[发明专利]一种基于Pacbio测序的16S rDNA全长文库高通量构建的技术方法在审
申请号: | 202111528540.3 | 申请日: | 2021-12-14 |
公开(公告)号: | CN114181996A | 公开(公告)日: | 2022-03-15 |
发明(设计)人: | 黄福义;林晨烁;苏建强;张娴 | 申请(专利权)人: | 中国科学院城市环境研究所 |
主分类号: | C12Q1/6806 | 分类号: | C12Q1/6806;C12N15/10;C40B50/06 |
代理公司: | 安徽申策知识产权代理事务所(普通合伙) 34178 | 代理人: | 许晓璐 |
地址: | 361021 福建*** | 国省代码: | 福建;35 |
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摘要: | 本发明涉及分子生物学技术领域,公开了一种基于Pacbio测序的16S rDNA全长文库高通量构建的技术方法,包括以下步骤:S1、设计与合成带标签的扩增引物:引物的5’端带有标签序列,并且5’端磷酸化修饰,引物的3’端为扩增子的特异性引物,并经HPLC纯化;S2、点样仪以含有5184个微孔的芯片作为载体,根据不同通量组合,完成芯片制备,进行PCR扩增,芯片中的扩增产物混合收集至离心管;S3、扩增产物进行纯化,末端修复和加A反应等,文库上机测序。基于此方法得到测序结果显示,与常规建库方法得到的物种组成结构和丰度高度一致。本技术发明大大地简化了实验操作流程,具有基因文库构建的高通量优势,提高了建库效率,缩短了实验周期,减少了试剂耗材等成本。 | ||
搜索关键词: | 一种 基于 pacbio 16 rdna 全长 文库 通量 构建 技术 方法 | ||
【主权项】:
暂无信息
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