[发明专利]一种高产乳酰-N-四糖的重组大肠杆菌的构建方法及应用在审
| 申请号： | 202210573394.4 | 申请日： | 2022-05-24 |
| 公开（公告）号： | CN114990037A | 公开（公告）日： | 2022-09-02 |
| 发明（设计）人： | 沐万孟;张文立;李泽宇;朱莺莺 | 申请（专利权）人： | 江南大学 |
| 主分类号： | C12N1/21 | 分类号： | C12N1/21;C12N15/70;C12N15/61;C12N15/56;C12N15/54;C12N15/55;C12N15/53;C12P19/26;C12R1/19 |
| 代理公司： | 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 | 代理人： | 仇钰莹 |
| 地址： | 214122 江苏*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种高产乳酰‑N‑四糖的重组大肠杆菌的构建方法及应用，属于微生物代谢工程技术领域。本发明以前期研究中获得的高产乳酰‑N‑三糖II的重组大肠杆菌为出发菌株，并在该大肠杆菌基因组上整合有单拷贝的galE，通过质粒组合优化表达lgtA、pF和galE，并通过CRISPR‑Cas9基因编辑系统在大肠杆菌宿主基因组上敲除ugD，以缓解中间产物的代谢分流，同时加强产物合成过程中辅因子的再生与循环，进一步提高乳酰‑N‑四糖的产量，在摇瓶发酵实验过程中，重组大肠杆菌生产乳酰‑N‑四糖的能力为6.16g/L，在5L发酵罐中，乳酰‑N‑四糖的产量达到57.5g/L，为进一步工业化生产乳酰‑N‑四糖奠定了基础。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 高产 重组 大肠杆菌 构建 方法 应用 | ||
【主权项】：
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