[发明专利]一种新金色分枝杆菌中基因连续敲除的方法在审
| 申请号： | 202110841851.9 | 申请日： | 2021-07-26 |
| 公开（公告）号： | CN113481137A | 公开（公告）日： | 2021-10-08 |
| 发明（设计）人： | 许敬亮;赵安琪;李亚梅;张晓琴;王小元;胡晓清;应汉杰;吕永坤;阿拉牧 | 申请（专利权）人： | 郑州大学 |
| 主分类号： | C12N1/21 | 分类号： | C12N1/21;C12N15/90;C12N15/74;C12N15/65;C12N15/55;C12N15/66;C12R1/32 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 450001 河南省郑*** | 国省代码： | 河南;41 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种新金色分枝杆菌(Mycolicibacterium neoaurum)基因连续敲除方法，属于基因工程技术领域。本发明建立了基于同源重组‑Cre/loxLR特异位点重组的M.neoaurum基因敲除方法。包括如下步骤：首先构建敲除片段并转入M.neoaurum，利用同源重组将基因组上的靶基因替换为两端带有loxL和LoxR位点的kan片段；然后转入质粒pDMN01，由重组酶Cre识别loxL和LoxR位点并发生重组反应，从而去除kan基因片段；进一步利用质粒的温敏特性将pDMN01消除。本发明的敲除方法，相较于传统的基于同源重组双交换的分枝杆菌敲除方法，可有效缩短筛选的时长和减少筛选的工作量。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 金色 分枝杆菌 基因 连续 方法 | ||
【主权项】：
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