[发明专利]一种检测禽白血病群特异性抗原的双抗夹心间接ELISA方法在审

专利信息
申请号: 202110613582.0 申请日: 2021-06-02
公开(公告)号: CN113325175A 公开(公告)日: 2021-08-31
发明(设计)人: 陈广;温贵兰;文明;程振涛;胡璇 申请(专利权)人: 贵州大学
主分类号: G01N33/569 分类号: G01N33/569;C07K16/10
代理公司: 贵阳中新专利商标事务所 52100 代理人: 张行超
地址: 550025 贵州省贵*** 国省代码: 贵州;52
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摘要: 发明公开了一种检测禽白血病群特异性抗原的双抗夹心间接ELISA方法,包括:1)用禽白血病病毒RSA株p27基因序列设计一对引物以扩增p27基因,构建重组表达载体经诱导表达获得重组表达蛋白上清表达,上清表达经过纯化后作为免疫原,制备兔源、鼠源多克隆抗体;2)对包被兔源多克隆抗体的酶标板进行洗涤,37℃封闭1h,洗板;3)加入待检血清进行孵育,洗板;4)加入鼠源多克隆抗体进行孵育,洗板;5)加入酶标二抗进行孵育,洗板;6)加入TMB显色液显色,最后加入显色终止液,终止反应;7)利用酶标仪测定步骤4)酶标板孔中液体OD450nm值,根据临界值判定阴阳性。本发明具有制备周期短,成本低,特异性及重复性好,敏感性高,可靠性好等优点。
搜索关键词: 一种 检测 白血病 特异性 抗原 夹心 间接 elisa 方法
【主权项】:
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