[发明专利]一种基于高通量测序对TCR β进行定量的方法在审
| 申请号： | 202210222259.5 | 申请日： | 2022-03-03 |
| 公开（公告）号： | CN114561454A | 公开（公告）日： | 2022-05-31 |
| 发明（设计）人： | 万瑛;倪青山;于海礼;韩清娟;邹丽云;曾聪;黄毅;陈钢 | 申请（专利权）人： | 中国人民解放军陆军军医大学 |
| 主分类号： | C12Q1/6869 | 分类号： | C12Q1/6869;G16B30/00 |
| 代理公司： | 上海光华专利事务所(普通合伙) 31219 | 代理人： | 石欢欢 |
| 地址： | 400038 重*** | 国省代码： | 重庆;50 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种基于高通量测序对TCRβ进行定量的方法，包括如下步骤：使用Trizol裂解样本，在裂解样本中加入外参细胞裂解液；提取样本和外参细胞的总RNA；利用TCRβ的C端特异性引物进行反转录；在反转录产物中加入模板；使用一组优化了序列组成和使用浓度的多重PCR引物构建TCRβ的高通量测序文库，并进行测序；利用2轮外参数据对样本中的TCRβ进行定量。本发明通过加入外参细胞，可对样本的T细胞总数进行有效估计；通过使用优化了序列组成和使用浓度的多重PCR引物，可更好的减少多重引物相互之间的干扰和扩增偏倚；通过加入模板，可帮助TCR高通量测序数据的校正和标准化，最后获得精准而真实的TCRβ库分布。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 基于 通量 tcr 进行 定量 方法 | ||
【主权项】：
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