[发明专利]一种基于CRISPR-Cas12a的猪链球菌快速可视化RPA检测试剂盒及其应用在审

专利信息
申请号: 202110863649.6 申请日: 2021-07-29
公开(公告)号: CN113621717A 公开(公告)日: 2021-11-09
发明(设计)人: 李刚;张跃灵;王春来;刘思国 申请(专利权)人: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
主分类号: C12Q1/689 分类号: C12Q1/689;C12Q1/6844;C12Q1/04;C12R1/46
代理公司: 北京科龙寰宇知识产权代理有限责任公司 11139 代理人: 马鑫
地址: 150009 黑龙*** 国省代码: 黑龙江;23
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摘要: 发明公开了一种基于CRISPR‑Cas12a的猪链球菌快速可视化RPA检测试剂盒及其应用。所述试剂盒中包含一对用于扩增猪链球菌cps2j基因的特异性引物对、gRNA和荧光报告探针,其中,所述的引物对的核苷酸序列如SEQ ID NO:6和7或SEQ ID NO:8和9所示,与所述的gRNA互补的DNA的核苷酸序列如SEQ ID NO:2或3所示。本发明根据猪链球菌的特异性基因Cps2j设计特异性重组酶聚合酶扩增(RPA)引物及CRISPR/Cas12a系统探针,实现了RPA特异性靶基因扩增,以及CRISPR/Cas12a系统对报告基因的切割,建立了猪链球菌的快速可视化检测方法。该方法快速,可视,且特异性好,敏感度高,特别适用于资源贫乏地区猪链球菌的检测。
搜索关键词: 一种 基于 crispr cas12a 链球菌 快速 可视化 rpa 检测 试剂盒 及其 应用
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