[发明专利]微滴数字PCR检测前列腺癌组织中CTHRC1基因含量的方法在审

专利信息
申请号: 202110891825.7 申请日: 2021-08-04
公开(公告)号: CN113736862A 公开(公告)日: 2021-12-03
发明(设计)人: 杨德平;郑江花 申请(专利权)人: 上海健康医学院附属周浦医院
主分类号: C12Q1/6851 分类号: C12Q1/6851;C12N15/11
代理公司: 上海浙晟知识产权代理事务所(普通合伙) 31345 代理人: 何文虎
地址: 200120 上*** 国省代码: 上海;31
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摘要: 发明公开了一种微滴数字PCR检测前列腺癌组织中CTHRC1基因含量的方法,属于CTHRC1基因含量的检测方法领域。它包括以下步骤:(1)引物与质粒准备:根据CTHRC1的序列设计引物,经过序列比对分析,针对CTHRC1保守区设计引物,5′→3′引物序列为F:CTTCATATGTGGCCGCCAGG;R:AGATGAGCCCCTGGAAAGCA;同时设计β‑actin内参引物,5′→3′引物序列为F:CCTGGCACCCAGCACAAT;R:GGGCCGGACTCGTCATAC;利用CTHRC1引物扩增的该段目的基因片段构建PUC57质粒,质粒含有3070bp,质粒浓度为40ng/μL,通过换算为1.19×1010copies/μL;(2)酶切PUC57质粒;(3)ddPCR检测。通过电泳验证引物的特异性,引物符合要求;ddPCR检测CTHRC1的正确度分析表现出很好的线性关系;ddPCR通过检测连续稀释的质粒,得出它检测CTHRC1的灵敏度高。
搜索关键词: 数字 pcr 检测 前列腺癌 组织 cthrc1 基因 含量 方法
【主权项】:
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