[发明专利]一种鉴别非洲猪瘟基因缺失株的巢式PCR检测引物组及方法有效
申请号: | 202110885516.9 | 申请日: | 2021-08-03 |
公开(公告)号: | CN113584227B | 公开(公告)日: | 2023-04-28 |
发明(设计)人: | 刘国平;张子薇;陈少贤;王钰;曾攀 | 申请(专利权)人: | 长江大学 |
主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/6848;C12N15/11 |
代理公司: | 北京高沃律师事务所 11569 | 代理人: | 李博 |
地址: | 434021 *** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | 本发明提供了一种鉴别非洲猪瘟基因缺失株的巢式PCR检测引物组及方法,本发明针对pDP71L基因缺失株、DP96R基因缺失株、A276R基因缺失株和MGF360‑12L基因缺失株各设计一对外侧引物和一对内侧引物,该八对引物的核苷酸序列如SEQIDNO.1~16所示。本发明利用外侧引物和内侧引物分别进行PCR扩增,第一次扩增加强PCR的特异性,第二次扩增加强PCR检测的敏感性,两轮PCR提高了PCR的特异性和灵敏性,该方法的灵敏性低至1个数量级,可检出极低载量的病毒。克服了普通PCR检测灵敏度低,特异性差等问题,与现有的间接免疫荧光、基因芯片等检测方法相比成本较低,适用监测范围广,同时便于样本阳性片段的及时测序。 | ||
搜索关键词: | 一种 鉴别 非洲 猪瘟 基因 缺失 pcr 检测 引物 方法 | ||
【主权项】:
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