[发明专利]一种FAD为辅基的葡萄糖脱氢酶的高产发酵方法在审
申请号: | 202110955924.7 | 申请日: | 2021-08-19 |
公开(公告)号: | CN113637649A | 公开(公告)日: | 2021-11-12 |
发明(设计)人: | 陈文嘉;李因来 | 申请(专利权)人: | 杭州博岳生物技术有限公司 |
主分类号: | C12N9/04 | 分类号: | C12N9/04;C12N1/16;C12R1/84 |
代理公司: | 深圳紫晴专利代理事务所(普通合伙) 44646 | 代理人: | 张欢欢 |
地址: | 310018 浙江省杭州市*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | 本发明公开了一种FAD为辅基的葡萄糖脱氢酶的高产发酵方法,属于生物工程技术领域,包括如下步骤:1)取‑80℃冻存的表达菌种,无菌操作条件下接种至种子培养基中,种子培养基为BMGY培养基或者为YPD培养基,种子培养使用500ml或者1L三刺三角摇瓶,装液量250ml~500ml,接种量0.5‰~1.5‰,接种后在摇床中30℃250rpm培养16~24小时至OD600达到6~10;本发明通过使用重组毕赤酵母菌在10L发酵罐中培养时经过60小时的诱导,培养基上清中表达的葡萄糖脱氢酶酶活达到1150000U/L(DCPIP比色法测定值),酶活得率提高了4.4~4.5倍,并且诱导时间仅需60小时,比现有技术所使用的诱导时间缩短了三分之一甚至近一半,解决了现有技术发酵时间长、酶活得率低、不利于大规模工业化放大生产的问题。 | ||
搜索关键词: | 一种 fad 为辅 葡萄糖 脱氢酶 高产 发酵 方法 | ||
【主权项】:
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