[发明专利]检测巴氏奶致病菌的多重PCR引物及其鲁棒性检测方法有效
申请号: | 202110765594.5 | 申请日: | 2021-07-07 |
公开(公告)号: | CN113355440B | 公开(公告)日: | 2022-09-06 |
发明(设计)人: | 刘芝荣;张英华;王玉堂;徐欣;杨思佳 | 申请(专利权)人: | 黑龙江省绿色食品科学研究院 |
主分类号: | C12Q1/689 | 分类号: | C12Q1/689;C12Q1/686;C12Q1/10;C12N15/11 |
代理公司: | 青岛海昊知识产权事务所有限公司 37201 | 代理人: | 邱岳 |
地址: | 150023 黑龙江省*** | 国省代码: | 黑龙江;23 |
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摘要: | 检测巴氏奶致病菌的多重PCR引物及其鲁棒性检测方法,包括针对阪崎肠杆菌、大肠杆菌、沙门氏菌三种致病菌各选择了四种特异性基因,并针对所选基因设计了四套引物。检测方法包括DNA模板的制备、建立四套多重PCR反应体系和反应程序、PCR产物鉴定及结果观察。本发明设计了四套引物、四套PCR反应体系和反应程序来提高检测方法的准确性,避免了假阴性;同时,在保证灵敏度不变的情况下对退火温度进行范围确定,避免了由于PCR仪温度控制精度降低以及老化问题而影响目标DNA的扩增及检测产生的不稳定、不准确的问题。同源性对比均超过99.06%;具有高度特异性;灵敏度可达到10 CFU/mL;与国标方法比较具有更高的时效性。 | ||
搜索关键词: | 检测 巴氏奶 致病菌 多重 pcr 引物 及其 鲁棒性 方法 | ||
【主权项】:
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