[发明专利]一种稳定表达钙离子指示质粒的细胞系的构建方法在审
申请号: | 202110457851.9 | 申请日: | 2021-04-27 |
公开(公告)号: | CN113174405A | 公开(公告)日: | 2021-07-27 |
发明(设计)人: | 李军伟;江乐;谭梦楠;马清霞 | 申请(专利权)人: | 青岛农业大学 |
主分类号: | C12N15/85 | 分类号: | C12N15/85;C12N15/65;C12N15/66;C12N5/10;G01N21/64;C12R1/91 |
代理公司: | 北京东方盛凡知识产权代理事务所(普通合伙) 11562 | 代理人: | 张换君 |
地址: | 266109 山*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | 本发明公开了一种稳定表达钙离子指示质粒的细胞系的构建方法,属于生物技术工程技术领域。所述指示质粒将GCaMP5G的编码基因插入pd2‑EGFP载体EcoR 1和Not 1的多克隆位点处构建;其中,所述GCaMP5G的编码基因如SEQ ID NO:1所示。通过将所述指示质粒引入真核细胞中,并使得所述包含GCaMP5G的载体稳定表达于所述真核细胞中,然后在G418存在的条件下筛选得到细胞系。该细胞系可以稳定表达钙离子指示质粒pd2‑GCaMP5G,并以绿色荧光的形式反应细胞内的钙离子水平,避免了反复的瞬时转染质粒,节省转染试剂等试验耗材、节约时间,为相关试验提供便利,对生物学研究也具有重要意义。 | ||
搜索关键词: | 一种 稳定 表达 离子 指示 质粒 细胞系 构建 方法 | ||
【主权项】:
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