专利权)人: 云南农业大学;四川省农业科学院经济作物育种栽培研究所
主分类号: C12N15/53 分类号: C12N15/53;C12N15/54;C12N15/70
代理公司: 昆明金科智诚知识产权代理事务所(普通合伙) 53216 代理人: 胡亚兰
地址: 650225 云*** 国省代码: 云南;53
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摘要: 发明属于基因工程技术领域,公开了一种芦笋胆固醇C‑22羟化酶异源表达载体构建方法,所述AoCYP90B27基因的核苷酸序列为SEQIDNO:1;所述异源表达载体构建方法包括:以多年生芦笋根部组织提取总RNA,以芦笋cDNA为模板进行CDS扩增,测序,比对;以送测序的PET‑AoCYP90B27T载体为模板,用引物进行片段扩增,并将扩增产物进行胶回收;对扩增片段和原始载体进行线性化,室温连接;将连接产物进行转化,培养,提取表达质粒Pcfp‑AoCYP90B27;利用模板进行扩增,线性化,连接转化,培养,提取最终的表达质粒Pcp‑AoCYP90B27‑gpdterminator。
搜索关键词: 一种 芦笋 胆固醇 22 羟化酶 表达 载体 构建 方法
【主权项】:
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